August 14th, 2018
Hier presenteren we een protocol ter invoering van een rat model van Centrale vermoeidheid met behulp van de gewijzigde methode met verscheidene platform (MMPM).
Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen in de modelconstructie van centrale vermoeidheid. Bijvoorbeeld, hoe vermoeidheid te produceren uit zowel fysische als psychologische aspecten en hoe deze te beoordelen. Het grote voordeel van deze techniek is om mentale factoren te combineren met de aangepaste meervoudige platformmethode om het begin van centrale vermoeidheid beter te simuleren.
We kwamen voor het eerst op het idee toen we de nauwe associatie opmerkten tussen intermitterende slaapdeprivatie en centrale vermoeidheid. We probeerden verschillende uren en dagen van deprivatie om centrale vermoeidheid te induceren, en ontdekten uiteindelijk dat 14 uur over 21 dagen het juiste patroon was. Het model toont een goede validiteit in centrale vermoeidheid, en het kan worden gebruikt in toekomstige studies om het onderliggende mechanisme van de ziekte te helpen beoordelen.
Begin met het bouwen van een ondoorzichtige plastic tank zonder deksel. Bevestig 15 ronde platformen op de bodem van de tank, die ordelijk zijn verdeeld in drie rijen en vijf kolommen. Laat voldoende ruimte tussen elk platform, ongeveer 13 centimeter tussen rijen en 10 centimeter tussen kolommen.
Installeer een kraan in de wateruitlaat aan de zijkant van de tank. Maak ten slotte een ijzerdraadnetdeksel voor de tank, met een voedseldoos eraan hangend. Begin met het nummeren van de staartwortels van de ratten met een marker.
Weeg de ratten, met uitzondering van de extreem lichte of zware, en verdeel de rest willekeurig in de model- en controlegroep. Plaats de ratten voorzichtig in de schone kooien en laat ze minimaal drie dagen acclimatiseren naar het lab. Zorg voor voldoende water- en voedselvoorraad.
Begin met het plaatsen van de tank op een vlakke dienst, vul hem dan met zeven centimeter warm water, ongeveer een centimeter onder het platformvlak. Doe vervolgens een dagwaarde van voer en water in de voedseldoos en hang deze op de deksel. Neem vervolgens de modelgroep van ratten uit de kooi bij de staart en plaats ze voorzichtig in de tank.
Laat alle ratten in het water vallen in plaats van op de platformen om hun angst voor water te motiveren. Zorg ervoor dat elke rat een platform krijgt om op te staan, terwijl ratten van de controlegroep in hun oorspronkelijke kooien blijven met voldoende voedsel en water. Bedek vervolgens de tank en bewaak de ratten.
Na 14 uur haal de modelratten uit de tank en droog hun haar met een föhn. Markeer de staarten van de ratten opnieuw als de markering vervaagt. Geef de rat vervolgens terug in de oorspronkelijke kooi met voedsel en water.
Spoel tenslotte de tank uit en open de kraan om het afvalwater weg te laten stromen. Steriliseer vervolgens de tank met een 75% ethanolspray. Open-veldtestresultaten geven aan dat, vergeleken met de controlegroep, er een significante afname is in zowel rechtopstaande bewegingen als gemiddelde snelheid van vrijwillige activiteit bij modelratten.
De verhoogde-plus-labyrinttest toont aan dat 21 dagen van het modelleren zowel de ingangen als de duur in de open arm significant verlaagde in vergelijking met de controlegroep, terwijl er een toename was in deze in de gesloten arm. De uitputtende zwemtest wees erop dat de zwemduur van de modelgroep significant korter is dan die van de controlegroep. Ten slotte geven deze resultaten aan dat dopamine in de hypothalamus, evenals de verhouding van dopamine tot serotonine, significant daalt in de modelgroep vergeleken met de controlegroep, terwijl het serotoninegehalte significant toeneemt.
Na het bekijken van deze video, zou je een goed begrip moeten hebben van hoe je een meervoudig platformtank kunt bouwen en toepassen in je centrale vermoeidheidsmodel. Dit is een niet-invasieve model, die gemakkelijk te beheersen is. Bij het proberen van dit model, is het belangrijk om de rust in de gaten te houden, aangezien ze in de eerste twee weken behoorlijk agressief zijn, en er kunnen verwondingen optreden.
Hoewel dit model bedoeld is om inzicht te geven in centrale vermoeidheid, kan het ook worden toegepast op andere ziekten door factoren te combineren of modelduur aan te passen, zoals navigatie vermoeidheid en depressie.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Deze studie presenteert een protocol voor het introduceren van een rattenmodel van centrale vermoeidheid met behulp van de gemodificeerde meerdere platform methode (MMPM). De aanpak combineert mentale en fysieke factoren om centrale vermoeidheid beter te simuleren, met als doel de onderliggende mechanismen en effecten van intermitterende slaapdeprivatie op het model te verkennen.
This rat model of central fatigue enables mechanistic de-risking in early discovery by simulating both physical and psychological contributors to fatigue, supporting target validation in CNS disorders. The model provides predictive value through quantifiable behavioral and neurochemical endpoints, aiding in lead identification and portfolio triage for fatigue-related indications.
The method fits within the discovery continuum from hypothesis testing to lead identification, providing a disease-relevant system for CNS target validation.