3 oktober 2019
Minimale erytheem dosis (MED) testen wordt gebruikt om doseringsschema's voor ultraviolette straling fototherapie vast te stellen. Het kan individuele variatie in inflammatoire respons beoordelen, maar mist methodologie voor het bereiken van reproduceerbare resultaten. Hier presenteren we een nauwkeurige implementatie van MED en demonstreren het vermogen om individuele variatie in inflammatoire respons vast te leggen.
Minimale erythema dosis testen, of MED testen, is een techniek met een lange geschiedenis in dermatologische en klinische fototherapie instellingen. En het wordt voornamelijk gebruikt om de kleinste hoeveelheid straling te bepalen die nodig is om erytheem te produceren, of zichtbare roodheid op het oppervlak van de huid. In deze specifieke studie, wat we hebben gedaan is het ontwikkelen van verschillende nieuwe technieken en procedures die het mogelijk maken MED-testen worden aangepast voor enigszins ander doel, namelijk om variatie in menselijke ontstekingsactivering nauwkeurig te kwantificeren.
Het belangrijkste voordeel van precisie-doseren en meten in MED-tests heeft betrekking op de reproduceerbaarheid van de resultaten, die vervolgens nieuwe mogelijkheden opent om systematisch andere factoren te onderzoeken die verband kunnen houden met ontsteking. Het aantonen van de procedure zal twee promovendi van mijn lab, Holly Sullivan-Toole en Corinne Carlton. Begin met het begeleiden van de deelnemer naar de testruimte.
Leg de MED-testprocedure uit aan de deelnemer en bevestig het begrip. Leg de manchet op de niet-dominante onderarm. Verwijder alleen de beschermende was papier backing van de laterale, niet centraal, delen van de manchet.
Na het plaatsen van de manchet een op de beoogde blootstelling site, plaats oriëntatiepunten met behulp van een permanente marker om ervoor te zorgen dat manchet twee zal worden gelegen op precies dezelfde locatie. Markeer vervolgens de huid op vier punten buiten de plooien van elk van de zijkleppen van manchet een, de rechterbovenhoek, linksboven, rechtsonder, en linksonder punten. Zorg ervoor dat de markeringen donker genoeg zijn om 24 uur mee te gaan, zodat ze kunnen worden gebruikt om drie manchet op precies dezelfde locatie te plaatsen op de vervolgafspraak.
Gebruik vervolgens een gekalibreerde spectrofotometer om metingen op elk van de zes open diafragma's in volgorde op te nemen. Zorg ervoor dat de spectrofotometer in het midden van de manchetopeningen wordt geplaatst, terwijl het vermijden van mollen, littekens of andere vlekken voor zover mogelijk. Tot slot worden alle SCI-waarden permanent geregistreerd.
Om consistente metingen met hetzelfde kalibratiepunt te garanderen, houdt u de spectrofotometer gedurende de gehele MED-procedure in de oppositie en schakelt u deze niet uit totdat de metingen na de belichting zijn voltooid. Na verwijdering van manchet een, situeren manchet twee op dezelfde locatie met behulp van de oriëntatiepunten getrokken op de huid voor manchet een. Zet de nodige veiligheidsuitrusting op, waaronder UV-proof brillen, mouwen en handschoenen, en zorg ervoor dat de deelnemer hetzelfde doet.
Voordat u de lamp activeert, moet de arm van de deelnemer zodanig worden geplaatst dat de UV-stralen van de lamp loodrecht staan op de hoek van de manchet twee op de arm van de deelnemer. Activeer de lamp kort om de afstand tot twee manchet aan te passen totdat de radiometersensor 270 microwatt per vierkante centimeter afleet. Plaats vervolgens de radiometersensor die naar de UV-lamp gaat, parallel aan het oppervlak van de huid, en zo dicht mogelijk bij de locatie van manchet twee.
Verwijder vervolgens de eerste diafragmabekleding voordat u de UV-bron activeert. Verwijder elk venster in de dosis test patch volgens het schema hier weergegeven, die afzonderlijke dosering schema's afhankelijk van fitzpatrick van de deelnemer Skin Type illustreert. Activeer de UV-bron en de stopwatch tegelijkertijd, en verwijder elk diafragma dat op manchet twee volgens het juiste doseringsschema, dat is gebaseerd op Fitzpatrick Skin Type.
Schakel vervolgens de lamp uit op de precieze tijd die is opgegeven door het doseringsschema. Schakel de stopwatch niet uit, omdat een extra reeks spectrofotometermetingen precies zeven minuten na de deactivering van de lamp moet worden verzameld, zoals hieronder beschreven. Ten slotte, na precies zeven minuten zijn verstreken sinds de deactivering van de lamp, record de laatste spectrofotometer lezingen van elk diafragma in manchet twee.
Begin 24 uur later met het kalibreren van de spectrofotometer ter voorbereiding op de vervolgafspraak. Bereid manchet drie door het verwijderen van alle van de diafragmabekleding en het verlaten van de witte was papier backing op het centrale gedeelte van de patch. Wanneer u drie manchet op de arm van de deelnemer plaatst, verwijdert u de witte waspapierrug van de twee zijkleppen van de pleister.
Gebruik de oriëntatiepunten op de onderarm van de deelnemer om drie manchet te plaatsen op dezelfde locatie als de vorige twee patches. Tot slot, neem een lezing op elk van de zes open openingen in volgorde. Deze resultaten tonen een nauwkeurige huidreactie op MED-tests.
Hier zijn volledige gegevens voor één representatief onderwerp, uitgesplitst naar beoordelingsperiode. Pre-exposure, zeven minuten na blootstelling, en 24 uur follow-up. Elk diafragma, twee tot zes, krijgt 25% meer energie dan de vorige.
Verder worden alle 72 onderwerpen getoond, wat de variatie aangeeft die waarschijnlijk zal worden aangetroffen, over verschillende FST's. Misschien wel de belangrijkste aspecten van precisie MED testen hebben betrekking op de naleving van de juiste dosering schema voor de geïdentificeerde Fitzpatrick Skin Type en ook consequent behoud van de juiste afstand tussen het oppervlak van de huid en de UV-lichtbron. Een deel van onze motivatie bij het ontwikkelen van deze technieken is het vergemakkelijken van toekomstig onderzoek onderzoeken hoe ontstekingsreacties zich kunnen verhouden tot een aantal potentieel interessante variabelen, zoals psychologische, farmacologische of gezondheidsgerelateerde factoren.
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's
Dit artikel presenteert een precieze implementatie van de bepaling van de Minimale Erytheem Dosis (MED), die traditioneel in de fototherapie wordt gebruikt om de kleinste stralingsdosis vast te stellen die huidroodheid veroorzaakt. De studie benadrukt het vermogen van deze verfijnde methodologie om individuele variaties in ontstekingsreacties vast te leggen, waardoor de reproduceerbaarheid van de resultaten wordt verbeterd.
Precisie-testen van de minimale erytheemdosis (MED) maakt gestandaardiseerde kwantificering van individuele inflammatoire responsen mogelijk, waarmee een kritisch tekort aan reproduceerbaarheid in dermatologisch en immunologisch onderzoek in een vroeg stadium wordt aangepakt. Deze methodologische vooruitgang ondersteunt robuuste hypothese-toetsing en vergelijkbaarheid tussen studies, wat een directe impact heeft op targetvalidatie en translationele onderzoekspijplijnen. Verbeterde reproduceerbaarheid en aanpasbaarheid positioneren MED-testen als een herbruikbaar platform voor mechanistische risicoreductie en portefeuilletriage in biofarmaceutische R&D.
MED-testen worden geïntegreerd in het continuüm van ontdekking tot preklinisch onderzoek als een gestandaardiseerde assay voor het kwantificeren van de ontstekingsreactie, ter ondersteuning van zowel targetvalidatie als de ontwikkeling van translationele biomarkers.