Name: Invasieve hemodynamische beoordeling voor het rechter ventrikel systeem en hypoxie-geïnduceerde pulmonale arteriële hypertensie bij muizen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-10-24T13:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 54 s
Description: Leer een invasieve hemodynamische beoordeling van het rechter ventrikel en de pulmonale arterie bij muizen via open-chest chirurgie. Deze methode meet gelijktijdig RVP en PAP voor PAH-onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit onderzoek wordt ondersteund door het postdoctoraal onderwijs-en Onderwijshervormings project van Peking Union Medical College (10023-2016-002-03), het Fuwai Hospital Youth Fund (2018-F09), en het directeur Fonds van Beijing Key Laboratory van preklinisch onderzoek en Evaluatie voor cardiovasculaire implantaat materialen (2018-PT2-ZR05).

Het Animal protocol werd herzien en goedgekeurd door het institutioneel Dierenzorg-en gebruiks Comité in het Fuwai Hospital, de Chinese Academie van medische wetenschappen, Peking Union Medical College (NO. 0000287). De proefdieren werden ondergebracht en gevoed volgens de richtlijnen van dierenwelzijn in China.
Let op: acht tot 12 weken oude mannelijke C57BL muizen werden ondergebracht in een omgeving met een 12 h donker/12 h licht cyclus. De PAH muizen werden 4 weken ondergebracht onder een zuurstofconcentratie van 10%, onderhouden door een zuurstof geregelde hypoxie kamer om pulmonale hypertensie te induceren, en controle muizen werden onder identieke omstandigheden in kamerlucht ondergebracht (21% zuurstof). RVP en PAP metingen werden uitgevoerd aan het einde van de 4 weken van hypoxie Challenge.
1. preoperatieve voorbereiding
<ol><li>De katheter van de drukomvormer (grootte: 1 FR) in 0,9% zoutoplossing bij kamertemperatuur gedurende ten minste 30 minuten voor het hemodynamische experiment weken.</li>
	<li>Filter 2, 2, 2-Tribromoethanol oplossing met 0,22 μm filter en bewaar in 4-graden koelkast.</li>
	<li>Bereid gereinigd chirurgie gereedschappen en benodigdheden zoals handschoenen voor chirurgie.</li>
	<li>Bereid 10 mL van 1,0% spijsverterings enzym oplossing voor de reiniging van de katheter.</li>
	<li>Sluit de catheter van de drukomvormer aan op een druk volume systeem.</li>
	<li>Kalibreer de druk transducer vóór het verkrijgen van drukmetingen voor elke muis.<ol>
<li>Draai de kalibratieknop op 0 mmHg en 25 mmHg om een verificatie druk signaal naar de software voor gegevensverzameling te sturen en de kalibratie-instelling in de software te configureren.</li>
		<li>Draai de knop naar de transducer en stel de balans knop in op nulwaarde.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Stel een standaard stereomicroscoop en een temperatuurgestuurde kleine dier chirurgische tafel voor lichaamstemperatuur onderhoud tijdens de operatie.</li>
	<li>Stel een licht verlichtingssysteem in voor microchirurgie om voldoende licht te geven over het chirurgische gebied.</li>
</ol>2. Open-borstchirurgie en hemodynamische meting
<ol><li>Anesthetize muizen met 250 mg/kg 2, 2, 2-Tribromoethanol via intraperitoneale (i.p.) injectie. Indien nodig, herhaal de aanvullende doses bij 1/3 tot 1/2 van de oorspronkelijke dosis tijdens de procedure.</li>
	<li>Verwijder borst en nek vacht met behulp van een scheerapparaat en ontharings lotion (Figuur 1a, 2a).</li>
	<li>Beveilig elke muis in rugligging op een kleine chirurgische tafel met temperatuurregeling om de lichaamstemperatuur (37 °C) tijdens de operatie te handhaven.</li>
	<li>Reinig de operatieplaats met 70% ethanal.</li>
	<li>Zodra anesthesie is in werking, bevestig adequate anesthesie inductie met behulp van een teen knijpen.</li>
	<li>Maak een middenlijn incisie op de nekhuid (Figuur 1a).</li>
	<li>Ontleden de skeletspieren met behulp van gebogen Tang en stel de luchtpijp bloot (Figuur 1B, 1c).</li>
	<li>Voer intubatie door de mond met behulp van een gemodificeerde 22 G intraveneuze schede katheter. Bevestig dat de slang in de luchtpijp met behulp van een tang (Figuur 1D).</li>
	<li>Sluit de slang aan op een kleine dierlijke ventilator. Bereken en stel de ademhalingssnelheid en het getijden volume in op basis van het lichaamsgewicht volgens de gebruikershandleiding van de ventilator10. Stel bijvoorbeeld de ademhalingssnelheid in op 133/min en het getij volume tot 180 μL voor een 30 g muis op basis van de beschreven berekening.</li>
	<li>Beveilig de slang voor ventilatie met behulp van tape.</li>
	<li>Bevestig adequate anesthesie inductie met behulp van een teen pinch.</li>
	<li>Maak een middenlijn incisie op de borst huid en voorzichtig ontleden de borstspieren met behulp van een cauterie tool (Figuur 2B, 2c).</li>
	<li>Snijd het borstbeen met een schaar over het midden en stel de thoracische holte bloot (Figuur 2D).</li>
	<li>Voorkom bloedingen met behulp van het hulpmiddel tijdens de open-borstchirurgie.</li>
	<li>Stel de rechter ventrikel bloot met oprolmechanismen (Figuur 2E).</li>
	<li>Plaats de door zout geweekte katheter van de drukomvormer via een kleine tunnel die is gemaakt met een 25 G naald in de rechter ventrikel om de RVP te meten (Figuur 2F en Figuur 3a, 3c).</li>
	<li>Houd de katheter kabel en steek de pulmonaire klep op een coaxiale manier met de longslagader. Observeer de druk golfvorm en verkrijg een stabiel PAP-signaal (Figuur 3B, 3D).</li>
	<li>Hemodynamische gegevens opnemen met behulp van het gegevensverwervings systeem en de software.</li>
	<li>Na de laatste metingen euthaniseer muizen humaan door middel van i.p. injectie van een overtollige dosis van 2, 2 en 2-Tribromoethanol oplossing.</li>
	<li>Verwijder voorzichtig katheter uit het rechter hartsysteem en plaats in een 1 mL spuit met 1% verterings enzym oplossing.</li>
	<li>Gebruik gedestilleerd water om de katheter continu voorzichtig te spoelen en op te slaan in de originele doos.</li>
</ol>3. gegevensanalyse voor hemodynamiek
Opmerking: de hemodynamische gegevens werden geregistreerd en geanalyseerd met behulp van Analysis software11 (tabel met materialen).
<ol><li>Selecteer voor elke muis ten minste 10 continue en stabiele heartbeat-cycli zonder ruis om de gemiddelde gegevens van RVP-of PAP-gegevens voor elke parameter te verkrijgen.</li>
	<li>Gebruik de t-toets van de student om de normale lucht controle-en hypoxie-groepen te vergelijken. Opmerking: p < 0,05 werd als statistisch significant beschouwd. Gegevens worden gepresenteerd als het gemiddelde ± SD.</li>
</ol>

<ol><li>Humbert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+therapeutic+interventions+for+patients+with+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Advances in therapeutic interventions for patients with pulmonary arterial hypertension.</a> Circulation. 130 (24), 2189-2208 (2014).</li>
<li>Chatterjee, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Swan-Ganz+catheters%3A+past%2C+present%2C+and+future%3A+a+viewpoint%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">The Swan-Ganz catheters: past, present, and future: a viewpoint.</a> Circulation. 119 (1), 147-152 (2009).</li>
<li>Adamson, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CHAMPION+trial+rationale+and+design%3A+the+long-term+safety+and+clinical+efficacy+of+a+wireless+pulmonary+artery+pressure+monitoring+system%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiac+Failure%22%5BJournal%5D)">CHAMPION trial rationale and design: the long-term safety and clinical efficacy of a wireless pulmonary artery pressure monitoring system.</a> Journal of Cardiac Failure. 17 (1), 3-10 (2011).</li>
<li>Abraham, W. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wireless+pulmonary+artery+haemodynamic+monitoring+in+chronic+heart+failure%3A+a+randomised+controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Wireless pulmonary artery haemodynamic monitoring in chronic heart failure: a randomised controlled trial.</a> The Lancet. 377 (9766), 658-666 (2011).</li>
<li>Adamson, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wireless+pulmonary+artery+pressure+monitoring+guides+management+to+reduce+decompensation+in+heart+failure+with+preserved+ejection+fraction%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Wireless pulmonary artery pressure monitoring guides management to reduce decompensation in heart failure with preserved ejection fraction.</a> Circulation: Heart Failure. 7 (6), 935-944 (2014).</li>
<li>Shatat, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+Kruppel-like+Factor+4+modulates+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+Cell+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Endothelial Kruppel-like Factor 4 modulates pulmonary arterial hypertension.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 50 (3), 647-653 (2014).</li>
<li>SPR-1000 Mouse Pressure Catheter. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://millar.com/products/research/pressure/single-pressure-no-lumen/spr-1000">https://millar.com/products/research/pressure/single-pressure-no-lumen/spr-1000</a> (2019).</li>
<li>Tabima, D. M., Hacker, T. A., Chesler, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+right+ventricular+function+in+the+normal+and+hypertensive+mouse+hearts+using+admittance-derived+pressure-volume+loops%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Measuring right ventricular function in the normal and hypertensive mouse hearts using admittance-derived pressure-volume loops.</a> American Journal of Physiology Heart and Circulatory Physiology. 299 (6), 2069-2075 (2010).</li>
<li>Skuli, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+deletion+of+hypoxia-inducible+factor-2alpha+%28HIF-2alpha%29+alters+vascular+function+and+tumor+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Endothelial deletion of hypoxia-inducible factor-2alpha (HIF-2alpha) alters vascular function and tumor angiogenesis.</a> Blood. 114 (2), 469-477 (2009).</li>
<li>Harvard Inspira Advanced Safety Ventilator User's Manual. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.harvardapparatus.com/media/harvard/pdf/Inspira_557058_9.pdf.">http://www.harvardapparatus.com/media/harvard/pdf/Inspira_557058_9.pdf.</a> (2019).</li>
<li>LabChart. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.adinstruments.com/products/labchart?creative=290739105773_keyword=labchart_matchtype=e_network=g_device=_gclid=CjwKCAjwxrzoBRBBEiwAbtX1n42I2S06KmccVncUHkmExU8KKOXXREyzx8bvTrxYMSze-ooE0atcbRoCliwQAvD_BwE">https://www.adinstruments.com/products/labchart?creative=290739105773_keyword=labchart_matchtype=e_network=g_device=_gclid=CjwKCAjwxrzoBRBBEiwAbtX1n42I2S06KmccVncUHkmExU8KKOXXREyzx8bvTrxYMSze-ooE0atcbRoCliwQAvD_BwE</a> (2019).</li>
<li>Marius, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Definitions+and+diagnosis+of+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Definitions and diagnosis of pulmonary hypertension.</a> Journal of the American College of Cardiology. 62 (25), 42-50 (2013).</li>
<li>Ciuclan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+murine+model+of+severe+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+and+Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">A novel murine model of severe pulmonary arterial hypertension.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 184 (10), 1171-1182 (2011).</li>
<li>Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+of+endotracheal+intubation+and+pulmonary+functional+assessment+for+repeated+studies+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice.</a> Journal of Applied Physiology. 87 (6), 2362-2365 (1999).</li>
<li>Chen, W. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+systolic+pressure+measurements+in+combination+with+harvest+of+lung+and+immune+tissue+samples+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Right ventricular systolic pressure measurements in combination with harvest of lung and immune tissue samples in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (71), 50023(2013).</li>
<li>Ma, Z., Mao, L., Rajagopal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodynamic+characterization+of+rodent+models+of+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Hemodynamic characterization of rodent models of pulmonary arterial hypertension.</a> Journal of Visualized Experiments. (110), 53335(2016).</li>
<li>Chen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Berberine+attenuates+hypoxia-induced+pulmonary+arterial+hypertension+via+bone+morphogenetic+protein+and+transforming+growth+factor-%CE%B2+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cellular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Berberine attenuates hypoxia-induced pulmonary arterial hypertension via bone morphogenetic protein and transforming growth factor-β signaling.</a> Journal of Cellular Physiology. , (2019).</li>
<li>Bueno-Beti, C., Hadri, L., Hajjar, R. J., Sassi, Y. The Sugen 5416/Hypoxia mouse model of pulmonary arterial hypertension. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBueno-Beti%2C+C+%22Experimental+Models+of+Cardiovascular+Diseases.+Methods+in+Molecular+Biology.+vol+1816%22">Experimental Models of Cardiovascular Diseases. Methods in Molecular Biology. vol 1816</a>. Ishikawa, K. , Humana Press. New York, NY. (2018).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Tracheale intubatie is de eerste belangrijke stap voor open-thorax operaties. De klassieke methode van tracheale intubatie voor kleine dieren, zoals ratten of muizen, omvat het maken van een T-vormige incisie op de luchtpijp en het rechtstreeks inbrengen van Y-type tracheale slangen in de luchtpijp. In de praktijk vinden we dat deze methode niet gemakkelijk is tijdens het gebruik. De Y-type tracheale slang is te groot voor kleine dieren en vormt een hoek met de luchtpijp. Het is dus moeilijk om de slang op zijn plaats te...

Pulmonale arteriële hypertensie (PAH) is een chronische en ernstige cardiopulmonale stoornis met een hoogte in longslagader druk (PAP) en rechter ventriculaire druk (RVP) die wordt veroorzaakt door cellulaire proliferatie en fibrose van kleine longslagaders 1. longslagader katheters, ook wel Swan-Ganz katheters2genoemd, worden vaak gebruikt in de klinische controle van RVP en PAP. Bovendien is een draadloos PAP-bewakingssysteem klinisch3,4,5gebruikt. Om de ziekte na te bootsen voor onderzoek bij muizen, wordt een hypoxische omgeving gebruikt om humane Klinische manifestaties van PAH6te simuleren. Bij de evaluatie van PAP bij dieren zijn grote dieren relatief gemakkelijk te controleren door middel van longslagader katheters met dezelfde techniek als voor menselijke proefpersonen, maar kleine dieren zoals ratten en muizen zijn moeilijk te beoordelen vanwege hun kleine lichaamsgrootte. Hemodynamische meting van het rechter ventrikel systeem bij muizen is mogelijk met een ultrakleine maat 1 FR katheter7. Een methode voor het meten van RVP en PAP bij muizen is gerapporteerd in de literatuur8,9, maar de methodologie mist een gedetailleerde beschrijving. RVP en PAP zijn moeilijker te meten dan de linker ventriculaire druk vanwege de anatomische verschillen tussen de linker en rechter hart systemen.
Om zowel PAP-als RVP-parameters in dezelfde muis te krijgen, beschrijven we een open-borstchirurgie-gebaseerde aanpak voor rechter hart hemodynamische metingen, de validering ervan met gezonde en PAH muizen, en hoe om te voorkomen dat kunstmatige gegevens worden gegenereerd tijdens de gecompliceerde open-Chest Chirurgie. Hoewel deze techniek het beste kan worden uitgevoerd door een goed opgeleide chirurg, heeft het het voordeel om PAP en RVP in dezelfde muis te kunnen beoordelen.

<table><tbody><tr><td>2,2,2-Tribromoethanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T48402-5G</td><td>Voor anesthesie</td></tr><tr><td>Animal temperature controller</td><td>Physitemp Instruments, Inc.</td><td>TCAT-2LV</td><td>Voor temperatuurcontrole</td></tr><tr><td>Dissection forceps</td><td>Fine Science Tools, Inc.</td><td>11274-20</td><td>Voor chirurgie</td></tr><tr><td>Gemini Cautery System</td><td>Gemini</td><td>GEM 5917</td><td>Voor chirurgie</td></tr><tr><td>Intravenous catheter (22G)</td><td>BD angiocath</td><td>381123</td><td>Voor intubatie</td></tr><tr><td>LabChart 7.3</td><td>ADInstruments</td><td></td><td>Voor data-analyse</td></tr><tr><td>Light illumination system</td><td>Olympus</td><td></td><td>Voor chirurgie</td></tr><tr><td>Mikro-Tip catheter</td><td>Millar Instruments, Houston, TX</td><td>SPR-1000</td><td>Voor drukmeting</td></tr><tr><td>Millar Pressure-Volume Systems</td><td>Millar Instruments, Houston, TX</td><td>MVPS-300</td><td>Voor drukmeting</td></tr><tr><td>O2 Controller and Hypoxia chamber</td><td>Biospherix</td><td>ProOx 110</td><td>Voor chronische hypoxie</td></tr><tr><td>PowerLab Data Acquisition System</td><td>ADInstruments</td><td>PowerLab 16/30</td><td>Voor dataregistratie</td></tr><tr><td>Scissors</td><td>Fine Science Tools, Inc.</td><td>14084-08</td><td>Voor chirurgie</td></tr><tr><td>Small animal ventilator</td><td>Harvard Apparatus</td><td>Mini-Vent 845</td><td>Voor chirurgie</td></tr><tr><td>Stereomicroscope</td><td>Olympus</td><td>SZ61</td><td>Voor chirurgie</td></tr><tr><td>Surgery tape</td><td>3M</td><td></td><td>Voor chirurgie</td></tr><tr><td>Terg-a-zyme enzyme</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z273287-1EA</td><td>Voor katheterreiniging</td></tr></tbody></table>

invasieve hemodynamische beoordeling voor het rechter ventrikel systeem en hypoxie-geïnduceerde pulmonale arteriële hypertensie bij muizen

Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice

Pulmonale arteriële hypertensie (PAH) is een chronische en ernstige Cardiopulmonaire aandoening. Muizen zijn een populair diermodel dat wordt gebruikt om deze ziekte na te bootsen. De evaluatie van rechter ventriculaire druk (RVP) en pulmonale slagader druk (PAP) blijft echter technisch uitdagend bij muizen. RVP en PAP zijn moeilijker te meten dan de linker ventriculaire druk vanwege de anatomische verschillen tussen de linker en rechter hart systemen. In dit artikel beschrijven we een stabiele rechter hart hemodynamische meetmethode en de validatie ervan met behulp van gezonde en PAH muizen. Deze methode is gebaseerd op open-borstchirurgie en mechanische ventilatie ondersteuning. Het is een ingewikkelde procedure in vergelijking met gesloten borst procedures. Hoewel een goed opgeleide chirurg nodig is voor deze operatie, is het voordeel van deze procedure dat het zowel RVP-als PAP-parameters tegelijkertijd kan genereren, dus het is een voorkeurs procedure voor de evaluatie van PAH-modellen.

De sonde van de drukomvormer werd in de rechter ventrikel (Figuur 3A) ingebracht via een tunnel die door een 25 G-naald werd geëxpandeerd, en een typische RVP-golfvorm (Figuur 3C) werd verkregen. De katheter werd voortdurend aangepast en langzaam gevorderd en bewaard in dezelfde as als de longslagader tijdens het passeren van de pulmonaalklep (Figuur 3B). Toen de druksensor met succ...

Hier presenteren we een protocol voor het uitvoeren van een invasieve hemodynamische beoordeling van de rechter ventrikel en longslagader bij muizen met behulp van een open-borstchirurgie aanpak.

Invasieve hemodynamische beoordeling voor het rechter ventrikel systeem en hypoxie-geïnduceerde pulmonale arteriële hypertensie bij muizen

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. ...

Dit protocol is een open borst chirurgie gebaseerde hemodynamische beoordeling en het is nuttig voor de juiste ventriculaire en longslagader druk evaluatie bij kleine dieren zoals muizen. Het voordeel van deze procedure is dat het zowel VP- als PAP-parameters tegelijkertijd kan genereren. Het heeft dus de voorkeur voor evaluaties van PAK-modellen.Begin met het opzetten van de apparatuur voor chirurgie. Week de druktransducerkatheter in 0,9% zout bij kamertemperatuur gedurende ten minste 30 minuten voor het hemodynamische experiment. Sluit vervolgens de katheter aan op een drukvolumesysteem.Kalibreer de druktransducer door de kalibratieknop op nul en 25 millimeter kwik te draaien om een verificatiedruksignaal naar de software voor gegevensverwerving te sturen en configureer vervolgens de kalibratie-instelling. Draai de knop om te transduceren, en stel de balans klep tot nul baseline. Stel een standaard stereomicroscoop, temperatuurgecontroleerde kleine dierlijke chirurgische lijst, en een licht verlichtingssysteem voor microchirurgie op.Zodra de muis goed is verdoofd, verwijder de borst en nek vacht met behulp van een scheerapparaat en ontharing lotion. Zet de muis in de supinepositie op de temperatuurgecontroleerde chirurgische tafel. Na ervoor te zorgen dat de anesthesie van kracht is, maak een middellijn incisie op de nekhuid.Ontleden de skeletspier met gebogen tangen en bloot de luchtpijp. Voer intubatie uit via de mond met een 22-meter intraveneuze schedekatheter, wat bevestigt dat de slang zich in de luchtpijp bevindt met tangen. Sluit de slang aan op een kleine dierlijke ventilator en zet het voor ventilatie met behulp van tape.Maak vervolgens een middellijn incisie op de borsthuid en ontleed zorgvuldig de borstspier met behulp van een cautery tool. Snijd het borstbeen met behulp van een schaar in het midden, en bloot de borstholte. Zorg ervoor dat u bloedingen met behulp van de cautery tool te voorkomen.Stel de rechter ventrikel bloot met oprolmechanismen en steek vervolgens de zoutlijn doorweekte druktransducerkatheter door een kleine tunnel die is gemaakt met een naald van 25 meter in de rechterventrikel om de juiste ventriculaire druk te meten, of RVP. Houd de katheterkabel vast en kruis de longklep op een coaxiale manier met de longslagader. Observeer de drukgolfvorm en verkrijg een stabiele longslagaderdruk of PAP-signaal.Neem vervolgens de heodynamische gegevens op met behulp van de software voor het verzamelen van gegevens. Verwijder de katheter voorzichtig uit het juiste hartsysteem en plaats deze in een spuit van één milliliter met een spijsverteringsenzymoplossing van 1%. Dit protocol werd met succes gebruikt om RVP- en PAP-golfvormen bij muizen te verkrijgen door een drukomvormerkatheter in de rechterventrikel en de longslagader in te voegen.Om kunstmatige gegevens te voorkomen, werden segmenten met ruis uitgesloten van de gegevensanalyse en werden correcties aangebracht indien het nulniveau van de katheter was afgedreven. RVP en PAP werden gemeten bij muizen met geïnduceerde chronische hypoxie, en de resultaten werden vergeleken met die verkregen uit een controlegroep. Systolische PAP, diastolische PAP, gemiddelde PAP, en rechts ventriculaire systolische druk waren allemaal aanzienlijk verhoogd in de chronische hypoxie groep.Het belangrijkste om te onthouden is om de druktransducer katheter in te voegen in de rechter ventrikel, zorg ervoor dat schade aan de katheter te voorkomen en bevestigen de gladde RVP golfvorm verschijnt op het scherm.

invasive-hemodynamic-assessment-for-right-ventricular-system-hypoxia

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Een specifieke en snelle protocol tegelijkertijd onderzoeken juiste hartfunctie, longontsteking en de immuunrespons wordt beschreven als leermiddel. Video en cijfers beschrijven fysiologie en microdissectie technieken in een georganiseerd team-aanpak die aanpasbaar is om te worden gebruikt voor kleine tot grote studies.

Rechter ventrikel systolische druk Metingen in combinatie met Harvest van Lung en Immune weefselmonsters in Muizen

Dit artikel geeft een protocol voor de echocardiografische evaluatie van rechter ventriculaire omvang en pulmonale hypertensie bij muizen. Toepassingen zijn onder andere fenotype vastberadenheid en seriële beoordeling in transgene en toxine-geïnduceerde muismodellen van cardiomyopathie en pulmonale vasculaire ziekte.

Echocardiografische Beoordeling van de rechter hart in Muizen

Rechterventrikel (RV) disfunctie is cruciaal voor het ontstaan ​​van hart-en vaatziekten, maar beperkt voorhanden zijn voor de evaluatie ervan. Recente ontwikkelingen in de echografie zorgen voor een niet-invasieve en accurate optie voor longitudinale RV studie. Hierin hebben we een stap-voor-stap echocardiografische onder toepassing van een muizenmodel van drukoverbelasting detail.

Beoordeling van de rechter ventrikel structuur en functie in een muismodel van longslagader Vernauwing door Transthoracale Echocardiografie

Pulmonaire arteriële hypertensie (PAH) is een ziekte van pulmonaire arteriolen die leidt tot hun obliteratie en de ontwikkeling van rechterventrikelfalen. Rodentmodellen van PAH zijn cruciaal voor het begrijpen van de pathofysiologie van PAH. Hier demonstreren we hemodynamische karakterisering, met rechter hartkatheterisatie en echografie, bij de muis en de rat.

Hemodynamische karakterisatie van diermodellen van pulmonale arteriële hypertensie

Presenteren we een protocol voor het creëren van rechts ventriculaire dysfunctie in het model van een varken door inducerende ARDS. We tonen invasieve monitoring van links en rechts ventriculaire cardiale output met behulp van stroom sondes rond de aorta en de longslagader, evenals de metingen van de bloeddruk in de aorta en de longslagader.

Invasieve hemodynamische Monitoring van aorta en pulmonaire slagader hemodynamica in een grote diermodel van ARDS

Dit protocol beschrijft de inductie van pulmonale hypertensie (PH) bij muizen op basis van de blootstelling aan hypoxie en de injectie van een VEGF receptor antagonist. De dieren ontwikkelen PH en rechts ventriculaire (RV) hypertrofie 3 weken na de inleiding van het protocol. De functionele en morfometrische karakterisering van het model wordt ook gepresenteerd.

Inductie en karakterisering van pulmonale hypertensie bij muizen met behulp van het Hypoxia/SU5416-model

Hier bieden we een nuttige aanpak voor het bestuderen van het mechanisme van rechter ventriculaire mislukking. Een handiger en efficiënter aanpak van de longslagader vernauwing wordt vastgesteld met behulp van chirurgische instrumenten gemaakt inhouse. Bovendien worden methoden voor het evalueren van de kwaliteit van deze aanpak door echocardiografie en catheterisatie geleverd.

Inductie van rechter ventrikel falen door longslagader vernauwing en evaluatie van rechter ventriculaire functie bij muizen

Het huidige protocol beschrijft de echocardiografische karakterisering van de morfologie en functie van de rechterventrikel in een rattenmodel van pulmonale arteriële hypertensie.

Uitgebreide echocardiografische beoordeling van de rechterventrikelfunctie in een ratmodel van pulmonale arteriële hypertensie

Dit protocol biedt een stapsgewijze procedure voor het uitvoeren van meervoudige intraveneuze toediening van bolusdoses en invasieve hemodynamische monitoring bij muizen. Onderzoekers kunnen dit protocol gebruiken voor toekomstige screening van therapeutische verbindingen voor hypertensie van de longslagader.

Meervoudige intraveneuze bolusdosering en invasieve hemodynamische beoordeling in een door hypoxie geïnduceerd model voor hypertensie van de longslagader van muizen

De presentatie van gedetailleerde methoden voor de evaluatie van de rechterventrikelfunctie zal de kwaliteit en betrouwbaarheid van onderzoek naar pulmonale hypertensie verbeteren, een robuust kader bieden voor toekomstige studies en de reproduceerbaarheid in verschillende laboratoria verbeteren.

Evaluatie van de rechterventrikelfunctie in experimentele modellen van pulmonale arteriële hypertensie

Leer een invasieve hemodynamische beoordeling van het rechter ventrikel en de pulmonale arterie bij muizen via open-chest chirurgie. Deze methode meet gelijktijdig RVP en PAP voor PAH-onderzoek.

Invasieve hemodynamische beoordeling voor het rechter ventrikel systeem en hypoxie-geïnduceerde pulmonale arteriële hypertensie bij muizen (Video) | JoVE Journal

Invasieve hemodynamische beoordeling voor het rechter ventrikel systeem en hypoxie-geïnduceerde pulmonale arteriële hypertensie bij muizen

Meer video's verkennen