May 19th, 2020
Een knaagdier model van linker hart volume overbelasting van mitralregurgitatie wordt gemeld. Mitralisregurgitatie van gecontroleerde ernst wordt veroorzaakt door het bevorderen van een naald van gedefinieerde afmetingen in de voorste bijsluiter van de mitralisklep, in een kloppend hart, met echografie.
Mitralis regurgitatie is een veel voorkomende klepziekte die leidt tot hartfalen. Dit rat MR-model kan helpen om ons begrip van de onderliggende mechanismen van hartfalen te bevorderen. Dit model kan worden gebruikt om MR in een kloppend hart na te bootsen de hemodydynamica waargenomen bij patiënten met deze kleplaesie en het maken van dit model klinisch relevant.
Microchirurgie en handling ervaring zal helpen bij het repliceren van dit protocol en vertrouwdheid met echocardiografische beeldvorming en beeldinterpretatie zijn belangrijke aspecten voor succesvolle plaatsing van naalden. Aangezien dit een beeldgestuurde techniek is, kan visuele demonstratie van de methoden helpen bij het begrijpen van de procedure. Na het uitvoeren van een linker thoracotomie volgens standaard protocollen in een verdoofde 350 tot 400 gram volwassen Sprague-Dawley rat, gebruik maken van een 6-0 PROLENE hechting en microneedle houder om een pursestring hechting te plaatsen op de top van de linker ventrikel.
Voorzichtig tether de apicale hechting om de top te stabiliseren en steek een 23-gauge naald gespoeld met zout en met een stopcock aan het distale uiteinde in het midden van de pursestring hechting en in de linker ventriculaire holte. Met behulp van een hand om de naald stabiel te begeleiden, gebruik de andere hand om tegelijkertijd de trans oesofageale echosonde te manipuleren om een optimale echoweergave te bereiken voor het visualiseren van de naald. Met behulp van real-time echografie begeleiding, vooraf de naald in de richting van de ventriculaire kant van de voorste mitralisfolder.
Zodra de naaldpositie is bevestigd, gaat u de naald in één fijne beweging door de klepfolder. Eenmaal door de bijsluiter, trek de naald in de linker ventriculaire kamer uit de buurt van de mitralisklep en hebben een assistent zet kleur Doppler beeldvorming om mr het aanpassen van de echo sonde te bevestigen als dat nodig is om een beter zicht te verkrijgen. Zodra de MR is bevestigd, trek je de naald volledig uit de linker ventriculaire holte en bind je de pursestring hechting voorzichtig vast.
Gebruik vervolgens een steriel gaas om bloed op de top en in de borstholte te absorberen. Na vijf tot 10 minuten van stabiele hartfunctie, gebruik maken van een onderbroken 4-0 Vicryl hechting om de ribben benaderen terwijl het verminderen van de isoflurane tot 2%Vervolgens, steek een borstbuis in de zesde intercostale ruimte en zet de buis vast aan de steriele gordijnen om onbedoelde vooruitgang van de buis in de borstholte te voorkomen, dan afwerking ongeveer de ribben. Gebruik een continue hechting om de spierlaag met de isoflurane te sluiten op 1,5%en de huidlaag met de isoflurane op 1%Sluit een 10 milliliter Luer slotklep getipt spuit aan de borst buis en afvoer 10 tot 12 milliliter lucht uit de borstholte voor het verwijderen van de buis.
Zodra de buis is verwijderd, toedienen van een laatste onderhuidse dosis Carprofen. Na het uitschakelen van het isoflurane, zet de mechanische ventilatie voort terwijl de rat spenen van de anesthesie die de vitale functies bewaakt. Bij het begin van spontane ademhaling, zet de ventilatie uit om het vermogen van de rat te testen om een dergelijke ademhaling en een goede perifere holte zuurstofverzadiging te behouden.
Zodra de rat in staat is om perifere capillaire zuurstofverzadiging niveaus te handhaven zonder de ventilatie, snijd de verankering hechtingen aan de endotracheale buis en extubate het dier. Wanneer de rat ambulant is, breng het dier naar een schone kooi met minimale beddengoed en blijf de vitale functies te controleren met een handheld perifere capillaire zuurstofverzadiging monitor. Binnen drie uur na het ontwaken, dienen buprenorfine.
Twee weken na de operatie plaatst u de verdoofde rat in de juiste decubituspositie en plaatst u een acht megahertz 8-Franse intracardiac ultrasone echografiesonde met een kleine hoeveelheid gel die op de punt in de slokdarm van het dier wordt aangebracht. Met behulp van kleur Doppler beeldvorming in de twee-kamer weergave, visualiseren de linker ventrikel en linker atrium en meet het gebied van de linker atrium en MR jet om de berekening van de MR straal gebied fractie mogelijk te maken zoals aangegeven. Om het gebied van de regurgitant opening te benaderen, gebruikt u de buitenste diameter van de naald om het gebied van 23-meter naald te berekenen met behulp van de formule.
Verkrijg continue golf Doppler beeldvorming met de Doppler poort bij de opening van de regurgitant jet en traceer de golfvorm om de snelheid tijd integraal van de regurgitant jet berekenen. Gebruik de formule om het MR-volume te schatten. Draai vervolgens de echosonde zijwaarts met de klok mee om de beeldvorming van de longader te verkrijgen en de systolische en diastolische golfsnelheden te meten met behulp van de vergelijking om de verhouding te berekenen.
In deze beelden kan de richting van de naald worden waargenomen als deze in de mitralisklep wordt ingebracht. Hier, het gat links in de mitralisklep folder in een representatieve rat uitbeplant op twee weken na de procedure wordt getoond. Na twee weken na de operatie zijn de harten van ratten met MR bolvormig en ernstig verwijd en is een levendige MR-straal zichtbaar met een gemiddeld gebied van ongeveer 21 vierkante millimeter en een gemiddelde snelheidstijd van ongeveer 40 centimeter.
De genormaliseerde MR-fractie is meestal ongeveer 42%, wat wordt beschouwd als ernstig volgens de richtlijnen van de American Society of Echocardiography. De ernst van de MR is voldoende om de omkering van de longstroom te induceren met een afname van de systolische/diastolische ratio van ongeveer 0,9 bij aanvang tot ongeveer min 0,7 bij twee weken. Real-time beeldvorming met trans oesofageale echocardiografie en de introductie van een naald in het kloppende hart om de mitralisfolder te doorboren is een haalbare chirurgische ingreep die kan worden onderwezen.
Ons model kan worden gecombineerd met ventriculaire cardiomyopathieën om cardiale remodellering te bestuderen en vergemakkelijkt het onderzoek naar de impact van het vroege begin versus het late begin van MR op cardiale remodellering.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Dit artikel presenteert een knaagdiermodel van overbelasting van het linker hartvolume als gevolg van mitralisregurgitatiegeïnduceerd in een kloppend hart met behulp van echografie. Het model is bedoeld om het begrip van de mechanismen van hartfalen te verbeteren.