Name: Een Murine-model van ischemisch netvliesletsel veroorzaakt door voorbijgaande bilaterale gemeenschappelijke halsslagader Occlusie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-11-12T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 20 s
Description: Leer een muizenmodel van ischemisch netvliesletsel via voorbijgaande bilaterale halsslagaderocclusie. Deze methode vereenvoudigt chirurgie en versnelt onderzoek naar ischemische retinopathieën en geneesmiddelscreening.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door Grants-in-Aid for Scientific Research (KAKENHI) (18K09424 aan Toshihide Kurihara en 20K18393 aan Yukihiro Miwa) van het Ministerie van Onderwijs, Cultuur, Sport, Wetenschap en Technologie (MEXT).

Alle hier beschreven methoden zijn goedgekeurd door de Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) van Keio University School of Medicine.
1. Voorbereiding van chirurgische instrumenten en dieren
<ol><li>Autoclaaf chirurgische instrumenten en bewaar ze in 70% ethylalcohol. Maak vóór elke nieuwe chirurgische ingreep zorgvuldig chirurgische instrumenten schoon met 70% ethylalcohol.</li>
	<li>Bereid mannelijke BALB/cAJc1 muizen (6 weken oud, 26-28 kg) voor in een specifiek ziekteverwekkervrije (SPF) kamer om steriele omstandigheden te behouden voor, tijdens en na de operatie.</li>
</ol>2. Voorbijgaande bilaterale gemeenschappelijke halsslagader occlusie (tBCCAO)
<ol><li>Plaats een muis onder narcose via intraperitoneale injectie met een combinatie van midazolam (40 μg/100 μL), medetomidine (7,5 μg/100 μL) en butorphanoltartraat (50 μg/100 μL), "MMB" genoemd, zoals eerder beschreven8,9. Houd de rughuiden van de muis vast om te voorkomen dat de muis zijn ogen stoot totdat de muis volledig is verdoofd.<ol>
<li>Beoordeel de diepte van de anesthesie door de muisteen te knijpen totdat deze geen reactie heeft, waarvan de methode vaak wordt gebruikt voor het controleren van volledige anesthesie10. OPMERKING: Over het algemeen is minder dan 5 minuten nodig om muizen in slaap te laten vallen. Goede recepten voor algemene anesthesie kunnen per instelling verschillen.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Breng één druppel van 0,1% gezuiverde natriumhyaluronate oogdruppeloplossing aan op de ogen om droogheid op de ogen onder narcose te voorkomen.</li>
	<li>Plaats de muis op zijn rug en bevestig de poten van de muis met plakband.</li>
	<li>Desinfecteer het nekgebied van de muis met 70% ethylalcohol vóór de operatie. OPMERKING: Extra knippen van de vacht werd niet uitgevoerd omdat dit daaropvolgende huidontsteking kan veroorzaken11,12.</li>
	<li>Voer sagittale incisie van de nek uit met een mes (figuur 1). OPMERKING: Er moet een incisie worden gemaakt op de middellijn tussen de nek, het borstbeen en de luchtpijp.</li>
	<li>Scheid beide speekselklieren zorgvuldig met behulp van twee tangen en mobiliseer ze om de onderliggende CCA's te visualiseren.</li>
	<li>Isoleer de juiste CCA zorgvuldig van de respectieve vagale zenuwen en bijbehorende aderen zonder hun structuren te beschadigen, en plaats twee 6-0 zijden hechtingen onder de CCA. Bind de twee banden stevig vast om de bloedstroom te blokkeren (figuur 1). OPMERKING: Tijdens de procedure kunnen kleine aderen beschadigd raken. Als er bloedingen worden waargenomen, is afvegen nodig om de CCA's duidelijk te visualiseren.</li>
	<li>Zoek de linker CCA voorzichtig van de respectievelijke vagale zenuwen en bijbehorende aderen zonder hun structuren te beschadigen, en sluit de linker CCA gedurende 2 seconden af met een klem (figuur 1). OPMERKING: Een 6-0 zijden hechtnaald moet onder de linker CCA worden geplaatst om een plaats voor klemmen te markeren.</li>
	<li>Na heropening van de linker CCA hechten hechtwonden van de nek door een 6-0 zijden hechting en brengen een slok antibioticum (50 μL) aan op de nek om bacteriële infectie te remmen. OPMERKING: Verwijder voorzichtig een klem om beschadiging van de slagaderlijke wand te voorkomen bij het heropenen van de linker CCA.</li>
	<li>Injecteer 0,75 mg/kg atipamezolehydrochloride intraperitoneaal aan de muis om de muis te helpen snel hersteld te worden van diepe anesthesie. Breng de muis terug naar een muizenkooi met voorverwarmde pads. OPMERKING: Laat de muis niet onbeheerd achter totdat de muis weer voldoende bij bewustzijn is om de strenge ligfiets te behouden.</li>
	<li>Injecteer 0,4 mg/kg butorphanoltartraat aan de muis voor de behandeling van pijn wanneer de muis wakker wordt. OPMERKING: Het protocol kan hier worden gepauzeerd. Als eerste hint voor succesvolle tBCCAO kan het hangen van het ooglid van de muis worden waargenomen (figuur 2).</li>
	<li>Injecteer voor euthanasie 3x MMB-mengsel aan de muizen en offer ze op voor experimenten.</li>
</ol>3. Algemene waarnemingen (overlevingspercentages en hangend ooglid)
<ol><li>Controleer na de operatie de overlevingskansen op alle doodsoorzaken op dag 0 (na de operatie), 1, 3 en 7.</li>
	<li>Beoordeel het hangen van het ooglid met een 4-punts beoordelingsschaal: 1 = geen hangende, 2 = milde hangende (~50%), 3 = ernstig hangen (meer dan 50%), en 4 = ernstig hangen met ooguitvloeiing.</li>
</ol>4. Retinale bloedperfusie
<ol><li>Injecteer 200 μL FITC-dextran (25 mg/ml) in de linkerventrikel van de muis, die vaak wordt gebruikt voor de observatie van bloedperfusie in de retinale vaten van de muis13,14.</li>
	<li>2 minuten na circulatie, enucleate de ogen en fixeer in 4% paraformaldehyde gedurende 1 uur. Het netvlies werd zorgvuldig verkregen en vlak gemonteerd, zoals eerder beschreven15, en onderzocht via een fluorescentiemicroscoop.</li>
	<li>Maak foto's van de retinale hele mounts bij 4x vergroting en voeg samen in een single met behulp van een merge analyzer, eerder beschreven16.</li>
	<li>Meet de doordrenkte gebieden via een scheepsanalysetool in NIH Fiji/ImageJ-software.</li>
</ol>5. Westelijke vlek
<ol><li>3 en 6 uur na tBCCAO, verkrijg de ogen van muizen en breng onmiddellijk over naar een Petrischaal met koude PBS om het netvlies te isoleren.</li>
	<li>Voer na isolatie van het netvlies western blotting uit, zoals eerder beschreven9.</li>
	<li>Incubeer met antilichamen voor hypoxie-induceerbare factor-1α (HIF-1α; een algemene hypoxiemarker) en voor β-Actin (een interne belastingsregeling) 's nachts gevolgd door incubatie van HRP-geconjugeerde secundaire antilichamen. Visualiseer de signalen via chemiluminescentie.</li>
</ol>6. Kwantitatieve PCR (qPCR)
<ol><li>6, 12 en 24 uur na tBCCAO, het verkregen netvlies verwerken voor qPCR, zoals eerder beschreven17.</li>
	<li>Voer qPCR uit via een real-time PCR-systeem. De gebruikte primers staan vermeld in tabel 1. Bereken vouwveranderingen tussen niveaus van verschillende transcripties volgens de ΔΔCT-methode.</li>
</ol>7. Immunohistochemie (IHC)
<ol><li>3 dagen na tBCCAO, verkrijg de ogen van muizen en sluit in paraffine.</li>
	<li>Snijd de paraffine-ingebedde ogen door een microtome om de oogsecties te verkrijgen.</li>
	<li>De-paraffiniseren en beitsen van de oogsecties van 5 μm dikte zoals eerder beschreven13.</li>
	<li>Incubeer met een antilichaam voor gliafibrillair zuur eiwit (GFAP; een betrouwbare marker voor astrocyten en Müller-cellen in het netvlies) 's nachts gevolgd door incubatie van Alexa Fluor 555-geconjugeerd secundair antilichaam.</li>
	<li>Gebruik DAPI (4′,6-diamidino-2-fenylindole) voor het beitsen van de kern in het netvlies. Visualiseer signalen via een fluorescentiemicroscoop.</li>
	<li>Beoordeel de morfologiescore met een 4-punts ratingschaal, zoals eerder beschreven13,18: 0 = geen signaal, 1 = weinig positieve glia-eindvoeten in de ganglioncellaag (GCL), 2 = weinig gelabelde processen die van GCL tot de buitenste kernlaag (ONL) reiken, en 3 = de meest geëtiketteerde processen die van GCL tot ONL reiken.</li>
</ol>8. Elektroretinografie (ERG)
<ol><li>3 en 7 dagen na tBCCAO, voer ERG uit met behulp van een Ganzfeld-koepel, acquisitiesysteem en LED-stimulatoren, zoals eerder beschreven9.</li>
	<li>Na donkere aanpassing 's nachts, verdoof muizen met een combinatie van MMB onder schemerig rood licht.</li>
	<li>Gebruik een gemengde oplossing van 0,5% tropicamide en 0,5% fenylephrine om de pupillen te verwijden.</li>
	<li>Plaats de actieve elektroden op de contactlens en plaats de referentieelektrode in de mond.</li>
	<li>Verkrijg ERG-reacties van beide ogen van elk dier.</li>
	<li>Leg scotopische reacties vast onder donkere aanpassing met verschillende stimuli.</li>
	<li>Meet de amplitudes van een golf van de basislijn tot het laagste punt van een golf.</li>
	<li>Meet de amplitudes van b-wave van het laagste punt van een golf tot de piek van b-wave.</li>
	<li>Houd alle muizen warm tijdens de procedure met behulp van warmtekussens.</li>
</ol>9. Optische coherentietomografie (OCT)
<ol><li>2 weken na tBCCAO, voer OCT uit met behulp van SD-OCT-systeem, zoals eerder gemeld8,9.</li>
	<li>Voor de meting, onderwerpen muizen aan mydriasis door een gemengde oplossing van 0,5% tropicamide en 0,5% fenylephrine, en aan algemene anesthesie door een mengsel van MMB.</li>
	<li>Verkrijg B-scanafbeeldingen van equatoriale segmenten van en-face scans.</li>
	<li>Onderzoek het netvlies op 0,2, 0,4 en 0,6 mm van het oogzenuwhoofd.</li>
	<li>Meet de netvliesdikte van de retinale zenuwvezellaag (NFL) tot het externe beperkende membraan (ELM) en beschouw het gemiddelde van de gemeten waarden als netvliesdikte van een individuele muis.</li>
	<li>Plot de resultaten als spindiagrammen.</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

In de studie hebben we aangetoond dat tBCCAO, met behulp van eenvoudige hechtingen en een klem, retinale ischemie en bijbehorende netvliesdisfunctie kan induceren. Bovendien hebben we aangetoond dat ons huidige protocol voor de ontwikkeling van een muismodel van retinale ischemie gemakkelijker en sneller is in vergelijking met andere eerdere protocollen voor de ontwikkeling van retinale ischemische letselmodellen2,3,7.
<p cl...

Het netvlies is een neurosensorisch weefsel voor visuele functie. Aangezien een aanzienlijke hoeveelheid zuurstof nodig is voor de visuele functie, staat het netvlies bekend als een van de hoogste zuurstofeisende weefsels in het lichaam1. Het netvlies is vatbaar voor vaatziekten omdat zuurstof via bloedvaten wordt geleverd. Verschillende soorten vasculaire ziekten, zoals diabetische retinopathie en retinale bloedvaten (aderen of slagaders) occlusie, kunnen retinale ischemie veroorzaken. Om pathologische mechanismen van retinale ischemie te onderzoeken, worden reproduceerbare en klinisch relevante experimentele modellen van retinale ischemie noodzakelijk geacht. Midden-cerebrale slagader occlusie (MCAO) door het inbrengen van een intraluminaal filament is de meest gebruikte methode voor de ontwikkeling van in vivo knaagdiermodellen van experimentele cerebrale ischemie2,3. Vanwege de nabijheid van de oogheelkundige slagader (OpA) tot MCA, worden MCAO-modellen ook tegelijkertijd gebruikt om de pathofysiologie van retinale ischemie4,5,6te begrijpen. Om cerebrale ischemie samen met retinale ischemie op te wekken, worden lange filamenten meestal ingebracht door incisie van de gemeenschappelijke halsslagader (CCA) of de externe halsslagader (ERK). Deze methoden zijn moeilijk uit te voeren, vereisen een lange tijd om de operatie te voltooien (meer dan 60 minuten voor één muis) en leiden tot hoge variabiliteiten in de resultaten na de operatie7. Het blijft belangrijk om een beter model te ontwikkelen om deze zorgen te verbeteren.
In deze studie gebruikten we eenvoudigweg korte voorbijgaande bilaterale CCA occlusie (tBCCAO) met naalden en een klem om retinale ischemie bij muizen op te wekken en analyseerden we typische resultaten van ischemische verwondingen in het netvlies. In deze video geven we een demonstratie van de tBCCAO-procedure.

```html
<table><tbody><tr><td>Atipamezole hydrochloride</td><td>Zenoaq</td><td>Antisedan</td><td>Voor anti-anesthesie</td></tr><tr><td>Applied Biosystems 7500 Fast</td><td>Applied Biosystems</td><td>-</td><td>Voor qPCR</td></tr><tr><td>Butorphanol tartrate</td><td>Meiji Seika Pharma</td><td>Vetorphale</td><td>Voor anesthesie</td></tr><tr><td>BZ-II Analyzer</td><td>KEYENCE</td><td>-</td><td>Voor een beeldfusie</td></tr><tr><td>BALB/cAJc1</td><td>CLEA</td><td>-</td><td>Muisstam</td></tr><tr><td>&beta;-Actin (8H10D10) Mouse mAb</td><td>CST</td><td>3700</td><td>Voor western blot</td></tr><tr><td>Clamp Forcep</td><td>World Precision Instruments</td><td>WPI 500451</td><td>Voor chirurgie</td></tr><tr><td>Dumont forceps #5</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-10</td><td>Voor chirurgie</td></tr><tr><td>DAPI solution</td><td>Dojindo</td><td>340-07971</td><td>Voor IHC</td></tr><tr><td>Envisu SD-OCT system</td><td>Leica</td><td>R4310</td><td>Voor OCT</td></tr><tr><td>FITC-dextran</td><td>Merk</td><td>FD2000S</td><td>Voor retinale bloedperfusie</td></tr><tr><td>Fluorescence microscope</td><td>KEYENCE</td><td>BZ-9000</td><td>Voor fluorescentie detectie</td></tr><tr><td>Gatifloxacin hydrate</td><td>Senju Pharmaceutical</td><td>Gachifuro</td><td>Voor antibacteriële infectie</td></tr><tr><td>GFAP Monoclonal Antibody (2.2B10)</td><td>Thermo</td><td>13-0300</td><td>Voor IHC</td></tr><tr><td>Heating pad</td><td>Marukan</td><td>RH-200</td><td>Voor chirurgie</td></tr><tr><td>HIF-1&alpha; (D1S7W) XP Rabbit mAb</td><td>CST</td><td>36169</td><td>Voor western blot</td></tr><tr><td>ImageQuant LAS 4000 mini</td><td>GE Healthcare</td><td>-</td><td>Voor chemiluminescentie</td></tr><tr><td>Midazolam</td><td>Sandoz K.K</td><td>SANDOZ</td><td>Voor anesthesie</td></tr><tr><td>Microtome Tissue-Tek TEC 6</td><td>Sakura</td><td>-</td><td>Voor sectioen</td></tr><tr><td>Medetomidine</td><td>Orion Corporation</td><td>Domitor</td><td>Voor anesthesie</td></tr><tr><td>Needle holder</td><td>Handaya</td><td>HS-2307</td><td>Voor chirurgie</td></tr><tr><td>PuREC</td><td>MAYO Corporation</td><td>-</td><td>Voor ERG</td></tr><tr><td>Scissor</td><td>Fine Science Tools</td><td>91460-11</td><td>Voor chirurgie</td></tr><tr><td>Sodium hyaluronate</td><td>Santen Pharmaceutical</td><td>Hyalein</td><td>Voor oogbevochtiging</td></tr><tr><td>Tropicamide/Penylephrine hydrochloride</td><td>Santen Pharmaceutical</td><td>Mydrin-P</td><td>Voor mydriase</td></tr><tr><td>6-0 silk suture</td><td>Natsume</td><td>E12-60N2</td><td>Voor chirurgie</td></tr></tbody></table>
```

een murine-model van ischemisch netvliesletsel veroorzaakt door voorbijgaande bilaterale gemeenschappelijke halsslagader occlusie

A Murine Model of Ischemic Retinal Injury Induced by Transient Bilateral Common Carotid Artery Occlusion

Diverse vasculaire ziekten zoals diabetische retinopathie, occlusie van retinale aderen of slagaders en oculaire ischemische syndroom kunnen leiden tot retinale ischemie. Om pathologische mechanismen van retinale ischemie te onderzoeken, moeten relevante experimentele modellen worden ontwikkeld. Anatomisch gezien is een hoofdbloedtoevoervat van het netvlies de oogslagader (OpA) en opA komt voort uit de interne halsslagader van de gemeenschappelijke halsslagader (CCA). Verstoring van CCA kan dus effectief retinale ischemie veroorzaken. Hier hebben we een muismodel van retinale ischemie vastgesteld door voorbijgaande bilaterale gemeenschappelijke halsslagader occlusie (tBCCAO) om de juiste CCA te binden met 6-0 zijden hechtingen en om de linker CCA gedurende 2 seconden tijdelijk te sluiten via een klem, en toonden aan dat tBCCAO acute retinale ischemie kon veroorzaken die leidt tot netvliesdisfunctie. De huidige methode vermindert de afhankelijkheid van chirurgische instrumenten door alleen chirurgische naalden en een klem te gebruiken, verkort de occlusietijd om onverwachte diersterfte te minimaliseren, wat vaak wordt gezien in muismodellen van occlusie van de middelste hersenslagader, en behoudt de reproduceerbaarheid van veelvoorkomende retinale ischemische bevindingen. Het model kan worden gebruikt om de pathofysiologie van ischemische retinopathieën bij muizen te onderzoeken en verder kan worden gebruikt voor in vivo geneesmiddelenscreening.

Na systemische circulatie van FITC-dextran gedurende 2 minuten werden retinale vasculaturen van het linker- en rechtervlies in de schijnmuizen en tBCCAO-bediende muizen onderzocht (aanvullend figuur 1). FITC-dextran was volledig zichtbaar in beide netvliezen in de schijnmuizen en het linker netvlies in de tBCCAO-bediende muizen, terwijl het gedeeltelijk detecteerbaar was in het rechter netvlies in de tBCCAO-bediende muizen.
Na tBCCAO werd het hangen van het ooglid onderzocht (...

Hier beschrijven we een muismodel van retinale ischemie door voorbijgaande bilaterale gemeenschappelijke halsslagader occlusie met behulp van eenvoudige hechtingen en een klem. Dit model kan nuttig zijn voor het begrijpen van de pathologische mechanismen van retinale ischemie veroorzaakt door cardiovasculaire afwijkingen.

Een Murine-model van ischemisch netvliesletsel veroorzaakt door voorbijgaande bilaterale gemeenschappelijke halsslagader Occlusie

Diverse vascular diseases such as diabetic retinopathy, occlusion of retinal veins or arteries and ocular ischemic syndrome can lead to retinal ischemia. ...

Het muismodel dat met dit protocol is opgezet, kan worden gebruikt om de pathofysiologie van ischemische retinopathieën te onderzoeken en voor in vivo medicijnscreening. De huidige methode kan de afhankelijkheid van verschillende chirurgische instrumenten verminderen en de operatietijd verkorten om retinale ischemie te induceren. De pathogenese van vasculaire ziekten, zoals diabetische retinopathie, occlusie van retinale aderen of slagaders en oculaire ischemiesyndroom kan worden begrepen.De procedure zal worden gedemonstreerd door Deokho Lee, onze promovendus uit mijn laboratorium. Yukihiro Miwa, DVM, PhD, en assistent-professor uit mijn laboratorium zullen helpen de procedure te demonstreren. Steriliseer alle chirurgische instrumenten in een autoclaaf en bewaar ze in 70% ethylalcohol voorafgaand aan de chirurgische procedure.Bereid mannelijke BALB/c muizen voor in een specifiek ziektevrijgedeelte om steriele omstandigheden te handhaven voor, tijdens en na de operatie. Breng één druppel 0,1% gezuiverde natriumhyaluronaat-oogdruppeloplossing aan in de ogen van het dier om uitdroging tijdens de anesthesie te voorkomen. Leg de muis op zijn rug en fixeer zijn poten met plakband.Desinfecteer het nekgebied met 70% ethylalcohol voorafgaand aan de operatie. Maak met behulp van een mes een sagittale incisie in de nek. Scheid voorzichtig de speekselklieren met behulp van twee pincetten en leg ze opzij om de onderliggende CCA te visualiseren.Isoleer de rechter CCA van de respectieve vagale zenuwen en begeleidende aderen en plaats twee 6-0 zijden hechtingen onder de CCA. Bind de twee uiteinden stevig vast om de bloedstroom te blokkeren. Veeg het bloed dat tijdens de procedure uit de beschadigde kleine aderen stroomt weg voor een duidelijk zicht op de CCA.Zoek de linker CCA zonder de begeleidende aderen te beschadigen en plaats een 6-O hechtnaald eronder om een plaats voor klemmen te markeren, occludeer deze gedurende twee seconden. Verwijder de klem voorzichtig om schade aan de arteriële wand te voorkomen en open de linker CCA opnieuw. Na heropening, hecht de wonden op de nek met een zijdehechting.Wanneer u klaar bent, breng een druppel antibioticum aan op de nek om bacteriële infectie te voorkomen. Injecteer de muis intraperitoneaal met 0,75 milligram per kilogram atipamezole hydrochloride om het snel van de diepe anesthesie te laten herstellen, en plaats de muis vervolgens terug in een kooi met voorverwarmde kussens. Wanneer de muis wakker wordt, injecteer hem met 0,4 milligram per kilogram butorphanol tartraat voor pijnbestrijding.Ooglidverzakking werd onderzocht na tBCCAO. Het rechteroog vertoonde lichte tot ernstige ooglidverzakking, terwijl de linkerogen geen verzakking vertoonden, behalve bij één muis. Immunoblots en kwantitatieve analyses voor HIF-1 alfa en beta-actine toonden aan dat HIF-1 alfa drie en zes uur na tBCCAO gestabiliseerd was in de rechterretina.Retinale reactieve gliose werd onderzocht drie dagen na tBCCAO. Het gemiddelde van de morfologiescores voor GFAP-labeling in de rechterretina was het hoogst onder de beide netvliezen bij de sham-operatie muizen en de linkerretina bij de tBCCAO-operatie muizen. De amplitudes van de b-golf in het rechteroog verminderden drie en zeven dagen na tBCCAO, zoals getoond in donker aangepaste ERG.Hoewel kwantitatieve analyses een afname in de amplitudes van de b-golf in het rechteroog toonden zonder enige verandering in de a-golfamplitude. Representatieve OCT-beelden in de sham en tBCCAO-geopereerde netvliezen en kwantitatieve analyses toonden aan dat er een toename was in de retinale dikte in de rechterretina en geen verandering in de linkerretina. Wanneer u dit protocol probeert, is het belangrijk om te onthouden dat de rechter CCA duidelijk moet worden geoccludeerd.En vervolgens moet de linker CCA strikt worden geoccludeerd. Met deze methode kunnen hypertensie of hypoglykemie worden toegepast om aandoeningen van menselijke oculaire ziekten na te bootsen. Dit model toont de resultaten van gemeenschappelijke retinale ischemie en de mechanismen van retinale ischemie.

a-murine-model-ischemic-retinal-injury-induced-transient-bilateral

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

De intraluminale cerebralis occlusie bij muizen wordt hierin gepresenteerd. De omvang van herseninfarct wordt beoordeeld door een neurologische score en cresyl violet kleuring, een kleuring met TTC alternatief biedt het grote voordeel te testen in parallel veel belang markers.

Muis Model van Intraluminale mCaO: herseninfarct Evaluatie door cresyl Violet Staining

This video demonstrates the procedure of performing permanent distal middle cerebral artery occlusion, or MCAO, with the common carotid artery, or CCA ligation, in aged rats to model ischemic stroke. This blocks blood flow to the brain, leading to neuronal death and generating a model to study stroke mechanisms and potential treatments.

Inducing Ischemia via Middle Cerebral and Common Carotid Artery Occlusion in a Rat Model

Cerebrale perfusie controle is aangetoond dat de nauwkeurigheid van ischemische beroerte modellen te verbeteren. Technische moeilijkheden beperken vaak het gebruik van dit essentieel instrument voor cerebrovasculaire onderzoek. In deze video wordt een geoptimaliseerd systeem getoond op een of meerdere locaties hemodynamische bewaking verkrijgen tijdens intraluminale middelste cerebrale slagader occlusie in ratten.

Geoptimaliseerde Systeem voor cerebrale perfusie Monitoring in het Rat Stroke Model van intraluminale midden cerebrale slagader occlusie

Brain myeloïde cellen karakterisatie volgende slag kan worden uitgevoerd door stereology de optische fractioneerinrichting methode of een flowcytometrische analyse van hersenen leukocyten suspensies. Beide zijn nuttige technieken om een ​​nauwkeurige fenotypische onderscheiding van de belangrijkste myeloïde cel subsets in de ischemische hersenen voeren.

Stereological en flowcytometrie Karakterisering van leukocytsubpopulaties in Modellen van voorbijgaande of blijvende cerebrale ischemie

We beschrijven een muismodel van een beroerte veroorzaakt door de occlusie van de middelste hersenslagader met behulp van een met siliconen omhulde naald. Het protocol kan worden toegepast om een permanente occlusie of een tijdelijke ischemie te induceren, gevolgd door reperfusion.

Inductie van ischemische beroerte en ischemie-reperfusie in Muizen met behulp van het Midden-slagader occlusie Techniek en Visualisatie van Infarct Area

Intraluminale gloeidraad occlusie van de middelste cerebrale slagader is het meest gebruikte in vivo model van experimentele beroerte in knaagdieren. Een alternatieve chirurgische benadering om gemeenschappelijke halsslagader reparatie gebeurt hier, waardoor de reperfusie van de gemeenschappelijke halsslagader en een volledige reperfusie naar het grondgebied van de middelste cerebrale slagader.

Occlusie van de middelste cerebrale slagader waardoor reperfusie via gemeenschappelijke halsslagader reparatie in muizen

Een muismodel van cerebrale ischemie-reperfusie is gevestigd te onderzoeken de pathofysiologie van een beroerte. We distally de rechts midden cerebrale slagader en rechts gemeenschappelijke halsslagader afbinden en bloedstroom herstellen na 10 of 40 min van ischemie.

Muismodel van twee-schip occlusie van cerebrale ischemie-reperfusie

Het huidige protocol beschrijft een ratmodel van occlusie/reperfusie van de middelste hersenslagader dat de anatomische structuur van hersenvaten behoudt zonder schade te veroorzaken.

Een rattenmodel van middelste cerebrale arteriële occlusie/reperfusie zonder de anatomische structuur van cerebrale vaten te beschadigen

Dit protocol beschrijft het proces van voorbereiding op reperfusie van occlusie van de middelste hersenslagader via de gemeenschappelijke halsslagader.

Een gemodificeerd modelpreparaat voor reperfusie van occlusie van de middelste cerebrale slagader

De naaldmethode van asymmetrische bilaterale stenose van de gemeenschappelijke halsslagaderstenose wordt voorgesteld om een muismodel te creëren voor vasculaire cognitieve stoornissen en dementie. Het resulteert in resultaten op langere termijn in vergelijking met eerder gevestigde modellen en is compatibel met live MRI. Visuele weergave die de procedure demonstreert, biedt een leidraad voor het beheersen van de operatie.

Een muismodel voor vasculaire cognitieve stoornissen en dementie op basis van naaldgeleide asymmetrische bilaterale stenose van de gemeenschappelijke halsslagader

Het doel van deze studie was het vaststellen van een reproduceerbare methode voor het uitvoeren van een craniectomie, gevolgd door permanente, selectieve midden-cerebrale arterie-occlusie bij ratten voor toepassing in experimentele studies naar motorische en ruimtelijke geheugentekorten.

Selectieve en permanente occlusie van de middenarterie cerebrale arterie bij ratten: een experimentele benadering voor het bestuderen van motorische en ruimtelijke geheugentekorten

Leer een muizenmodel van ischemisch netvliesletsel via voorbijgaande bilaterale halsslagaderocclusie. Deze methode vereenvoudigt chirurgie en versnelt onderzoek naar ischemische retinopathieën en geneesmiddelscreening.

Een Murine-model van ischemisch netvliesletsel veroorzaakt door voorbijgaande bilaterale gemeenschappelijke halsslagader Occlusie (Video) | JoVE Journal

Een Murine-model van ischemisch netvliesletsel veroorzaakt door voorbijgaande bilaterale gemeenschappelijke halsslagader Occlusie

Meer video's verkennen