Name: Een effectieve inentingsmethode voor Phytophthora capsici op zwarte peperplanten (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-09-16T12:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 58 s
Description: Leer een effectieve inoculatiemethode voor Phytophthora capsici op zwarte peperplanten. Deze techniek verbetert traditionele methoden en biedt een betrouwbaardere aanpak voor het bestuderen van plant-pathogeen interacties.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd financieel ondersteund door het National Key R&D Program of China (2020YFD1001200), het China Agriculture Research System (CARS-11), het specifieke onderzoeksfonds van The Innovation Platform for Academicians of Hainan Province (YSPTZX202154), de Natural Science Foundation van de provincie Hainan in China (321RC652) en de Natural Science Foundation of China (nr. 31601626).

1. Voorbereiding van zwarte pepersnijplanten op infectie
<ol><li>Neem een vijfknoopssnede, ongeveer 40 cm lang met een diameter van 0,5 cm, van een gezonde en krachtig groeiende orthotrope tak van zwarte peper met behulp van een gedesinfecteerd snoeimes of snoeischaar. Snoei de onderste drie knopen van de plagiotrope takken, waarbij de bovenste twee knopen met ongeveer 10 bladeren intact blijven.</li>
	<li>Bereid bewortelingssubstraat met grond en dierlijke mest (koeienmest of schapenmest) in een verhouding van 1:1. Autoclaaf het bewortelingssubstraat bij 121 °C gedurende 20 min.</li>
	<li>Steek de stekken in het bewortelingssubstraat onder een hoek van ongeveer 50°, waarbij de derde knoop net het oppervlak van het substraat en de okselknop op dit knooppunt boven het substraat raakt. OPMERKING: De tas die hier wordt gebruikt, heeft de volgende afmetingen: hoogte van 40-60 cm, diameter van 25-30 cm.</li>
	<li>Giet 10-20 L water over de wortels van de plant. Plaats de stekken in een kas met 90% schaduw bij een temperatuur van 25-30 °C voor beworteling en groei.</li>
</ol>2. Vermeerdering van Phytophthora capsici (P. capsici)
OPMERKING: Een voorraad Phytophthora capsici-cultuur wordt bijgehouden in het gewasbeschermingslaboratorium van het Spice and Beverage Research Institute, Chinese Academie voor Tropische Landbouwwetenschappen7.
<ol><li>Borstel en reinig de aardappelknollen onder stromend leidingwater en snijd vervolgens 200 g aardappelen in blokjes van 1 cm3. Doe een deel van de blokjes in een bekerglas met 800 ml dubbel gedestilleerd water (ddH2O) en kook gedurende 20 minuten.</li>
	<li>Filter de bouillon door dubbel gaas met behulp van zwaartekrachtfiltratie. Bereid aardappeldextrose-agar (PDA) door 20 g dextrose en 15 g agar aan het filtraat toe te voegen en het volume tot 1 l te vullen met ddH2O. Autoclaaf het mengsel bij 121 °C gedurende 20 min8.</li>
	<li>Giet 20 ml van de gesteriliseerde PDA in vloeibare vorm in een ronde petrischaal met een diameter van 9 cm in een laminaire luchtstroomkap. Laat de PDA-platen met deksels 's nachts open in de laminaire luchtstroomkap als middel om condensatie te voorkomen.</li>
	<li>Gebruik een inentingslus om mycelia op te pikken van Phytophthora capsici-voorraad in een reageerbuis. Plaats het entmateriaal met de myceliale kant in contact met de PDA in een petrischaaltje.</li>
</ol>3. Infectie van zwarte peper
<ol><li>Incubatie<ol>
<li>Identificeer een gebied 5 cm boven het substraatoppervlak en in de buurt van de wortels op de stengel voor inenting.</li>
		<li>Snijd een schijf van mycelia met een diameter van 0,5 cm aan de groeirand van de Phytophthora capsici-cultuur op PDA uit in een petrischaal met behulp van een stopboorder.</li>
		<li>Beschadig de steel met een spuitnaald en maak drie gaten in een driehoekig patroon op het geselecteerde inentingsgebied. Bedek elk gat met een myceliale schijf. Plaats de gaten dicht bij elkaar om ervoor te zorgen dat het gewonde gebied volledig bedekt is met de myceliale schijven.</li>
		<li>Bedek de myceliale schijven met gesteriliseerde bevochtigde wattenschijfjes als middel om uitdroging te voorkomen. Bind de pad op de steel met een polyethyleen strip om de positie van de enterende schijven te behouden. OPMERKING: Na 8 uur na inenting werden de geënte gaten zwart en de laesie breidde zich uit naarmate de tijd verstreek. De bladeren werden geel en vielen af en de geënte plant stierf 7-10 dagen na inenting. Er ontwikkelden zich geen laesies in de controleplanten. De meeste genen kwamen na inenting met Phytophthora capsici anders tot expressie in vergelijking met de controlegroep. Histopathologische analyse van de geïnfecteerde weefsels toonde aan dat Phytophthora capsici koloniseerde in het xyleem.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Bemonster de interessante plantaardige materialen en bewaar bij -80 °C in vloeibare stikstof voor gebruik in volgende onderzoeken. OPMERKING: Vloeibare stikstof, plastic zakken, markeerstiften, takkenschaar en andere materialen werden voorafgaand aan de experimenten voorbereid.</li>
	<li>Nadat de specifieke plantaardige materialen zijn bemonsterd voor gebruik, autoclaaft u alle resterende plantaardige materialen, overgebleven Phytophthora capsici-cultuur en kweekmedium en alle instrumenten en laboratoriumartikelen die bij dit inentingswerk zijn gebruikt.</li>
</ol>

<ol><li>Gordo, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+sequencing+of+black+pepper+root+transcriptome%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Plant+Biology%22%5BJournal%5D)">High-throughput sequencing of black pepper root transcriptome.</a> BMC Plant Biology. 12 (1), (2012).</li>
<li>Leonian, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+and+fruit+blight+of+Peppers+caused+by+Phytophthora+capsici+sp.+Nov%5BTitle%5D)+AND+%22Phytopathology%22%5BJournal%5D)">Stem and fruit blight of Peppers caused by Phytophthora capsici sp. Nov.</a> Phytopathology. 12 (9), 401-408 (1922).</li>
<li>Ding, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Priming+maize+resistance+by+its+neighbors%3A+Activating+1%2C4-benzoxazine-3-ones+synthesis+and+defense+gene+expression+to+alleviate+leaf+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Plant+Science%22%5BJournal%5D)">Priming maize resistance by its neighbors: Activating 1,4-benzoxazine-3-ones synthesis and defense gene expression to alleviate leaf disease.</a> Frontiers in Plant Science. 6, 830(2015).</li>
<li>Fonseca, C. E. L., Vianda, D. R., Hansen, J. L., Pell, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associations+among+forage+quality+traits%2C+vigor%2C+and+disease+resistance+in+alfalfa%5BTitle%5D)+AND+%22Crop+Science%22%5BJournal%5D)">Associations among forage quality traits, vigor, and disease resistance in alfalfa.</a> Crop Science. 39 (5), 1271-1276 (1999).</li>
<li>Altier, N. A., Thies, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+resistance+to+Pythium+seedling+disease+in+Alfalfa+using+a+culture+plate+method%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Disease%22%5BJournal%5D)">Identification of resistance to Pythium seedling disease in Alfalfa using a culture plate method.</a> Plant Disease. 79 (4), 341-345 (1995).</li>
<li>Pratt, R. G., Rowe, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+simplified+leaf+inoculation+procedures+for+identification+of+quantitative+resistance+to+Sclerotinia+trifoliorum+in+Alfalfa+seedling%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Disease%22%5BJournal%5D)">Evaluation of simplified leaf inoculation procedures for identification of quantitative resistance to Sclerotinia trifoliorum in Alfalfa seedling.</a> Plant Disease. 82 (10), 1161-1164 (1998).</li>
<li>Hao, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((De+novo+transcriptome+sequencing+of+black+pepper+%28Piper+nigrum+L.%29+and+an+analysis+of+genes+involved+in+phenylpropanoid+metabolism+in+response+to+Phytophthora+capsici%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Genomics%22%5BJournal%5D)">De novo transcriptome sequencing of black pepper (Piper nigrum L.) and an analysis of genes involved in phenylpropanoid metabolism in response to Phytophthora capsici.</a> BMC Genomics. 17 (1), 1-14 (2016).</li>
<li>Dong, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Field+inoculation+and+classification+of+maize+ear+rot+caused+by+Fusarium+verticillioides%5BTitle%5D)+AND+%22Bio-protocol%22%5BJournal%5D)">Field inoculation and classification of maize ear rot caused by Fusarium verticillioides.</a> Bio-protocol. 8 (23), 3099(2018).</li>
<li>English, J. T., Laday, M., Bakonyi, J., Schoelz, J. E., Érsek, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phenotypic+and+molecular+characterization+of+species+hybrids+derived+from+induced+fusion+of+zoospores+of+Phytophthora+capsica+and+Phytophthora+nicotianae%5BTitle%5D)+AND+%22Mycological+Research%22%5BJournal%5D)">Phenotypic and molecular characterization of species hybrids derived from induced fusion of zoospores of Phytophthora capsica and Phytophthora nicotianae.</a> Mycological Research. 103 (8), 1003-1008 (1999).</li>
<li>Chatterjee, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antioxidant+activity+of+some+phenolic+constituents+from+green+pepper+%28Piper+nigrum+L.%29+and+fresh+nutmeg+mace+%28Myristica+fragrans%29%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Antioxidant activity of some phenolic constituents from green pepper (Piper nigrum L.) and fresh nutmeg mace (Myristica fragrans).</a> Food Chemistry. 101 (2), 515-523 (2007).</li>
<li>Pfender, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+sporangia+and+release+of+zoospores+by+Phytophthora+megasperma+in+soil%5BTitle%5D)+AND+%22Phytopathology%22%5BJournal%5D)">Production of sporangia and release of zoospores by Phytophthora megasperma in soil.</a> Phytopathology. 67 (5), 657-663 (1977).</li>
<li>Nagila, A., Schutte, B. J., Sanogo, S., Idowu, O. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chile+pepper+sensitivity+to+mustard+seed+meal+applied+after+crop+emergence%5BTitle%5D)+AND+%22HortScience%22%5BJournal%5D)">Chile pepper sensitivity to mustard seed meal applied after crop emergence.</a> HortScience. 56 (2), 1-7 (2021).</li>
<li>Lamour, K. H., Stam, R., Jupe, J., Huitema, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+oomycete+broad-host-range+pathogen+Phytophthora+capsica%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Plant+Pathology%22%5BJournal%5D)">The oomycete broad-host-range pathogen Phytophthora capsica.</a> Molecular Plant Pathology. 13 (4), 329-337 (2012).</li>
<li>Hardham, A., Gubler, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polarity+of+attachment+of+zoospores+of+a+root+pathogen+and+pre-alignment+of+the+emerging+germ+tube%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Biology+International+Reports%22%5BJournal%5D)">Polarity of attachment of zoospores of a root pathogen and pre-alignment of the emerging germ tube.</a> Cell Biology International Reports. 14 (11), 947-956 (1990).</li>
</ol>

In deze studie werd de basale kop geprikt om schade aan te richten en een effectief inentingssysteem in de zwarte peperplant te bieden. Myceliale pellets bedekten vervolgens de drie gaten om vocht vast te houden en de ziekteverwekker in staat te stellen de plant goed te infecteren. Na inenting werden de bladeren geel en vielen af en stierven de geënte planten. Er ontwikkelden zich geen laesies in de controleplanten. De meeste genen kwamen na inenting met Phytophthora capsici anders tot expressie in vergelijking ...

Zwarte peper (Piper nigrum L.) is een houtachtige klimmer en een van de belangrijkste kruidengewassen. Het staat bekend als de "King of Spices"1 en wordt geteeld in meer dan 40 landen en regio's in Azië, Afrika en Latijns-Amerika. Phytophthora wortelrot is de meest verwoestende ziekte van zwarte peper en wordt veroorzaakt door de oomycete Phytophthora capsici. Deze ziekteverwekker infecteert ook cucurbits, aubergines, chilipepers en tomaten 2,3. Met zwarte peper kan soms een heel gewas worden gedecimeerd door deze ziekte. De uitbreiding van paprikaplantgebieden is beperkt als gevolg van de onbeschikbaarheid van resistente variëteiten, wat de ontwikkeling van de Chinese zwarte peperindustrie aanzienlijk heeft belemmerd. Een effectieve inenting en een nauwkeurig bemonsteringssysteem voor Phytophthora capsici op zwarte peperplanten zijn essentieel voor het bestuderen van deze plant-pathogeen interactie.
De identificatie en screening van resistentie in kiemplasmabronnen is de basisvereiste voor onderzoek naar de pathogeniciteit van de ziekteverwekker en de veredeling en het gebruik van resistente variëteiten. Een veel gebruikte aanpak is het gebruik van een verscheidenheid aan identificatiemethoden op basis van plantensoorten en pathogene groepen. De huidige identificatiemethoden omvatten populatie-identificatie, individuele identificatie, orgaanidentificatie, weefselidentificatie, celidentificatie, biochemische identificatie en moleculaire identificatie, die de afgelopen jaren zijn ontwikkeld 4,5. Op deze gebieden is succes geboekt, maar er zijn ook veel problemen. Het maakt niet uit welke methode wordt gekozen, de basisvereisten voor het identificeren van plantresistentie zijn consistent, inclusief duidelijke doelstellingen, betrouwbare resultaten en methoden die eenvoudig, snel en gemakkelijk te standaardiseren zijn. Dit principe moet ook worden gevolgd bij de identificatie van zwarte peperresistentie.
In natuurlijke veldomstandigheden kan de identificatie van ziekteresistentie worden beïnvloed door vele omgevingsfactoren. Daarom werd voorgesteld om losse bladeren en geïrrigeerde wortels in het laboratorium te gebruiken om ziekteresistentie te identificeren. Jonge bladeren van gezonde planten werden in vitro in het laboratorium ingeënt en het zieke bladerengebied werd gemeten door de ziekteverwekker in te enten om de ziekteresistentie van planten te identificeren6. In vitro bladinenting kan echter alleen worden gebruikt voor algemene resistentie-identificatie en niet voor moleculaire interactiestudies. Desondanks presenteert de ziekteresistente status zich vaak in de geïrrigeerde wortelinenting, waardoor onzekerheid ontstaat in de vervolgstudie van moleculaire veredeling voor ziekteresistentie. Daarom zijn snelle en eenvoudige detectiemethoden binnenshuis essentieel. Deze studie heeft tot doel een methode te bieden voor resistentie-identificatie in het laboratorium.

<table><tbody><tr><td>Agar poeder</td><td>Solarbio</td><td>A8190</td><td></td></tr><tr><td>Schone werkbank</td><td>Haier</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dextrose</td><td>Xilong Scientific</td><td>15700501</td><td></td></tr><tr><td>Hoge temperatuur sterilisatieoven</td><td>Zaelway</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Petrischalen</td><td>Biosharp</td><td>BS-90-D</td><td></td></tr></tbody></table>

een effectieve inentingsmethode voor phytophthora capsici op zwarte peperplanten

An Effective Inoculation Method for Phytophthora capsici on Black Pepper Plants

Piper nigrum L. (zwarte peper) is een typische houtachtige wijnstok die een economisch belangrijk kruidengewas is over de hele wereld. De productie van zwarte peper wordt aanzienlijk beïnvloed door wortelrotziekte veroorzaakt door Phytophthora capsici, die de ontwikkeling van de industrie ernstig heeft beïnvloed als een "choke point" -probleem. Het moleculair genetische mechanisme van resistentie in zwarte peper is echter onduidelijk, wat leidt tot langzame vooruitgang in de ontwikkeling van nieuwe zwarte pepervariëteiten. Een effectieve inenting en nauwkeurig bemonsteringssysteem voor Phytophthora capsici op zwarte peperplanten is essentieel voor het bestuderen van deze plant-pathogeen interactie. Het belangrijkste doel van deze studie is om een gedetailleerde methodologie aan te tonen waarbij de basale kop van zwarte peper wordt ingeënt met Phytophthora capsici, terwijl het ook een referentie biedt voor de inenting van houtachtige wijnstokken. De basale kop van de zwarte peperplant werd geprikt om het te beschadigen, en myceliale pellets bedekten de drie gaten om het vocht vast te houden, zodat de ziekteverwekker de plant goed kon infecteren. Deze methode biedt een betere manier om de instabiliteit op te lossen die wordt veroorzaakt door traditionele inentingsmethoden, waaronder bodemdruppel of worteldimpeling. Het biedt ook een veelbelovend middel voor het bestuderen van het werkingsmechanisme tussen planten en andere bodemgedragen plantenpathogenen in de precisieveredeling van de landbouw.

Figuur 1 toont de symptomen van zwarte peperbladeren na P. capsici-inenting . Figuur 2 toont de symptomen van zwarte peperstengels na P. capsici inenting. De ziekteverwekker infecteerde de zwarte peper aan de basale stengel; symptomen zoals bladverkleuring, verwelking, xyleembruining en vaatverduistering die geleidelijk verschijnen. Figuur 3 toont de meeste genen die na inenting met Phytophthora capsici an...

Het prikken van de basale kop van de zwarte peperplant is een korte en tijdbesparende methode om deze te beschadigen. Hier hebben we gedetailleerde stappen gegeven met een video voor het infecteren van zwarte peperplanten.

Een effectieve inentingsmethode voor Phytophthora capsici op zwarte peperplanten

Piper nigrum L. (black pepper) is a typical woody vine that is an economically important spice crop across the world. Black pepper production is ...

Het volgende experiment introduceert een effectieve inenting en nauwkeurige bemonsteringsmethode voor Phytophthora capsici op zwarte peperplanten. Zwarte peper, een typische houtachtige wijnstok, is een economisch belangrijk kruidengewas. De productie van zwarte peper wordt meestal beïnvloed door wortelrotziekte veroorzaakt door Phytophthora capsici en heeft de industriële ontwikkeling ernstig beïnvloed.Een effectieve inenting en een nauwkeurig bemonsteringssysteem voor Phytophthora capsici op zwarte peperplanten is belangrijk voor de studie van de interactie tussen plant en pathogeen. Het belangrijkste doel van deze studie is om een gedetailleerde methodologie te demonstreren waarin de basale kop van zwarte peper werd ingeënt met Phytophthora capsici, en ook een referentie te bieden voor de inenting van houtachtige wijnstokken. Deze methode biedt een betere manier om de instabiliteit op te lossen die wordt veroorzaakt door de traditionele inentingsmethode, zoals bodemdruppel of worteldimpeling.Experimentele procedures. De stekken van zwarte paprika's worden gedurende twee maanden in de gecontroleerde omgeving geplant. Subcultuur de Phytophthora capsici, en incubeer gedurende vijf dagen onder de 25 graden Celsius.Op de dag van infectie worden de agarblokken bedekt met de drie gaten die door de naald zijn gestoken. En tot slot, karakteriseer ziektesymptomen. Voorbereiding van zwarte peper snijplanten voor infectie.Snijd orthotrope takken in lengtes van 40 centimeter en 0,5 centimeter diameter en verwijder plagiotrope takken op de onderste knopen met steriel mes en snoeischaar. De gesneden tak moet twee knopen en vijf bladeren aan de bovenkant bevatten om waterverlies te verminderen. Snijd het bovenste deel af tot een vlakke snede en het onderste deel tot een schuine snede.Het bewortelingssubstraat van het snijden van zwarte peper werd in een mengsel bereid, met daarin grond en dierlijke mest, zoals koeienmest, schapenmest, et cetera, in een verhouding van één op één. De grond werd gedurende 20 minuten geautoclaveerd bij ongeveer 121 graden Celsius. Gebruik de kweekzakken van 30 centimeter diameter en 50 centimeter hoogte om de bewortelingssubstraten te plaatsen.Bereid een helling van 50 graden voor om de substraten te vullen. De stekken werden onder een hoek van 50 graden geplaatst, met meer dan drie knopen onder het substraat. Ze waren bedekt met het bewortelingsmedium en het hulpdeel moet aan het medium worden gehecht.Uiteindelijk werden de stekken volledig geïnfiltreerd. Recht snijden werd toegepast om het snijden in te brengen. Bereiding van Phytophthora capsici culturen.Kies voor ziektevrije aardappelen. Ruim de aardappelen op en snijd ze in kleine vierkantjes. Doe 200 gram aardappelen in 800 milliliter dubbel gedestilleerd water en kook gedurende 20 minuten.Filter vervolgens het mengsel. Voeg 20 gram dextrose toe. Vul het mengsel tot een liter met dubbel gedestilleerd water.Voeg 15 gram agarpoeder toe aan het filtraat. Doseer het medium in kolven en sluit af met Parafilm. Autoclaaf het medium op 121 graden Celsius gedurende 20 minuten.Berekend medium van aardappelagar werd in de petrischaalplaten gedoseerd en afgekoeld op de steriele bank voor stolling. De inentingsnaald werd ontsmet door verwarming met behulp van een alcoholverbrandende lamp en enkele seconden afkoeling. Neem kleine stukjes schimmelmonsters met behulp van steriele inenting en plaats op PDA.Het mycelium bedekt ongeveer driekwart van de plaat. Culturen zijn klaar voor verder experiment. Infectie van zwarte pepers.De locatie van vijf centimeter afstand van het oppervlak van het substraat werd beschouwd als de broedplek. De broedlocatie mag niet ver van de wortel zijn, met als doel te voorkomen dat de infectieuze tijd wordt verlengd. Gedetailleerde stappen van speldenprikken zijn als volgt.Een myceliumkorrel Phytophthora capsici werd verzameld met behulp van een stopboorder. Met name nieuw ontwikkelde myceliumpellets aan de rand van de plaat werden bij voorkeur geselecteerd vanwege hun hogere infectieuze activiteiten. Steriliseer een stengel met 75% ethanol en neem drie driehoekige poriën op de gesteriliseerde positie met behulp van de inentingsnaald.Drie driehoekige poriën op de inentingslocatie werden vastgeplakt met behulp van de inentingsnaald en myceliale pellets werden bedekt met de drie poriën. Na acht uur werden de poriën over het algemeen zwart. De verwijding werd vergroot met de verlenging van de incubatie.Na zeven tot tien dagen werden de bladeren geel en vielen ze af, totdat zwarte peper was gestorven. De presentatieve resultaten zijn als volgt. Na infectie verschijnen de symptomen op de zwarte peperplanten, waaronder vergeling en verwelking van bladeren, xyleembruining en vaatverduistering.De meeste genen kwamen na inenting met Phytophthora capsici anders tot expressie in vergelijking met de controlegroep. De histopathologische analyse van geïnfecteerde weefsels heeft aangetoond dat Phytophthora capsici gekoloniseerd is in het xyleem. Conclusie. In deze studie werd het prikken van de basale kop gebruikt om het beschadigd te maken om een effectieve inenting te bieden, en het verdubbelingssysteem in zwarte peper.Ondertussen vertegenwoordigt dit protocol ook een efficiëntere manier om een referentie te bieden voor het broeden met -Onze methode kan meer tijd geven en korter werken. Dit protocol zorgt voor een beter resultaat, wat een sterke interactie tussen één plant en de bodem-gedragen ziekteverwekker mogelijk maakt. Die is zichtbaar en handig om het dynamische proces tussen planten en hun ziekteverwekkers te detecteren.In onze methode dat we beginnen met het spelten van de basale kop van de zwarte peperplant om ze te beschadigen. Vervolgens wordt het beschadigde gebied direct bedekt met de Phytophthora capsici en wordt het vocht bewaard. Zodat de ziekteverwekker de plant zou kunnen infecteren.We bieden ook een veelbelovende manier voor de studie van het werkingsmechanisme tussen planten en andere bodemgedragen plantenpathogenen in de precisieveredeling van de landbouw.

an-effective-inoculation-method-for-phytophthora-capsici-on-black

Research

JoVE Journal

Genetics

Genetica

Source: Rufián, J. S., et.al. Single-Cell Analysis of the Expression of Pseudomonas syringae Genes within the Plant Tissue. J. Vis. Exp. (2022)This video demonstrates a vacuum infiltration method to introduce a bacterial pathogen into Arabidopsis plant leaves. The approach uses a prepared bacterial suspension and vacuum pulses to enable uniform entry through stomata, resulting in controlled leaf infection.

Inoculating a Bacterial Pathogen into Arabidopsis Leaves via Vacuum Infiltration

This video demonstrates the seedling growth inhibition assay in the Arabidopsis thaliana plant. The impact of increased concentration of immune peptide elicitor on seedling growth is determined.

Measuring Immune-Induced Inhibition of Seedling Growth

Dit protocol laat twee inoculatie methoden om de schimmel entomopathogen...

Tot oprichting van Schimmel Entomopathogens als endofyten: Op weg naar Endofytische Biologische bestrijding

Het gebruik van een naaldinjectiemethode om maïs- en teosinteplanten te enten met de biotrofe ziekteverwekker Ustilago maydis wordt beschreven.  De inentingsmethode voor naaldinjectie vergemakkelijkt de gecontroleerde afgifte van de schimmelpathogenese tussen de bladeren van de plant waar de ziekteverwekker de plant binnenkomt door de vorming van appresoria. Deze methode is zeer efficiënt, waardoor reproduceerbare inentingen met U. maydis mogelijk zijn.

Een snelle en efficiënte methode voor het beoordelen van pathogeniteit van Ustilago maydis op maïs- en teosintelijnen

Agro-infiltratie en PVX-agro-infectie zijn routinematige functionele assays voor voorbijgaande ectopische expressie van genen in planten. Deze methoden zijn efficiënte assays in effectoromics strategieën (snelle weerstand en avirulence gen ontdekking) en cruciaal voor modern onderzoek in moleculaire plant pathologie. Ze voldoen aan de vraag naar robuuste functionele analyse met hoge doorvoer in fabrieken.

Agro-infiltratie en PVX Agro-infectie in aardappel en Nicotiana benthamiana

Kwantificering van ziekteverwekkergroei is een krachtig hulpmiddel om verschillende Arabidopsis thaliana (hierna: Arabidopsis) immuunresponsen te karakteriseren. De hier beschreven methode presenteert een geoptimaliseerde spuitinfiltratie-assay om de groei van Pseudomonas syringae pv. maculicola ES4326 in volwassen Arabidopsis-bladeren te kwantificeren.

Bacteriële Leaf Infiltratie Assay voor Beeldende karakterisatie van Plant Defense Reacties met behulp van de<em&gt; Arabidopsis thaliana-Pseudomonas syringae</em&gt; Pathosystem

Hier presenteren we een protocol om te testen van de virulentie van de plant met de plant pathogen Magnaporthe grisea. Dit verslag zal bijdragen tot de grootschalige screening van de biotypen van schimmels isolaten en dienen als een uitstekend uitgangspunt voor het begrijpen van de resistente mechanismen van planten tijdens de moleculaire veredeling.

De Plant infectie Test: Spray en wond-gemedieerde inoculatie met de Plant Pathogen Magnaporthe Grisea

We presenteren een protocol voor het bouwen van een eenvoudig sporenverdelingssysteem bestaande uit een inentingsdoos met een gaas van ~ 50 μm en een transparante plastic kamer. Dit kan worden gebruikt om planten gelijkmatig in te enten met echte meeldauwsporen, waardoor een nauwkeurige en reproduceerbare beoordeling van ziektefenotypen van bestudeerde planten mogelijk wordt.

Een eenvoudige en flexibele inentingsmethode voor het nauwkeurig beoordelen van echte meeldauw-infectie fenotypen van Arabidopsis en andere planten

Dit protocol presenteert een gedetailleerde samenvatting van strategieën om plantenwortels te enten met bodemmicroben. Voor de schimmels Verticillium longisporum en Verticillium dahliae worden drie verschillende wortelinfectiesystemen beschreven. Mogelijke toepassingen en mogelijke downstream analyses worden belicht en voor- of nadelen worden per systeem besproken.

Inentingsstrategieën om plantenwortels te infecteren met door de bodem overgedragen micro-organismen

Dit protocol presenteert een geoptimaliseerd vrijstaand bioassaysysteem voor het evalueren van de effectiviteit van entomopathogene schimmels (EPF) tegen de mosterdluis (Lipaphis erysimi (Kalt.)), een parthenogenetisch insect. De methode schetst het gegevensverzamelingsproces tijdens experimenten met petrischaaltjes, waardoor onderzoekers consequent de virulentie van EPF kunnen meten tegen mosterdbladluizen en andere parthenogenetische insecten.

Beoordeling van bladluis effect van entomopathogene schimmels tegen parthenogenetisch insect, mosterdluis, Lipaphis erysimi (Kalt.)

Er werd een bioassayprotocol met losstaande bladeren opgesteld voor het massaal kweken van chilitrips met behulp van een aangepaste methode met vrijstaande bladeren in agarhoudende glazen containers, wat een hoge overleving en gesynchroniseerde ontwikkeling garandeert. Dit systeem maakt een efficiënte screening van entomopathogene schimmelvirulentie tegen 2e instar-larven mogelijk en biedt een betrouwbare tripsvoorziening voor laboratorium-, kas- en veldevaluaties.

Opzetten van een kweeksysteem voor chilitrips (Scirtothrips dorsalis hood) voor virulentiescreening van entomopathogene schimmels

Leer een effectieve inoculatiemethode voor Phytophthora capsici op zwarte peperplanten. Deze techniek verbetert traditionele methoden en biedt een betrouwbaardere aanpak voor het bestuderen van plant-pathogeen interacties.

Een effectieve inentingsmethode voor Phytophthora capsici op zwarte peperplanten

Meer video's verkennen