Evaluatie van een Point-of-Care Testing Analyzer voor het meten van perifere bloed leukocyten
22 maart 2022
Een protocol voor het meten van perifere bloedleukocyten met behulp van een POCT-kaartgebaseerde leukocytenanalysator wordt hier gepresenteerd. Dezelfde bloedmonsters werden getest door twee geautomatiseerde hematologieanalysatoren om de consistentie en nauwkeurigheid van de resultaten te evalueren. De resultaten toonden aan dat de geëvalueerde analyzer een goede correlatie had met het referentiesysteem.
Een gedetailleerde beschrijving van de gestandaardiseerde werking van de analyzer in het protocol kan een persoon die de analyzer nog nooit heeft bediend helpen om de experimenten te voltooien die meestal belangrijk, nauwkeurig en met betrouwbare resultaten zijn. Het gebruik van de innovatieve technologie van Jove heeft voordelen zoals de beschikbaarheid van een detectiekit voor één persoon, afwezigheid van vloeibaar afval, snel zijn, vrij zijn voor routineonderhoud en gebruiksvriendelijke bediening. Men moet eerst het detectieprincipe van de analysator begrijpen en vervolgens bekend zijn met verschillende kritieke stappen in het protocol, zoals bloedafname, reagentia heffen enzovoort.
Om te beginnen start u de analyzer door de uit- of in-schakelaar aan de achterkant van de analyzer in te schakelen en ervoor te zorgen dat het indicatielampje van de analyzer brandt. Voer gebruikersnaam en wachtwoord in het inlogdialoogvenster in en klik op inloggen. Het systeem moet zelfcontrole uitvoeren en automatisch beginnen met initialiseren en de voorbeeldanalysepagina weergeven.
Start de testvoorbereiding door op het volgende monster te klikken, voer vervolgens het geslacht, de naam en andere klinische informatie correct in en selecteer de juiste referentiegroep. Klik later op ok om de informatie op te slaan. Scheur de dunne film van de bloedceldetectiemodule, druk op de knop voor het verlaten van het magazijn en plaats de bloedceldetectiemodule correct in het machinemagazijn, met de opening naar buiten gericht.
Prik de hemolytische reagens plafondfilm met de punt van een kwantitatieve pipet. Voor capillaire bloedafname desinfecteer je de linker ringvinger eenmaal met een wattenstaafje gedoopt in alcohol op één manier. Nadat de alcohol op natuurlijke wijze is uitgedroogd, gebruikt u een bloedprist om de huid van de linkerringvinger te doorboren.
Knijp de eerste druppel bloed er voorzichtig uit en veeg deze af met een wattenstaafje. Knijp voldoende bloed uit om een volledige waterdruppel te vormen en verzamel vijf microliter van het bloedmonster met behulp van de capillaire buis in de kwantitatieve pipet. Voor het mengen van reagens brengt u de kwantitatieve pipet in het hemolytische reagens en drukt u deze stevig aan om het bloedmonster uit de capillaire buis vrij te maken.
Meng het bloed in de capillaire buis en het hemolytische reagens door het 15 tot 20 keer met een constante snelheid ondersteboven te draaien totdat er geen rood bloed in de capillaire buis achterblijft. Start de monsteranalyse door het deksel te openen en de oplossing in de bloedceldetectiemodule te knijpen. Druk vervolgens op de knop Magazijn verlaten.
Nadat de bloedceldetectiemodule het magazijn is binnengekomen, drukt u op de telknop. Klik op de analyzer-interface tweemaal op de knop ok om te bevestigen dat de bloedceldetectiemodule is verwijderd. Klik op de analyzer-interface op de afdrukknop om de testresultaten af te drukken.
Om de analyzer uit te schakelen, klikt u op de afsluitknop op de analyzer-interface en selecteert u ja in het dialoogvenster dat op de interface verschijnt. Controleer of het systeem de afsluitvolgorde begint uit te voeren. Zet de uit- of inschakelaar aan de achterkant van het mainframe uit nadat de uitschakelvolgorde is voltooid.
De figuur toont de scatter plot en Spearman correlatie analyse van de geëvalueerde en referentiesystemen. Het aantal witte bloedcellen en het aantal granulocyten vertonen de sterkste correlatie. Terwijl het lymfocytenaantal de zwakste correlatie vertoont tussen het geëvalueerde en referentiesysteem.
Een Bland-Altman plot werd verkregen om de consistentie analyse te visualiseren. De witte bloedcelresultaten die door het geëvalueerde systeem worden gedetecteerd, komen overeen met het referentiesysteem. De gemiddelde waarden van de verschillen in de leukocytenindexen liggen boven nul, wat aangeeft dat de testresultaten van het geëvalueerde systeem iets hoger zijn dan die van het referentiesysteem.
Tijdens het experiment moeten we ons best doen om ervoor te zorgen dat het bloed dat we hebben verzameld precies 5 microliter is en dat de zijkant in de kamer volledig wordt opgelost door het hemolytische reagens.
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's
Overzicht
Dit artikel presenteert een protocol voor het meten van perifere bloedleukocyten met behulp van een POCT-kaartgebaseerde leukocytenanalyzer. De nauwkeurigheid en consistentie van deze analyzer werden geëvalueerd tegen twee geautomatiseerde hematologie-analyzers.
Belangrijke studiecomponenten
Wetenschapsgebied
- Hematologie
- Klinische diagnostiek
- Point-of-care testing
Achtergrond
- Leukocytenanalyse is cruciaal voor het diagnosticeren van verschillende medische aandoeningen.
- Geautomatiseerde analyzers leveren snelle en nauwkeurige resultaten.
- POCT-apparaten verbeteren de toegankelijkheid en gemak van testen.
- Begrip van de werking van deze apparaten is essentieel voor betrouwbare resultaten.
Doel van de studie
- Om de prestaties van een nieuwe leukocytenanalyzer te evalueren.
- Om resultaten te vergelijken met gevestigde geautomatiseerde hematologie-analyzers.
- Om een gedetailleerd protocol te verstrekken voor het effectief gebruik van de analyzer.
Gebruikte methoden
- Standaard werking van de leukocytenanalyzer.
- Verzameling en voorbereiding van bloedmonsters.
- Testen van monsters op zowel de nieuwe analyzer als referentie-analyzers.
- Statistische analyse om correlatie en nauwkeurigheid te beoordelen.
Belangrijkste resultaten
- De nieuwe analyzer toonde goede correlatie met referentiesystemen.
- Resultaten waren consistent over verschillende testmethoden.
- Operationele efficiëntie werd gemarkeerd als een belangrijk voordeel.
- Gebruikersvriendelijke functies vergemakkelijkten het gebruik.
Conclusies
- De POCT-leukocytenanalyzer is een betrouwbaar hulpmiddel voor bloedanalyse.
- Het biedt aanzienlijke voordelen op het gebied van snelheid en gebruiksgemak.
- Verdere validatie in klinische omgevingen wordt aanbevolen.
Veelgestelde vragen
Executive Industry Relevance
Point-of-care leukocyte analyzers address critical gaps in primary healthcare diagnostics by providing rapid, accurate white blood cell differentiation without requiring centralized laboratory infrastructure. This capability supports early infection triage and antimicrobial stewardship in resource-limited settings, directly impacting preclinical biomarker validation workflows where correlative hematological changes inform disease model relevance. The demonstrated correlation with reference hematology analyzers establishes predictive confidence for translational applications in inflammatory disease models.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Scientific Value: Enables interrogation of leukocyte-mediated inflammatory pathways in disease models through quantifiable neutrophil, lymphocyte, and intermediate cell population shifts.
- Operational Value: Provides reproducible hematological readouts for target validation studies where immune cell infiltration serves as a pharmacodynamic biomarker.
Screening & Assay Development
- Scientific Value: Generates standardized leukocyte differential data essential for assay readiness screening of immunomodulatory compounds in whole blood systems.
- Operational Value: Eliminates liquid waste and complex sample preparation, enabling high-throughput screening compatibility with minimal technical expertise.
Translational & Preclinical Research
- Scientific Value: Supports disease-relevant system validation by correlating peripheral leukocyte dynamics with tissue-specific inflammatory endpoints in preclinical models.
- Operational Value: Facilitates longitudinal monitoring in preclinical studies through minimal blood volume requirements (5 µL capillary sampling) and rapid result generation.
Pipeline & Workflow Integration
The analyzer functions as a discovery-to-preclinical continuity tool, positioning leukocyte profiling between early target hypothesis testing and lead optimization phases where immune modulation represents a key mechanism of action.
- Discovery Biology: Supports mechanistic de-risking by quantifying immune cell responses to pathway modulators, reducing false positives in target validation cascades.
- Screening: Delivers quantitative, correlated leukocyte outputs (WBC, granulocytes, lymphocytes) that enable compound effect comparison across treatment groups.
- Analytics: Provides Spearman correlation-validated measurements (rs = 0.972 for WBC/granulocytes, rs = 0.851 for lymphocytes) ensuring reliable inter-system comparability for data-driven decision making.
- Translational Research: Connects discovery-phase leukocyte profiling to preclinical continuity through Bland-Altman-confirmed consistency with reference hematology systems.
- Enterprise Reuse: Represents a deployable capability across multiple therapeutic areas requiring immune monitoring, reducing redundant validation efforts.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Predictive confidence in leukocyte-mediated mechanism of action, reduction of mechanistic ambiguity in immunomodulator screening.
- Operational Value: Standardization through maintenance-free operation, reproducibility via 95% limits of agreement, and scalability through single-person detection kits.
- Strategic Value: Better go/no-go decisions in immunomodulator programs, capital efficiency by avoiding core lab dependencies, and reduced late-stage biological risk through early immune profiling.
- Portfolio Impact: Risk-adjusted prioritization of compounds based on leukocyte response profiles, enabling advancement decisions grounded in translatable hematological biomarkers.
Implementation Considerations
- Requires basic hematology knowledge for accurate interpretation of leukocyte differentials (neutrophils, lymphocytes, intermediate cells).
- Needs capillary blood collection training and quantitative pipette proficiency for precise 5 µL sample volume.
- Demands cross-team standardization of reference group selection (age/gender-adjusted norms) for consistent longitudinal tracking.
- Requires adaptation validation when extending beyond human whole blood to preclinical model systems (e.g., murine, non-human primate).
- Practical limitation: Lower lymphocyte correlation (rs = 0.851) necessitates orthogonal validation for lymphocytic-focused immunotherapies.
