Name: Murine huidtransplantatie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-01-16T10:34:00.000+00:00
Duration: 6 min 42 s
Description: Leer een muizen huidtransplantatie uitvoeren met de allogene BALB/c naar C57BL/6 stamcombinatie. Deze standaardtechniek onderzoekt allogene T-celreacties en tolerantie-inductiestrategieën.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

NIH Immunologie Training Grant T32 AI 60.573 (KRG) en NIH subsidie ​​GM 41.514 (MDC)

Voorafgaand aan de start van het experiment: <ul><li> Verkrijgen van goedkeuring IACUC </li><li> Steriliseer chirurgische instrumenten en Q-tips </li></ul> I. Harvest donorweefsel <ol><li> Euthanaseren donor muis (in overeenstemming met SOP instelling) </li><li> Natte haar terug uit het oor met alcohol </li><li> Oogst donorhuid door te snijden oor af aan de basis </li><li> Plaats weefsel in plaat op ijs </li><li> Split oor: knijp ventrale en dorsale zijde van het weefsel op de basis van het oor met de rat-tand tang; voorzichtig uit elkaar te trekken weefsel; zweven dorsale weefsel, inwendig oppervlak naar beneden, in PBS op ijs en schenk collagene ventrale klep </li></ol> II. Bereid ontvanger voor transplantatie <ol><li> Verdoven muis met behulp van goedgekeurde procedure </li><li> Beheren pijnstillende voor post-op pijnbestrijding (dat wil zeggen 0,05-0,1 mg / g Bupernex ip) </li><li> Plaats de muis in de laterale positie </li><li> Voer teen knijpen om ervoor te zorgen dier is voldoende verdoofd </li><li> Natte haren met alcohol en scheren thorax </li><li> Veeg gebied schoon met alcoholdoekje </li></ol> III. Skin Transplant <ol><li> Maak ~ 1 cm incisie: tent huid met rat-tand tang en snijd ~ 0,25-0,5 cm onder tang </li><li> Verwijder de donorhuid van PBS, plaats bovenop graft bed (met interne oppervlak van het oor de huid naar graft bed), en verwijder overtollig PBS met een steriele Q-tip </li><li> Voorzichtig weg trimmen overtollige donorhuid, zodat de transplantatie ligt vlak binnen de graft bed (zorg ervoor dat de graft kanten zijn gekruld onder en dat de transplantatie niet kater op stam ontvanger huid) </li><li> Wikkel ontvanger in steriel verband (met de niet-klevende gaasje segment geplaatst over de huidtransplantatie) </li><li> Zorg ervoor dat de bandage niet te strak wordt (te beoordelen dier ademen) en dat de armen zijn vrij mobiel </li><li> Veilige bandage met een 2-0 zijden hechtdraad </li><li> Plaats van dieren in een schone kooi (onder verhitting lamp tot dier is voldoende hersteld van anesthesie) </li><li> Monitor ontvanger 1-2/day op tekenen van nood en beheren pijnstiller nodig is voor pijnbestrijding </li></ol> IV. Bandage Removal (6-7 dagen na transplantatie) <ol><li> Verdoven muis met behulp van goedgekeurde procedure </li><li> Knippen en verwijder zijden hechtdraad </li><li> Met behulp van stompe uiteinde een schaar, knip voorzichtig door bandage (zorg ervoor dat niet te enten verstoren) en verwijder voorzichtig </li><li> Keer terug muis te reinigen kooi </li><li> Controleer graft ~ 8 uur na het verwijderen bandage op tekenen van korstvorming of inkrimping. Indien aanwezig, kan transplantaat niet hebben vascularize en moet worden beschouwd als een technische storing. </li><li> Monitor dagelijks op tekenen van afwijzing (meestal gedefinieerd als ~ 80% necrose van de donor weefsel) </li><li> Allogene huidtransplantaties zal meestal weigeren tussen d8-12 na de operatie </li></ol> V. Handige tips <ol><li> Oogsten donorweefsel dicht bij de basis van het oor wil: 1) te maximaliseren ent grootte, en 2) zorgen voor een ongelijke ventrale overhang dat zal vergemakkelijken splitsen </li><li> Gebruik altijd een nieuw scheermesje voor het scheren ontvanger </li><li> Als pijnstiller wordt gegeven ip, alvorens toe te dienen aan de procedure transplantatie aan post-op het hanteren een minimum te beperken (minimaliseren kans op het verstoren van de graft) </li><li> Indien mogelijk, verwijder handschoenen voor het aanbrengen van het verband. Handschoenen hebben de neiging om het verband stok en de toepassing bemoeilijken </li><li> Het plaatsen van een enkele hechting aan het verband einde zal minimaliseren voortijdige verwijdering </li><li> Wrap bandage zo strak als is toegestaan ​​en beoordelen van de ademhaling VOORDAT het plaatsen van hechtdraad. Als pleister te strak is, zal dier stoppen met ademen. Als bandage te los is, zal dier verwijderen. </li></ol>

De auteurs hebben niets te melden.

Zoals aangetoond in deze video-artikel, de huid transplantatie model is een snelle en eenvoudige methode voor de controle allogene T-cel responsen. Allogene huid transplantatie heeft een breed scala aan toepassingen en is gebruikt voor het testen van de efficiëntie van een verscheidenheid van immunosuppressiva en tolerantie-inductie-protocollen, evenals het onderzoeken van de biologische effecten van de verschillende blokkerende antilichamen.

<table><tbody><tr><td>Micro-dissectiepincet (gebogen)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F4142</td><td></td></tr><tr><td>Rattentandpincet (1x2 tanden, recht)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11053-10</td><td>n=2</td></tr><tr><td>Strabismusschaar (stompe punt)</td><td>Fine Science Tools</td><td>14074-11</td><td></td></tr><tr><td>Irispincet (gebogen)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11065-07</td><td></td></tr><tr><td>Veerschaar (geknikt)</td><td>Fine Science Tools</td><td>15006-09</td><td></td></tr><tr><td>Halsey micronaaldenhouder</td><td>Fine Science Tools</td><td>12500-12</td><td></td></tr><tr><td>10 cm platen</td><td>Corning</td><td>430167</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Cellgro</td><td>21-040-CV</td><td></td></tr><tr><td>Bupernex (Buprenorfinehydrochloride)</td><td>Reckitt Benckiser</td><td>517201</td><td></td></tr><tr><td>Insulinespuiten (29 Ga)</td><td>Monoject</td><td>8881 600145</td><td></td></tr><tr><td>Wattenstaafjes</td><td>Solon Manufacturing Company</td><td>362</td><td></td></tr><tr><td>Enkelzijdige scheermesjes (#9)</td><td>Smith &amp;amp; Nephew Inc.</td><td>67-0238</td><td></td></tr><tr><td>Zijden hechtdraad (2-0; PS-2)</td><td>Ethicon Inc.</td><td>583H</td><td></td></tr></tbody></table>

murine huidtransplantatie

Murine Skin Transplantation

Als een van de strengste en minst technisch uitdagende modellen, huid transplantatie is een standaard methode voor het testen van gastheer T-cel responsen aan MHC-ongelijksoortige donor antigenen. Het doel van deze video-artikel is om de kijker te voorzien van een stap-voor-stap visuele demonstratie van de huid transplantatie met de muis model. Het protocol is onderverdeeld in vijf hoofdonderdelen: 1) het oogsten van donorhuid, 2) het opstellen ontvanger voor transplantatie; 3) huid transplantatie; 4) bandage verwijdering en het toezicht op afstoting van het transplantaat; 5) nuttige tips. Eenmaal bedreven, moet de procedure zelf te nemen &lt;10 min. uit te voeren.

Allogene huid transplantatie is een standaard model voor het testen van gastheer T-cel responsen aan MHC-ongelijksoortige donor antigenen. Deze video-artikel geeft een visuele handleiding van iedere stap die betrokken zijn bij het uitvoeren van een BALB/c--&gt; C57BL / 6 huid transplantatie.

Murine huidtransplantatie

Als een van de meest strikte en technisch minst uitdagende modellen is huidtransplantatie een standaardmethode om gastheer T-celresponsen te analyseren op ...

Welkom in het laboratorium van Dr. Michael Kalen. Ik ben Kim Gard. Vandaag demonstreren we een huidtransplantatiemodel met de allogene BC- naar black six-stamcombinatie als een van de meest stringente en technisch minst uitdagende modellen voor weefseltransplantafstoting.Huidtransplantatie is een standaardtechniek die wordt gebruikt om allogene responsen te analyseren en wordt veelvuldig toegepast om de efficiëntie van diverse strategieën voor tolerantie-inductie te beoordelen. Laten we beginnen. Deze procedure start met het oogsten van de huid van onze BAB-donormuis.Euthanaseer eerst de donor in overeenstemming met de Iacuc SOP. Bevochtig vervolgens het haar bij de basis met alcohol, oogst de huid door het oor zo dicht mogelijk bij de basis te verwijderen en plaats dit op ijs. Splits daarna elk oor door de collageenrijke ventrale flap te verwijderen en laat het weefsel drijven op ijs.De donorhuid is nu klaar voor transplantatie. De transplantatieprocedure begint met het anesthetiseren van het ontvangende dier volgens goedgekeurde procedures. Zodra het dier voldoende is geanestheseerd, wordt het uit de kamer gehaald en krijgt het bup andnext IP voor pijnbestrijding.Plaats de ontvan

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

In dit rapport beschrijven we de drie-dimensionale huid te reconstrueren model dat de menselijke huid nabootst in de architectuur en compositie. Melanocyt fysiologie, melanoomprogressie en het lot van dermale stamcellen zijn onderzocht met behulp van de huid te reconstrueren model. Het model is ook bruikbaar als een preklinische hulpmiddel voor drugs beoordeling.

De driedimensionale menselijke huid Reconstrueer model: een instrument om de normale huid en melanoomprogressie Study

Weefsel-specifieke analyse van een haarfollikel regeneratie model met behulp van lentivirus tot winst-of verlies-van-functie bemiddelen.

Snelle Genetische analyse van epitheliale-mesenchymale signalering tijdens haar regeneratie

This video demonstrates a method for grafting human skin onto an immunodeficient mouse with a suppressed neutrophil response. The method involves applying human split-thickness skin to the mouse's graft bed, sealing it, and covering it for recovery. Eventually, the human skin adheres to the mouse's skin, establishing vascularization and circulation, resulting in a successful skin xenograft.

A Technique for Human Skin Grafting in a Mouse Model

Neisseria meningitidis is een humaan specifieke ziekteverwekker die de bloedvaten infecteert. In dit protocol menselijke bloedvaten in een muis worden geïntroduceerd door enten menselijke huid op immuungecompromitteerde muizen. Bacteriën zich uitgebreid naar menselijke vaten, waardoor vasculaire beschadiging en ontwikkeling van de purpura uitslag typisch waargenomen in menselijke gevallen.

Gehumaniseerd muismodel om te studeren Bacteriële infecties Targeting microvasculature

Transplantatie van staarthuid is een krachtig model voor het bestuderen van T-cel-afhankelijke afstoting en tolerantie-inductie tijdens allogene immuunresponsen bij muizen. De voordelen van dit protocol zijn kleine invasieve chirurgie en gemakkelijke monitoring zonder dat de ontvangende muis hoeft te worden geofferd.

Transplantatie van Tail Skin aan allogene CD4 T-cel responsen bij muizen

Dit nieuwe model voor orthotope achterste ledematen transplantatie in de muis, van een niet-hechtingsmanchet techniek voor super-microvasculaire anastomose, een krachtig hulpmiddel voor in vivo mechanistische immunologisch onderzoek naar gevasculariseerd samengestelde allotransplantatie (VCA).

Orthotope Hind Limb Transplantation in de muis

Murine full-dikte van de huid transplantatie is een gevestigde model om afstoting te studeren in een alloimmuun setting. Hier bieden we een tutorial van elke stap die betrokken zijn bij het uitvoeren van een BALB / c -&gt; C57BL / 6 full-dikte van de huid transplantatie.

Murine volledige dikte van de huid Transplantation

Wij stellen voor een protocol dat laat zien hoe geïnduceerde pluripotente stamcel afkomstige keratinocyten en fibroblasten differentiëren en genereren een 3D huid organoid, met behulp van deze keratinocyten en fibroblasten. Dit protocol bevat een extra stap van het genereren van een gehumaniseerd muizen model. De techniek die hier gepresenteerd zal dermatologische onderzoek verbeteren.

Generatie van 3D huid Organoid van koord bloed afkomstige geïnduceerde pluripotente stamcellen

Het doel van deze studie was om een murine model van burn wound healing te ontwikkelen. Een thermische brandwond werd veroorzaakt op de rughuid van muizen met behulp van een voorverwarmde messing sjabloon. Verbrand weefsel werd gedebrideerd en bedekt met een huidtransplantatie geoogst uit de staart van een genetisch vergelijkbare donormuis.

Een Murine Model van een burn wound gereconstrueerd met een allogene huidtransplantatie

Het huidige protocol beschrijft hoe de menselijke huid kan worden geënt op niet-obese diabetische (NOD) -scid interleukine-2 gammaketen receptor (NSG) muizen. Een gedetailleerde beschrijving van de voorbereiding van de menselijke huid voor transplantatie, de voorbereiding van muizen voor transplantatie, transplantatie van de menselijke huid van gespleten dikte en de herstelprocedure na de transplantatie zijn opgenomen in het rapport.

Xenograft huidmodel om menselijke immuunresponsen in vivo te manipuleren

We presenteren een reproduceerbaar muismodel van heterotopische vascularisatie allotransplantatie van achterpoot tot hals. Dit supermicrochirurgisch protocol, waarbij 0,3-0,5 mm vatenanastomosen worden gebruikt, integreert nylonfilamentgeleiding en veneuze manchetten. Het biedt een betrouwbaar platform voor translationele studies naar tolerantie, ischemie-reperfusieschade en immunologische mechanismen bij vasculariseerde samengestelde allotransplantatie.

Heterotopische achterpoot-naar-nek transplantatie bij de muis: een supermicrochirurgisch model van vasculariseerde composietallotransplantatie

Leer een muizen huidtransplantatie uitvoeren met de allogene BALB/c naar C57BL/6 stamcombinatie. Deze standaardtechniek onderzoekt allogene T-celreacties en tolerantie-inductiestrategieën.

Murine huidtransplantatie

Meer video's verkennen