Generatie en karakterisering van rechterventrikel myocardinfarct geïnduceerd door permanente ligatie van de rechter kransslagader bij muizen

Rechterventrikel is beter bestand tegen ischemie dan de linker. We introduceerden een techniek om een rechterventrikelinfectiemodel te genereren, dat het pathofysiologische mechanisme kan verduidelijken tijdens de ontwikkeling van een rechterventrikelinfarct. We vonden de juiste kransslagader door middel van vasculaire kostenberekening en definieerden het ligatiegebied dat van cruciaal belang is voor het succesvol genereren van een muis rechterventrikelinfarctmodel.

Linhai Ruo, een posterarts uit mijn laboratorium, demonstreert de procedure. Plaats de muis in rugligging op een matje en zorg voor de diepte van de anesthesie door de afwezigheid van een teenontwenningsreactie. Bevestig de snijtanden met een hechtdraad en immobiliseer de ledematen met plakband.

Verwijder het haar uit de nek tot xiphoid met een ontharingscrème. Trek de tong iets uit met een pincet, til de onderkaak op met een tongdepressor om de glottis bloot te leggen. En voer intra tracheale intubatie uit door een 22 gauge canule in de glottis in te brengen.

Sluit de elektrocardiografie-elektroden correct aan op de ledematen van de muis en neem het ECG op. Om de borstkas te openen, maakt u een een centimeter lange incisie in de huid, parallel aan de derde rechter rib met een oogheelkundige schaar. Bepaal de derde intercostale ruimte opnieuw en zorg voor voldoende ruimte volgens de borstbeenhoek.

Scheid en knip de pectoralis major en pectoralis minor spieren met een schaar en microtang boven de derde intercostale ruimte. Daarna scheidt u de intercostale spier botweg met een elleboogtang om het chirurgische veld bloot te leggen en snijdt u vervolgens het hartzakje in. Til het rechter atrium op met steriel katoen en liad de rechter kransslagader met een steriele 8-0 nylondraad, met een ligatiebereik van drie tot vijf millimeter.

Na het legen van de rechter kransslagader, let op de monitoring ECG-lood 3, die ST-segmentverhoging laat zien. Verwijder de katoenen en hechtspieren en de huid met een steriele 5-0 nylondraad. Plaats vervolgens de muis op het verwarmingskussen om het herstel te bevorderen.

Plaats de muis in rugligging op een ultrasoon platform voor dierfixatie en ultrasone bediening. Plak zijn klauwen op de elektrode om een ECG-opname te verkrijgen, via een systeem dat aan de ultrasone machine is bevestigd. Verwijder het haar van de borst van de muis met een ontharingscrème en breng ultrasone gel aan op de huid van de borst.

Stel het platform in op de horizontale positie. Oriënteer de transducer evenwijdig aan het linkerbeen en verkrijg het beeld van de linkerventrikel met lange as. Draai de sonde 90 graden met de klok mee om de linker ventrikel korte toegangsweergave te verkrijgen.

Druk op de cine store-knop om de beelden op te slaan. Kantel de linkerbovenhoek van het platform op het laagste punt. Beweeg de transducer verticaal naar beneden en behoud de positie over de bovenbuik en onder het diafragma van de muis onder B-modus.

Pas de platformpositie enigszins aan door de X- en Y-as te draaien totdat de rechter ventrikel, het rechteratrium, het linkeratrium en de linker ventrikel op het scherm te zien zijn. En sla de afbeelding op door op de cine store- of frameknop te drukken. Druk op M+Mode .

Nadat de twee X-indicatorlijn verschijnt, zoekt u de indicatorlijn bij de tricuspidalisklepopening om de beweging van het tricuspidalisjaarvlak te verkrijgen. Druk nogmaals op M+Mode. Druk op de knop Cine Store of Frame Store om gegevens en afbeeldingen op te slaan.

Kantel de linkerkant van het platform op het laagste punt. Plaats de sonde in een hoek van 30 graden ten opzichte van de horizontale as langs de rechter voorste oksellijn. Draai de X- en Y-as van het platform om de rechter ventrikel weer te geven.

Druk op de M-Mode-knop en zoek de indicatorlijn op het hyperechoïsche punt van het septum om het M-Mode-beeld van de rechter ventrikelinterface te verkrijgen. Druk nogmaals op de knop M-Mode. Druk op de cine store-knop om de foto op te slaan.

Voer tracheale intubatie uit en stel de parameter van de dierlijke ventilator in. Maak een bilaterale incisie van één centimeter op de huid boven het xiphoid-proces en transect het diafragma en de rib met een oogheelkundige schaar om het hart bloot te leggen. Prik de rechter ventrikelvrije wand met een naald van 32 gauge.

Verwijder de naald en druk de wond met katoen om het bloeden te stelpen. Breng de punt van de katheter via de prikplaats in de rechter ventrikel en duw de katheter langzaam naar voren. Pas de positie van de tip aan om een typische RV-drukgolfvorm te verkrijgen, weergegeven op een monitor en opnamesysteem.

Na 10 minuten stabilisatie, registreer de gegevens van RV systolische bloeddruk, RV en diastolische druk, en RV maximale rechter ventriculaire druk stijgende afnemende snelheid. Klik op de selectieknop om hartcycli te selecteren voor berekening. En klik vervolgens op de geanalyseerde knop om de gemiddelde waarden van de geselecteerde cycli te berekenen.

Plaats het dierlijke ruggemaal op het kussen en intubeer voor kunstmatige ventilatie. Open de borst met een chirurgische schaar en stel het hart bloot. Maak een inkeping van drie millimeter met een oogheelkundige schaar op de rechter boezems en perfundeer het hart met 5 ml normale zoutoplossing door de harttop met een injector.

Blokkeer het bloed uit de aorta met een aortaklem. En perfundeer 0,1 ml 1 mg / ml nitroglycerine, door de cardiale top met een injector om de kransslagader te verwijden. Perfundeer het hart met een gegoten reagens van 1 ml door de harttop en wacht twee tot drie uur.

Eroderen van het hart met 50% natriumhydroxide gedurende twee tot drie dagen. En verwijder het spierweefsel of bindweefsel door te spoelen met een normale zoutoplossing. Na RCA-ligatie werd ST-segmentverhoging gezien in lood 3 van het ECG.

2, 3, 5-Triphenyltetrazolium chlorid kleuring toonde aan dat het infarctgebied goed is voor 45% van de RV-vrije wand, 24 uur na de operatie. Echocardiografie toonde aan dat de RV interne dimensie aan het einde van diastole, toegenomen in de RV1. En het was meer dan twee keer in de Sham-groep.

RV-fractieverkorting, RV-ejectiefractie en tricuspidalis ringvormige vlak systolische excursie waren significant kleiner in de RVI. De RV door LV-gebiedsverhouding steeg met ongeveer 50% RV-hemodynamische meting en toonde aan dat in de RVI-groep, rechterventrikel systolische bloeddruk, de maximale en minimale stijgende snelheid van RV-druk, RV-contractiliteit, aanzienlijk kleiner waren. Rechterventrikel- en diastolische druk en de exponentiële tijdconstante van rv-relaxatie-index waren aanzienlijk significanter dan die in de Sham-groep.

Een RV-aneurysma was zichtbaar in het infarctgebied. De verhouding hartgewicht tot lichaamsgewicht en hartgewicht tot tibialengteverhouding in de RVI-groep waren iets groter. Massonkleuring wees op significante fibrose in de RV-vrije muur.

En zelden trad fibrose op in het septum van de RVI-groep. Daarentegen bevonden enkele overlevende cardiomyocyten zich in het infarctgebied. Het is cruciaal om het ligatiegebied bloot te leggen en de diepte en het bereik van de ingebrachte naald te grijpen om het succes en de overlevingskansen te vergroten.