Name: Driedimensionale kweek van gevasculariseerd thermogeen vetweefsel uit microvasculaire fragmenten (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-02-03T13:30:00.000+00:00
Duration: 11 min 24 s
Description: Leer driedimensionale kweek van gevasculariseerd thermogeen vetweefsel uit microvasculaire fragmenten. Deze methode biedt een eenvoudige aanpak voor onderzoek naar obesitas en metabole ziekten.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dr. Acosta wordt ondersteund door de National Institutes of Health subsidies CA148724 en TL1TR002647. Dr. Gonzalez Porras wordt ondersteund door het National Institute of Diabetes and Digestive and Kidney Diseases van de National Institutes of Health, onder awardnummer F32-0DK122754. Dit werk werd gedeeltelijk ondersteund door de National Institutes of Health (5SC1DK122578) en de Universiteit van Texas in San Antonio Department of Biomedical Engineering. De inhoud is uitsluitend de verantwoordelijkheid van de auteurs en vertegenwoordigt niet noodzakelijkerwijs de officiële standpunten van de National Institutes of Health. Figuren zijn deels gemaakt met Biorender.com.

<ol><li>Cohen, P., Spiegelman, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brown+and+beige+fat%3A+molecular+parts+of+a+thermogenic+machine%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Brown and beige fat: molecular parts of a thermogenic machine.</a> Diabetes. 64 (7), 2346-2351 (2015).</li>
<li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brown+adipose+tissue+transplantation+reverses+obesity+in+Ob%2FOb+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Brown adipose tissue transplantation reverses obesity in Ob/Ob mice.</a> Endocrinology. 156 (7), 2461-2469 (2015).</li>
<li>Tharp, K. M., Stahl, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioengineering+beige+adipose+tissue+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Bioengineering beige adipose tissue therapeutics.</a> Frontiers in Endocrinology. 6, 164(2015).</li>
<li>Barquissau, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((White-to-brite+conversion+in+human+adipocytes+promotes+metabolic+reprogramming+towards+fatty+acid+anabolic+and+catabolic+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Metabolism%22%5BJournal%5D)">White-to-brite conversion in human adipocytes promotes metabolic reprogramming towards fatty acid anabolic and catabolic pathways.</a> Molecular Metabolism. 5 (5), 352-365 (2016).</li>
<li>Kim, S. H., Plutzky, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brown+fat+and+browning+for+the+treatment+of+obesity+and+related+metabolic+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+%26+Metabolism+Journal%22%5BJournal%5D)">Brown fat and browning for the treatment of obesity and related metabolic disorders.</a> Diabetes & Metabolism Journal. 40 (1), 12-21 (2016).</li>
<li>Lizcano, F., Vargas, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biology+of+beige+adipocyte+and+possible+therapy+for+type+2+diabetes+and+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Biology of beige adipocyte and possible therapy for type 2 diabetes and obesity.</a> International Journal of Endocrinology. 2016, 9542061(2016).</li>
<li>Mulya, A., Kirwan, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brown+and+beige+adipose+tissue%3A+therapy+for+obesity+and+its+comorbidities%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology+and+Metabolism+Clinics+of+North+America%22%5BJournal%5D)">Brown and beige adipose tissue: therapy for obesity and its comorbidities.</a> Endocrinology and Metabolism Clinics of North America. 45 (3), 605-621 (2016).</li>
<li>Murphy, C. S., Liaw, L., Reagan, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+tissue-engineered+adipose+constructs+for+modeling+disease%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Biomedical+Engineering%22%5BJournal%5D)">In vitro tissue-engineered adipose constructs for modeling disease.</a> BMC Biomedical Engineering. 1, 27(2019).</li>
<li>Srivastava, S., Veech, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brown+and+brite%3A+The+fat+soldiers+in+the+anti-obesity+fight%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Brown and brite: The fat soldiers in the anti-obesity fight.</a> Frontiers in Physiology. 10, 38(2019).</li>
<li>Samuelson, I., Vidal-Puig, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studying+brown+adipose+tissue+in+a+human+in+vitro+context%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Studying brown adipose tissue in a human in vitro context.</a> Frontiers in Endocrinology. 11, 629(2020).</li>
<li>Wang, C. -H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CRISPR-engineered+human+brown-like+adipocytes+prevent+diet-induced+obesity+and+ameliorate+metabolic+syndrome+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">CRISPR-engineered human brown-like adipocytes prevent diet-induced obesity and ameliorate metabolic syndrome in mice.</a> Science Translational Medicine. 12 (558), (2020).</li>
<li>Kaisanlahti, A., Glumoff, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Browning+of+white+fat%3A+agents+and+implications+for+beige+adipose+tissue+to+type+2+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physiology+and+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Browning of white fat: agents and implications for beige adipose tissue to type 2 diabetes.</a> Journal of Physiology and Biochemistry. 75 (1), 1-10 (2019).</li>
<li>Sato, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+capillary+networks+from+rat+microvascular+fragments+in+vitro%3A+the+role+of+myofibroblastic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Microvascular+Research%22%5BJournal%5D)">Development of capillary networks from rat microvascular fragments in vitro: the role of myofibroblastic cells.</a> Microvascular Research. 33 (2), 194-210 (1987).</li>
<li>Laschke, M. W., Später, T., Menger, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microvascular+fragments%3A+More+than+just+natural+vascularization+units%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Microvascular fragments: More than just natural vascularization units.</a> Trends in Biotechnology. 39 (1), 24-33 (2021).</li>
<li>Hoying, J. B., Boswell, C. A., Williams, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiogenic+potential+of+microvessel+fragments+established+in+three-dimensional+collagen+gels%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vitro+Cellular+%26+Developmental+Biology-Animal%22%5BJournal%5D)">Angiogenic potential of microvessel fragments established in three-dimensional collagen gels.</a> In Vitro Cellular & Developmental Biology-Animal. 32 (7), 409-419 (1996).</li>
<li>Acosta, F. M., Stojkova, K., Brey, E. M., Rathbone, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+straightforward+approach+to+engineer+vascularized+adipose+tissue+using+microvascular+fragments%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering.+Part+A%22%5BJournal%5D)">A straightforward approach to engineer vascularized adipose tissue using microvascular fragments.</a> Tissue Engineering. Part A. 26 (15-16), 905-914 (2020).</li>
<li>Acosta, F. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipogenic+differentiation+alters+properties+of+vascularized+tissue-engineered+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering.+Part+A%22%5BJournal%5D)">Adipogenic differentiation alters properties of vascularized tissue-engineered skeletal muscle.</a> Tissue Engineering. Part A. 28 (1-2), 54-68 (2021).</li>
<li>Strobel, H. A., Gerton, T., Hoying, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascularized+adipocyte+organoid+model+using+isolated+human+microvessel+fragments%5BTitle%5D)+AND+%22Biofabrication%22%5BJournal%5D)">Vascularized adipocyte organoid model using isolated human microvessel fragments.</a> Biofabrication. 13 (3), 035022(2021).</li>
<li>Acosta, F. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+functional+vascularized+beige+adipose+tissue+from+microvascular+fragments+of+models+of+healthy+and+type+II+diabetes+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Tissue+Engineering%22%5BJournal%5D)">Engineering functional vascularized beige adipose tissue from microvascular fragments of models of healthy and type II diabetes conditions.</a> Journal of Tissue Engineering. 13, 20417314221109337(2022).</li>
<li>Gonzalez Porras, M. A., Stojkova, K., Acosta, F. M., Rathbone, C. R., Brey, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+human+beige+adipose+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Bioengineering+and+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Engineering human beige adipose tissue.</a> Frontiers in Bioengineering and Biotechnology. 10, 906395(2022).</li>
<li>Herold, J., Kalucka, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiogenesis+in+adipose+tissue%3A+The+interplay+between+adipose+and+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Angiogenesis in adipose tissue: The interplay between adipose and endothelial cells.</a> Frontiers in Physiology. 11, 1861(2021).</li>
<li>McCarthy, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fat-On-A-Chip+models+for+research+and+discovery+in+obesity+and+its+metabolic+comorbidities%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+Part+B%3A+Reviews%22%5BJournal%5D)">Fat-On-A-Chip models for research and discovery in obesity and its metabolic comorbidities.</a> Tissue Engineering Part B: Reviews. 26 (6), 586-595 (2020).</li>
<li>Klingelhutz, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scaffold-free+generation+of+uniform+adipose+spheroids+for+metabolism+research+and+drug+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Scaffold-free generation of uniform adipose spheroids for metabolism research and drug discovery.</a> Scientific Reports. 8 (1), 523(2018).</li>
<li>Yang, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolically+active+three-dimensional+brown+adipose+tissue+engineered+from+white+adipose-derived+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering.+Part+A%22%5BJournal%5D)">Metabolically active three-dimensional brown adipose tissue engineered from white adipose-derived stem cells.</a> Tissue Engineering. Part A. 23 (7-8), 253-262 (2017).</li>
<li>Vaicik, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydrogel-based+engineering+of+beige+adipose+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Materials+Chemistry+B%22%5BJournal%5D)">Hydrogel-based engineering of beige adipose tissue.</a> Journal of Materials Chemistry B. 3 (40), 7903-7911 (2015).</li>
<li>Tharp, K. M., Stahl, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioengineering+beige+adipose+tissue+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Bioengineering beige adipose tissue therapeutics.</a> Frontiers in Endocrinology. 6, 164(2015).</li>
<li>Tharp, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Matrix-assisted+transplantation+of+functional+beige+adipose+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Matrix-assisted transplantation of functional beige adipose tissue.</a> Diabetes. 64 (11), 3713-3724 (2015).</li>
<li>Harms, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mature+human+white+adipocytes+cultured+under+membranes+maintain+identity%2C+function%2C+and+can+transdifferentiate+into+brown-like+adipocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Mature human white adipocytes cultured under membranes maintain identity, function, and can transdifferentiate into brown-like adipocytes.</a> Cell Reports. 27 (1), 213-225 (2019).</li>
<li>Frueh, F. S., Später, T., Scheuer, C., Menger, M. D., Laschke, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+murine+adipose+tissue-derived+microvascular+fragments+as+vascularization+units+for+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Isolation of murine adipose tissue-derived microvascular fragments as vascularization units for tissue engineering.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55721(2017).</li>
<li>Cannon, B., Nedergaard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brown+adipose+tissue%3A+Function+and+physiological+significance%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Reviews%22%5BJournal%5D)">Brown adipose tissue: Function and physiological significance.</a> Physiological Reviews. 84 (1), 277-359 (2004).</li>
<li>Unser, A. M., Tian, Y., Xie, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Opportunities+and+challenges+in+three-dimensional+brown+adipogenesis+of+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+Advances%22%5BJournal%5D)">Opportunities and challenges in three-dimensional brown adipogenesis of stem cells.</a> Biotechnology Advances. 33, 962-979 (2015).</li>
<li>Dani, V., Yao, X., Dani, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+fat+tissues+and+iPSC-derived+energy+expenditure+adipocytes+to+counteract+obesity-driven+metabolic+disorders%3A+Current+strategies+and+future+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Reviews+in+Endocrine+%26+Metabolic+Disorders%22%5BJournal%5D)">Transplantation of fat tissues and iPSC-derived energy expenditure adipocytes to counteract obesity-driven metabolic disorders: Current strategies and future perspectives.</a> Reviews in Endocrine & Metabolic Disorders. 23 (1), 103-110 (2022).</li>
<li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose+tissue-derived+microvascular+fragments+as+vascularization+units+for+dental+pulp+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Endodontics%22%5BJournal%5D)">Adipose tissue-derived microvascular fragments as vascularization units for dental pulp regeneration.</a> Journal of Endodontics. 47 (7), 1092-1100 (2021).</li>
<li>McDaniel, J. S., Pilia, M., Ward, C. L., Pollot, B. E., Rathbone, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+and+multilineage+potential+of+cells+derived+from+isolated+microvascular+fragments%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Characterization and multilineage potential of cells derived from isolated microvascular fragments.</a> Journal of Surgical Research. 192 (1), 214-222 (2014).</li>
<li>Gealekman, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Depot-specific+differences+and+insufficient+subcutaneous+adipose+tissue+angiogenesis+in+human+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Depot-specific differences and insufficient subcutaneous adipose tissue angiogenesis in human obesity.</a> Circulation. 123 (2), 186-194 (2011).</li>
<li>Altalhi, W., Hatkar, R., Hoying, J. B., Aghazadeh, Y., Nunes, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type+I+diabetes+delays+perfusion+and+engraftment+of+3D+constructs+by+impinging+on+angiogenesis%3B+which+can+be+rescued+by+hepatocyte+growth+factor+supplementation%5BTitle%5D)+AND+%22Cellular+and+Molecular+Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Type I diabetes delays perfusion and engraftment of 3D constructs by impinging on angiogenesis; which can be rescued by hepatocyte growth factor supplementation.</a> Cellular and Molecular Bioengineering. 12 (5), 443-454 (2019).</li>
<li>Altalhi, W., Sun, X., Sivak, J. M., Husain, M., Nunes, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetes+impairs+arterio-venous+specification+in+engineered+vascular+tissues+in+a+perivascular+cell+recruitment-dependent+manner%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Diabetes impairs arterio-venous specification in engineered vascular tissues in a perivascular cell recruitment-dependent manner.</a> Biomaterials. 119, 23-32 (2017).</li>
<li>Laschke, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose+tissue-derived+microvascular+fragments+from+aged+donors+exhibit+an+impaired+vascularisation+capacity%5BTitle%5D)+AND+%22European+Cells+%26+Materials%22%5BJournal%5D)">Adipose tissue-derived microvascular fragments from aged donors exhibit an impaired vascularisation capacity.</a> European Cells & Materials. 28, 287-298 (2014).</li>
<li>Später, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascularization+of+microvascular+fragment+isolates+from+visceral+and+subcutaneous+adipose+tissue+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+and+Regenerative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Vascularization of microvascular fragment isolates from visceral and subcutaneous adipose tissue of mice.</a> Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 19 (1), 161-175 (2021).</li>
<li>Später, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose+tissue-derived+microvascular+fragments+from+male+and+female+fat+donors+exhibit+a+comparable+vascularization+capacity%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Bioengineering+and+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Adipose tissue-derived microvascular fragments from male and female fat donors exhibit a comparable vascularization capacity.</a> Frontiers in Bioengineering and Biotechnology. 9, 777687(2021).</li>
<li>Laschke, M. W., Menger, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+simpler%2C+the+better%3A+tissue+vascularization+using+the+body%27s+own+resources%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">The simpler, the better: tissue vascularization using the body's own resources.</a> Trends in Biotechnology. 40 (3), 281-290 (2022).</li>
<li>Yang, F., Cohen, R. N., Brey, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+co-culture+conditions+for+a+human+vascularized+adipose+tissue+model%5BTitle%5D)+AND+%22Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Optimization of co-culture conditions for a human vascularized adipose tissue model.</a> Bioengineering. 7 (3), 114(2020).</li>
<li>Pilkington, A. -C., Paz, H. A., Wankhade, U. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beige+adipose+tissue+identification+and+marker+specificity-Overview%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Beige adipose tissue identification and marker specificity-Overview.</a> Frontiers in Endocrinology. 12, 599134(2021).</li>
<li>Chiou, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scaffold+architecture+and+matrix+strain+modulate+mesenchymal+cell+and+microvascular+growth+and+development+in+a+time+dependent+manner%5BTitle%5D)+AND+%22Cellular+and+Molecular+Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Scaffold architecture and matrix strain modulate mesenchymal cell and microvascular growth and development in a time dependent manner.</a> Cellular and Molecular Bioengineering. 13 (5), 507-526 (2020).</li>
</ol>

De auteurs verklaren dat het onderzoek werd uitgevoerd in afwezigheid van commerciële of financiële relaties die kunnen worden opgevat als een potentieel belangenconflict.

Het gebied van bruin / beige vetweefseltechnologie is grotendeels onvolwassen 22,23,24,25,26,27,28, waarbij het grootste deel van de vetmodellen wordt ontwikkeld voor wit vetweefsel 8,22,31. Gemanip...

Het doel van dit protocol is om een aanpak te beschrijven voor het ontwikkelen van gevasculariseerd beige vetweefsel uit een enkele, potentieel autologe bron, microvasculair fragment (MVF). Van bruine en beige vetweefsels is aangetoond dat ze gunstige eigenschappen vertonen die verband houden met metabole regulatie; Het kleine volume van deze vetweefseldepots bij volwassenen beperkt echter de potentiële impact op het systemische metabolisme, met name bij zieke aandoeningen zoals obesitas of diabetes type 2 1,2,3,4,5,6,7. Er is aanzienlijke belangstelling voor bruin / beige vet als een therapeutisch doelwit voor het voorkomen van de schadelijke metabole effecten in verband met obesitas en de comorbiditeiten ervan 8,9,10,11,12.
MVF's zijn vaatstructuren die direct kunnen worden geïsoleerd uit vetweefsel, gekweekt en gedurende langere tijd in een driedimensionale configuratie kunnen worden gehouden13,14,15. Eerder werk van onze groep, en anderen, zijn begonnen met het exploiteren van de meercellige en multipotente capaciteit van MVF's, met name als het gaat om de vorming van vetweefsel16,17,18. Als een opbouw van dit werk hebben we onlangs aangetoond dat MVF's afgeleid van knaagdiermodellen van gezonde en type 2 diabetes19 en van menselijke proefpersonen (volwassenen ouder dan 50 jaar)20 cellen bevatten die kunnen worden geïnduceerd om thermogeen of beige vetweefsel te vormen.
Hierin is een innovatieve aanpak van waaruit een enkele bron MVF wordt gebruikt, niet alleen in staat om beige vetweefsel te creëren, maar ook de bijbehorende en kritische vasculaire component21. Het gebruik van deze techniek kan van grote waarde zijn voor studies die op zoek zijn naar een eenvoudige weefselmanipulatiebenadering voor de vorming van thermogene vetweefsels. In tegenstelling tot andere methoden die gericht zijn op het engineeren van beige vetweefsel 22,23,24,25,26,27,28, vereist het proces dat in deze studie wordt beschreven niet het gebruik van meerdere celtypen of complexe inductieregimes. Gevasculariseerde beige en witte vetmodellen kunnen worden gemaakt met MVF's afkomstig van knaagdieren en menselijke bronnen, wat een groot vertaalpotentieel aantoont. Het eindproduct van dit protocol is een beige thermogeen vetweefsel met een structuur en metabole functie vergelijkbaar met bruin vetweefsel. Over het algemeen presenteert dit protocol het idee dat een gemakkelijk toegankelijke en mogelijk autologe bron MVF een waardevolle therapeutische interventie en hulpmiddel kan zijn voor het bestuderen van metabole stoornissen.

<table><tbody><tr><td>Aminocaproic Acid</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A2504-100G</td><td>Toegevoegd in DMEM bij de concentratie van 1 mg/mL</td></tr><tr><td>Blunt-Tipped Scissors</td><td>Fisher scientific</td><td>12-000-172</td><td>Sterilisatie in autoclaaf</td></tr><tr><td>Bovin Serum Albumin (BSA)</td><td>Millipore</td><td>126575-10GM</td><td>Verdund in PBS tot 4 mg/mL en 1 mg/mL</td></tr><tr><td>Collagenase Type 1</td><td>Fisher scientific</td><td>NC9633623</td><td>Verdund tot 6 mg/mL in BSA 4 mg/mL, Digestie van gehakte vet</td></tr><tr><td>Dexamethason</td><td>Thermo Scientific</td><td>AC230302500</td><td>Verdund in ethanol tot een 2 mg/ml stamconcentratie</td></tr><tr><td>Disposable onderlagen</td><td>Fisher scientific</td><td>23-666-062</td><td>Voor vloeistofabsorptie tijdens chirurgie</td></tr><tr><td>Dissectie schaar</td><td>Fisher scientific</td><td>08-951-5</td><td>Sterilisatie in autoclaaf</td></tr><tr><td>Dulbecco&prime;s Modified Eagle&prime;s Medium (DMEM)</td><td>Fisher scientific</td><td>11885092</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco&prime;s Modified Eagle&prime;s Medium/Nutrient Mixture F-12 Ham (DMEM/F12)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D8062</td><td></td></tr><tr><td>Fetaal bovien serum&nbsp;</td><td>Fisher scientific</td><td>16140089</td><td>Toegevoegd in DMEM tot 20% v/v.</td></tr><tr><td>Fibrinogeen&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>F8630-25G</td><td>Gelooid in DMEM bij de concentratie van 20 mg/mL, Eiwit gevonden in bloedplasma en hoofdcomponent van hydrogel</td></tr><tr><td>Flacon, 250 mL</td><td>Fisher scientific</td><td>FB500250</td><td>Maakt digestie van vet mogelijk met een groot oppervlak</td></tr><tr><td>Pincet</td><td>Fisher scientific</td><td>50-264-21</td><td>Sterilisatie in autoclaaf, Voor het hanteren van weefsel en filters</td></tr><tr><td>Forskolin</td><td>Sigma Aldrich</td><td>F6886</td><td>Verdund in ethanol tot een 10 mM stamconcentratie</td></tr><tr><td>Human MVF</td><td>Advanced Solutions Life Scienes, LLC</td><td>https://www.advancedsolutions.com/microvessels</td><td>Human MVFs (hMVFs) geïsoleerd van drie verschillende patiënten (52-, 54- en 56-jarige vrouwen) werden gebruikt in het huidige onderzoek.&nbsp;</td></tr><tr><td>Indomethacine&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>I7378</td><td>Verdund in ethanol tot een 12.5 mM stamconcentratie</td></tr><tr><td>Insulin van varkens pancreas</td><td>Sigma Aldrich</td><td>I5523</td><td>Verdund in 0.01 N HCl tot een 5 mg/ml stamconcentratie</td></tr><tr><td>MycoZap</td><td>Fisher scientific</td><td>NC9023832</td><td>Toegevoegd in DMEM tot 0.2% w/v, Mycoplasma Profylactisch&nbsp;</td></tr><tr><td>Pennycilin/Streptomycine (10.000 U/mL)</td><td>Fisher scientific</td><td>15140122</td><td>Toegevoegd in DMEM tot 1% v/v.</td></tr><tr><td>Petrischalen, polystyreen (100 mm x 15 mm).</td><td>Fisher scientific</td><td>351029</td><td>3 voor verwijdering van bloedvaten en gehakt, 8 (deksel) voor het voorweeksen van schermen &amp; 8 (schaal) voor gebruik bij het filteren met 500 of 37 &micro;M schermen</td></tr><tr><td>Petrischalen, polystyreen (35 mm x 10 mm).</td><td>Fisher scientific</td><td>50-202-036</td><td>Voor het tellen van fragmenten</td></tr><tr><td>Fosfaatbufferoplossing (PBS)</td><td>Fisher scientific</td><td>14-190-250</td><td>Verdund tot 1x met steriele gedeïoniseerd water.</td></tr><tr><td>Rattenschaartjes (Andwin Mini Arco Pet Trimmer)</td><td>Fisher scientific</td><td>NC0854141</td><td></td></tr><tr><td>Rosiglitazone</td><td>Fisher scientific</td><td>R0106200MG</td><td>Verdund in DMSO tot een 10 mM stamconcentratie</td></tr><tr><td>Schaar</td><td>Fine Science Tools</td><td>14059-11</td><td>1 voor initiële incisie, 1 voor epididymale incisie, 1 voor het klikken van de punt</td></tr><tr><td>Scherm&nbsp; 37 &micro;M&nbsp;</td><td>Carolina Biological Supply Company</td><td>652222R</td><td>Gesneden in 3" afgeronde vierkanten en gesteriliseerd in ethyleenoxide, Fragmentopsluiting en verwijdering van zeer kleine fragmenten/enkele cellen en puin</td></tr><tr><td>Scherm 500 &micro;M&nbsp;</td><td>Carolina Biological Supply Company</td><td>652222F</td><td>Gesneden in 3" afgeronde vierkanten en gesteriliseerd in ethyleenoxide, Verwijdert grotere fragmenten/puin</td></tr><tr><td>Gekartelde hemostaat</td><td>Fisher scientific</td><td>12-000-171</td><td>Sterilisatie in autoclaaf, Voor het klemmen van de huid vóór incisie</td></tr><tr><td>Steriflip Filter 0.22 &mu;m&nbsp;</td><td>Millipore</td><td>SE1M179M6</td><td></td></tr><tr><td>Trombizine</td><td>Fisher scientific</td><td>6051601KU</td><td>Verdund in gedeioniseerd water tot 10 U/mL, Gebruikt als stollingsagent om fibrinogeen om te zetten in fibrine</td></tr><tr><td>Schildklierhormoon (T3)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T2877</td><td>Verdund in 1N NaOH tot een 0.02 mM stamconcentratie</td></tr><tr><td>Zucker diabetic fatty (ZDF) ratten - zwaarlijvig (FA/FA) of mager (FA/+) mannelijk&nbsp;</td><td>Charles River</td><td>https://www.criver.com/products-services/find-model/zdf-rat-lean-fa?region=3611 https://www.criver.com/products-services/find-model/zdf-rat-obese?region=3611</td><td>Verkregen van Charles River (Wilmington, MA). Ratten werden verkregen op 4 weken oud en gevoerd met Purina 5008 tot euthanasie (15-19 weken oud). Glucosewaarden (bloed uit de laterale safene ader) waren hoger dan 300 mg/dL bij alle FA/FA ratten die in het onderzoek werden gebruikt. Alle dieren werden gehuisvest in een temperatuurgecontroleerde omgeving met een 12-uurs licht-donkercyclus en ad libitum gevoerd.</td></tr></tbody></table>

driedimensionale kweek van gevasculariseerd thermogeen vetweefsel uit microvasculaire fragmenten

Three-Dimensional Culture of Vascularized Thermogenic Adipose Tissue from Microvascular Fragments

Engineering thermogeen vetweefsel (bijv. Beige of bruine vetweefsels) is onderzocht als een potentiële therapie voor metabole ziekten of voor het ontwerp van gepersonaliseerde microtissues voor gezondheidsscreening en medicijntests. De huidige strategieën zijn vaak vrij complex en slagen er niet in om de meercellige en functionele eigenschappen van thermogeen vetweefsel volledig weer te geven. Microvasculaire fragmenten, kleine intacte microvessels bestaande uit arteriol, venulen en haarvaten geïsoleerd uit vetweefsel, dienen als een enkele autologe bron van cellen die vascularisatie en vetweefselvorming mogelijk maken. Dit artikel beschrijft methoden voor het optimaliseren van kweekomstandigheden om het genereren van driedimensionale, gevasculariseerde en functionele thermogene vetweefsels uit microvasculaire fragmenten mogelijk te maken, inclusief protocollen voor het isoleren van microvasculaire fragmenten uit vetweefsel en kweekomstandigheden. Daarnaast worden best practices besproken, evenals technieken voor het karakteriseren van de gemanipuleerde weefsels, en monsterresultaten van zowel knaagdier als menselijke microvasculaire fragmenten worden verstrekt. Deze aanpak heeft het potentieel om te worden gebruikt voor het begrijpen en ontwikkelen van behandelingen voor obesitas en metabole ziekten.

Er zijn een paar belangrijke fenotypische morfologische kenmerken van beige / bruin vetweefsel: het is multiloculair / bevat kleine lipidedruppeltjes, bezit een groot aantal mitochondriën (de reden voor zijn karakteristieke "bruinachtige" uiterlijk in vivo), heeft dienovereenkomstig een hoog zuurstofverbruik / mitochondriale bio-energetica, is sterk gevasculariseerd, heeft een verhoogde lipolyse / insuline-gestimuleerde glucose-opname, en, het meest berucht, drukt hoge niveaus van ontkoppelingseiwit 1 (UCP1) ui...

Hier presenteren we een gedetailleerd protocol dat het gebruik van microvasculaire fragmenten geïsoleerd uit knaagdier- of menselijk vetweefsel schetst als een eenvoudige benadering om functioneel, gevasculariseerd beige vetweefsel te engineeren.

Driedimensionale kweek van gevasculariseerd thermogeen vetweefsel uit microvasculaire fragmenten

Engineering thermogenic adipose tissue (e.g., beige or brown adipose tissues) has been investigated as a potential therapy for metabolic diseases or for ...

Dit protocol beschrijft de generatie van driedimensionaal gevasculariseerd en functioneel thermogeen vet uit microvasculaire fragmenten, of MVF's. De huidige strategieën voor het ontwerpen van thermogeen vetweefsel zijn complex en geven de meercellige en functionele eigenschappen ervan niet volledig weer. MVF's zijn een enkele bron van cellen die vascularisatie en vetweefselvorming mogelijk maken.Omdat het een eenvoudige methode met één bron is om biologische imitaties van beige vet te creëren, hebben MVF's een aanzienlijk potentieel voor het bevorderen van het begrip of de ontwikkeling van behandelingen voor obesitas en metabole ziekten. Plaats het op de juiste manier geschoren en geëuthanaseerde dier behandeld met 70% ethanol in een liggende positie en begin met het isoleren van het liesvet. Til de huid onder de penis op met een schaar en voer de incisie uit, beginnend in het midden en zijdelings snijdend, een V-vorm vormend, voordat u naar de achterkant van het dier loopt om toegang te krijgen tot de volledige vetafzetting.Zorg tijdens het snijden voor de scheiding van de huid van het vet door het onderling verbonden fasciaweefsel te snijden. Zodra de fascia op de juiste manier is gesneden, moet u ervoor zorgen dat het liesvet van beide zijden, dat zich uitstrekt van de lies naar de achterkant, zichtbaar is. Verwijder vervolgens het vet van de twee zijden in afzonderlijke conische buizen met 10 milliliter BSA in PBS, met een concentratie van één milligram per milliliter.Om het epididymale vet te oogsten, snijdt u door de buikhuid, gevolgd door voorzichtig door de dunne laag rond de testikels te snijden. Trek voorzichtig aan het vetweefsel met een tang en knip het uit met een schaar, terwijl u de dissectie van belangrijke zichtbare bloedvaten vermijdt. Plaats nu het verwijderde vet in een conische buis van 50 milliliter met 10 milliliter van één milligram per milliliter BSA in PBS.Om het achterste onderhuidse vet te isoleren, draait u de rat gevoelig en gebruikt u een grote schaar om de dikke huid van de rug helemaal tot aan de hoofdhuid te knippen, waarbij u ervoor zorgt dat u niet te diep onder de huid snijdt. Snijd de fascia die de huid met het weefsel verbindt. Onderscheid het onderhuidse vet, gelegen in het intrascapulaire gebied, van het bruine vet dat zich dichter bij de wervelkolom bevindt voordat u het onderhuidse vet isoleert en in een 50 milliliter conische buis plaatst met 10 milliliter van één milligram per milliliter BSA in PBS.Gebruik tijdens het werken in een biohood een tang om het weggesneden vet in een standaard petrischaal van 100 milliliter te plaatsen met 0,5 milliliter van één milligram per milliliter BSA in PBS. Verwijder alle zichtbare bloedvaten, spieren of vreemd weefsel uit het vet. Gebruik een schaar, hak het vet gedurende 10 minuten fijn en controleer op knobbels door wat meer BSA toe te voegen.Ga door met hakken, indien nodig, voordat u de gehakte vetsuspensie overbrengt naar een steriele kolf van 250 milliliter met een pipet van 10 milliliter. Maak het volume in de kolf tot 20 milliliter door voldoende BSA in PBS toe te voegen. Voeg nu BSA in PBS toe aan collagenase en homogeniseer de oplossing door deze voorzichtig te schudden voordat u deze steriel filtert door een nylon netfilter van 0,22 micron.Voeg onmiddellijk de vereiste hoeveelheid collagenase-oplossing toe aan de gehakte vetsuspensie en verteer het vet door de kolf in een cirkelvormige beweging in een waterbad van 37 graden Celsius gedurende de juiste tijd te schudden. Breng het verteerde vet over in een 50 milliliter conische buis met het label verteerd vet of gehakt vet. Centrifugeer de buis gedurende vier minuten op 400 G om de microvasculaire fragmenten, of MVF's, in een rode pellet te laten draaien.Decanteer het supernatant voorzichtig in een 50 milliliter conische buis met het label afval zonder de pellet te verstoren. Voeg vervolgens 10 milliliter van één milligram per milliliter BSA in PBS toe aan de buis met de pellet en meng de pelletsuspensie door deze twee keer voorzichtig op en neer te pipetteren zonder de fragmenten te verstoren. Neem nu het scherm van 500 micron dat vooraf is gedrenkt in een steriele petrischaal met vijf milliliter van één milligram per milliliter BSA in PBS en plaats het over de plastic schermhouder die op een nieuwe petrischaal wordt bewaard.Pipetteer 10 milliliter suspensie uit de verteerde pelletbuis in concentrische cirkels op het scherm. Was het filter met nog eens vijf milliliter van één milligram per milliliter BSA in PBS en gooi het weg, terwijl het filtraat in de petrischaal blijft. Plaats vervolgens het voorgeweekte scherm van 37 micron boven de plastic schermhouder op een nieuwe petrischaal.Breng met een verse pipet het filtraat van de eerste filtratie in concentrische cirkels over op het scherm. Zoals eerder beschreven, was het scherm met BSA in PBS en gooi het filter deze keer weg met behoud van het scherm van 37 micron. Schuif het scherm van 37 micron in een nieuwe petrischaal met vijf milliliter van één milligram per milliliter BSA in PBS.Maak de fragmenten los door de schaal zachtjes tegen een conische houder te tikken, zonder vloeistof te morsen. Spoel het filter af met nog eens vijf milliliter van de BSA in PBS. Breng vervolgens de vloeistof uit de petrischaal over in een steriele conische buis van 50 milliliter.Spoel het scherm van 37 micron nog een paar keer af en voeg de was toe aan de conische buis totdat het totale verzamelde volume 15 tot 20 milliliter is. Gooi het scherm na de laatste spoeling weg. Knip het uiteinde van een pipetpunt van 20 microliter met een schaar.Schud de buis met de vloeistof voorzichtig voordat u twee aliquots van 20 microliter trekt met behulp van de gesneden pipetpunt en pipetteer elk van de aliquots in een schone petrischaal van 35 millimeter. Tel het aantal fragmenten in het monster in elke petrischaal met behulp van een standaard lichtmicroscoop en verkrijg met behulp van de formule die in het manuscript wordt vermeld het totale aantal geïsoleerde microvasculaire fragmenten. Draai de resterende vloeistof in de conische buis van 50 milliliter op 400 G gedurende vier minuten om de MVF te verzamelen.Decanteer na het draaien het grootste deel van het supernatant uit de conische buis en gebruik een pipet om het kleine volume vloeistof dat op de rand van de buis achterblijft te verwijderen. Voeg vervolgens trombine toe aan de putten die zijn bestemd voor het gieten van gels. Snijd het uiteinde van een pipetpunt van 200 microliter en gebruik deze voorzichtig in fibrinogeen om de gewenste einddichtheid te verkrijgen.Pipetteer de suspensie in de trombineoplossing in de put en homogeniseer het mengsel snel door op en neer te pipetteren. Zodra alle gels zijn gegoten, plaatst u de putplaat in een incubator bij 37 graden Celsius en 5% koolstofdioxide gedurende ongeveer 15 minuten om gel-crosslinking mogelijk te maken. De lipiden en de gedifferentieerde adipocyten werden waargenomen door confocale microscopie beeldvorming van de hydrogels met BODIPY als de lipidekleuring.Het kweken van niet-gevasculariseerd vetweefsel met behulp van witte adipogene of beige adipogene media resulteerde in de vorming van niet-gevasculariseerd wit of beige vetweefsel, respectievelijk, van zowel mager als diabetisch knaagdier-afgeleide MVF's. Evenzo resulteerde het kweken van gevasculariseerd vetweefsel met behulp van witte adipogene of beige adipogene media in de vorming van gevasculariseerd wit of beige vetweefsel, respectievelijk, van de knaagdier-afgeleide MVF's. Niet-gevasculariseerd wit en beige vetweefsel verkregen uit menselijke MVF's werden ook waargenomen door confocale microscopie.Het vermogen van MVF's om te differentiëren in beige vetweefsel werd genetisch bevestigd met behulp van RT-qPCR. Magere en diabetische knaagdier-MFF's blootgesteld aan directe witte adipogene of beige adipogene media werden geëvalueerd op adipogenese, thermogenese en angiogenese. De expressie van ontkoppelingseiwit 1 was, zoals verwacht, significant hoger in beige adipogene weefsel.Een vergelijkbare trend werd waargenomen bij MVF's van knaagdieren die werden blootgesteld aan indirecte witte adipogene of beige adipogene media, evenals bij menselijke MVF's die werden blootgesteld aan directe witte adipogene of beige adipogene media. Ten slotte was het uit mitochondriale bio-energetica duidelijk dat het beige vetweefsel functioneel gezien in alle gevallen een karakteristiek hoger zuurstofverbruikspercentage of OCR-niveau had. De enzymatische vertering van het vetweefsel moet worden geoptimaliseerd om MVF's van vergelijkbare grootte en kwaliteit consistent te reproduceren.Na de spijsvertering moeten MVF's voorzichtig worden behandeld, met speciale zorg om verdere breuk van de fragmenten te voorkomen. Deze techniek hielp de balans van vaatgroei en adipocytendifferentiatie te bevorderen, waarvan bewezen is dat deze afhankelijk is van de geïntroduceerde factoren.

three-dimensional-culture-vascularized-thermogenic-adipose-tissue

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bio-engineering

Hier presenteren we een protocol voor het inkapselen van katabolische cellen, die lipiden consumeren voor warmteproductie in intra-abdominaal vetweefsel en de energiedissipatie bij obese muizen verhogen.

Inkapseling Thermogenic preadipocyten voor transplantatie in VetWeefsel Depots

Wij presenteren een protocol voor vetweefsel afgeleide microvasculaire brokken belovend vascularisatie eenheden vertegenwoordigen isoleren. Ze kunnen snel worden geïsoleerd, vereisen geen in vitro verwerking en kunnen aldus worden gebruikt voor één-stap prevascularization op verschillende gebieden van weefselengineering.

Isolatie Murine vetweefsel afgeleide microvasculaire fragmenten als Vascularisatie eenheden voor Tissue Engineering

Witte vetweefsel (WAT) heeft kritieke tekortkomingen in de huidige primaire cultuur modellen, belemmeren farmacologische ontwikkeling en metabole studies. Hier presenteren we een protocol voor de productie van een systeem van de obesitas microphysiological door klemmen WAT tussen bladen van stromale cellen. Deze constructie biedt een stabiele en flexibele platform voor primaire WAT cultuur.

Een Microphysiologic Platform voor menselijk vet: ingeklemd wit vetweefsel

Als gevolg van het hoge vetgehalte, heeft adipeus weefsel is uitdagend om te visualiseren met behulp van traditionele histologische methoden. Adipo-Clear is een weefsel clearing techniek waarmee robuuste labeling en hoge resolutie volumetrische fluorescerende beeldvorming van vetweefsel. Hier beschrijven we de methoden voor de bereiding van de monsters, voorbehandeling, kleuring, clearing en montage voor imaging.

Adipo-Clear: Een weefsel Clearing methode voor driedimensionale beeldvorming van vetweefsel

De focus van de huidige studie is om aan te tonen van de gehele-mount immunokleuring en visualisatie techniek als een ideale methode voor 3D beeldvorming van vetweefsel architectuur en cellulaire component.

Visualisatie van 3D witte adipeus weefsel structuur met behulp van geheel-mount kleuring

Hier presenteren we menselijke vetweefsel enzym-vrije micro-fragmentatie met behulp van een gesloten systeem apparaat. Deze nieuwe methode maakt het verkrijgen van sub-millimeter clusters van vetweefsel geschikt voor in vivo transplantatie, in vitro cultuur, en verdere celisolatie en karakterisering.

Menselijke vetweefsel micro-fragmentatie voor Celfenotyping en Secretome karakterisatie

We beschrijven een 3D menselijke extracellulaire matrix-adipocyte in vitro cultuur systeem dat het mogelijk maakt dissectie van de rollen van de matrix en adipocytes in bij te dragen tot vetweefsel metabole fenotype.

Een menselijke 3D-extracellulaire matrix-Adipocyte cultuur model voor het bestuderen van matrix-cel metabole Overspraak

Hier beschrijven we een eenvoudige, goedkope en snelle clearing methode om de 3D-structuur van zowel muis- als menselijk wit vetweefsel op te lossen met behulp van een combinatie van markers om vasculatuur, kernen, immuuncellen, neuronen en lipidedruppelcoateiwitten te visualiseren door fluorescerende beeldvorming.

Het verkennen van vetweefselstructuur door methylsalicylaatcle clearing en 3D-beeldvorming

Hier beschrijven we de isolatie, kweek en adipogene inductie van stromale vasculaire fractie-afgeleide preadipocyten uit periaorta-vetweefsel van muizen, waardoor de perivasculaire vetweefselfunctie en de relatie met vasculaire cellen kunnen worden bestudeerd.

Isolatie, kweek en adipogene inductie van van stromale vasculaire fractie afgeleide preadipocyten uit periiaorta-vetweefsel van muizen

Hier beschrijven we een protocol voor het isoleren, kweken en fenotyperen van microvasculaire endotheelcellen uit menselijk onderhuids vetweefsel (hSATMVEC's). Daarnaast beschrijven we een experimenteel model van hSATMVEC-adipocyte overspraak.

Bestudering van overspraak van vet-endotheelcellen en adipocyten in menselijk onderhuids vetweefsel

Leer driedimensionale kweek van gevasculariseerd thermogeen vetweefsel uit microvasculaire fragmenten. Deze methode biedt een eenvoudige aanpak voor onderzoek naar obesitas en metabole ziekten.

Driedimensionale kweek van gevasculariseerd thermogeen vetweefsel uit microvasculaire fragmenten

Meer video's verkennen