Name: Vaststelling van een coloproctitis-kankermodel bij muizen en evaluatie van het therapeutisch effect van de Chinese geneeskunde (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-10-13T12:50:00.000+00:00
Duration: 6 min 24 s
Description: Leer hoe een muismodel voor coloproctitiskanker wordt opgezet en de effectiviteit van traditionele Chinese geneeskunde, met name Liujunzi-decoctie, wordt geëvalueerd. Deze methode helpt onderzoekers kankerpreventie te bestuderen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door het Jilin Provincial Department of Science and Technology (YDZJ202201ZYTS181).

De dierproef is goedgekeurd door de Ethische Commissie van de Changchun University of Chinese Medicine (Recordnummer: 2021214). Specifieke pathogeenvrije C57BL/6J-muizen (8-10 weken, gewicht 18-22 g), mannetjes en vrouwtjes, werden gehuisvest in onafhankelijk geventileerde kooien bij 22 °C en een relatieve luchtvochtigheid van 65%. De muizen begonnen het experiment na 7 dagen adaptief eten, waarbij ze vrije toegang hadden tot water en voeding.
1. Bereiding van geneesmiddelen
<ol><li>Voorbereiding van LJZD OPMERKING: Het gebruikte Chinese medicijn is gekocht bij het Affiliated Hospital van de Changchun University of Chinese Medicine en werd geïdentificeerd als echt Chinees medicijn (zie tabel 1).<ol><li>Doe Dangshen (12 g), Baizhu (12 g), Gancao (6 g), Chenpi (12 g), Jiangbanxia (9 g) in een speciale keramische pot (zie Tabel met materialen). Voeg 1000 ml gedestilleerd water toe en laat het 1 uur weken bij kamertemperatuur (zie figuur 1A).</li>
		<li>Poeder 12 g Vullen tot fijn poeder met een molen en 1 uur weken in 300 ml gedestilleerd water in een andere container bij kamertemperatuur.</li>
		<li>Meng het bovenstaande Chinese medicijn in de gespecialiseerde keramische pot. Kook het mengsel en laat het vervolgens op middelhoog vuur staan tot er nog maar 300 ml afkooksel overblijft. Gebruik medisch gaas om te filteren en bewaar het filtraat bij kamertemperatuur.</li>
		<li>Voeg 1000 ml gedestilleerd water toe en herhaal het bovenstaande afkooksel nog een keer. Filter opnieuw met medisch gaas. Combineer het filtraat en kook het tot er nog maar 150 ml over is.</li>
		<li>Centrifugeer de geconcentreerde vloeistof op 10.000 x g gedurende 5 minuten en concentreer het verkregen supernatans verder tot 30 ml op middelhoog vuur. Breng het laatste concentraat over in een schaal en droog het met een elektrische droogoven tot alleen de opgeloste stof als poeder overblijft.</li>
		<li>Weeg de bovenstaande vaste stof af en los deze op in steriel gedestilleerd water om een oplossing te verkrijgen die 22,85 mg geneesmiddel per 0,2 ml (114,16 mg/ml) bevat, wat de dagelijkse dosering van muizen is.</li>
	</ol></li>
	<li>Bereiding van 5-aminosalicylzuur OPMERKING: 5-aminosalicylzuur (5-ASA; zie materiaaltabel) heeft een goed preventief effect op UC-CRC en werd in deze studie als positief medicijn gebruikt23.<ol><li>Los 64 mg 5-ASA-poeder op in 200 ml steriel gedestilleerd water om 1,82 mg/ml 5-ASA-oplossing te verkrijgen. De dagelijkse dosering voor een enkele muis was 0,2 ml.</li>
	</ol></li>
	<li>Bereiding van AOM-injectieoplossing<ol><li>Voeg 2,5 ml steriel gedestilleerd water toe aan 25 mg AOM-poeder (zie Materiaaltabel) en meng met een vortexmixer (zie Materiaaltabel) tot 10 mg/ml AOM-bouillonoplossing, bewaar bij -20 °C tot gebruik.</li>
		<li>Bereid de AOM-injectieoplossing door de AOM-voorraadoplossing te verdunnen met steriel gedestilleerd water van 10:1 (1 mg/ml).</li>
	</ol></li>
</ol>2. Invoering van het UC-CRC-model
OPMERKING: Het experiment was verdeeld in 4 groepen: controlegroep, modelgroep, LJZD en 5-ASA-groep, 10 muizen in elke groep. Met uitzondering van de controlegroep werden de andere groepen behandeld met AOM en DSS.
<ol><li>Intraperitoneale injectie van AOM-injectieoplossing OPMERKING: Na adaptieve voeding gedurende 7 dagen kregen muizen AOM-injectieoplossing (1 mg/ml) via intraperitoneale injectie (zie figuur 1B).<ol><li>Houd de muis met zijn buik omhoog en de kop iets naar beneden. Pak de huid van de achterkant vast om de buikhuid strakker te maken en prik de huid ongeveer 1 cm rechts van het snijpunt van de wortellijn van beide dijen op de middenbuiklijn met een spuit van 1 ml (zie Materiaaltabel).</li>
		<li>Duw de naald van de spuit van 1 ml tot een afstand van 3-5 mm onder de huid, houd deze evenwijdig aan de middellijn van de buik en steek de naald 0,3-0,5 mm in de buikholte onder een hoek van 45°.</li>
		<li>Nadat de punt door de buikspier is gegaan, voelt de operator een plotseling weerstandsverlies. Trek vervolgens de spuit naar buiten en naar achteren om te zien of er vloeistoflekkage optreedt. Als dit niet het geval is, duw dan de AOM-injectieoplossing langzaam in de muizen met een snelheid van 0,1 ml/10 g.</li>
	</ol></li>
	<li>Cyclische stimulatie van 2% DSS-oplossing OPMERKING: Elke AOM-geïnduceerde muis kreeg 500 ml DSS-oplossing in week 3, 6 en 9, en de muizen dronken vrijelijk gedurende deze periode.<ol><li>Bereid 2% DSS-oplossing door 500 ml steriel gedestilleerd water toe te voegen aan 10 g DSS (zie materiaaltabel). Meng met een vortexmixer en bewaar bij 4 °C tot gebruik.</li>
		<li>Elke AOM-geïnduceerde muis drinkt 500 ml 2% DSS-oplossing vrijelijk gedurende 7 dagen in week 3, 6 en 9 na AOM-inductie.</li>
	</ol></li>
</ol>3. Medicamenteuze behandeling
OPMERKING: Volwassen mensen hebben 63 g LJZD per dag nodig. Volgens de omrekeningsformule van de experimentele dosis van muizen en menselijke geneesmiddelen, equivalente experimentele dosis voor muizen (mg/kg) = menselijke dosis (mg/kg)/lichaamsgewicht (60 kg) x 9,1, was de dagelijkse dosis van muizen ongeveer 9,6 g/kg.
<ol><li>Behandel de LJZD- en 5-ASA-groep met 0,1 ml/10 g van de bereide LJZD- en 5-ASA-oplossing via een maagsonde in respectievelijk week 7 en week 15.<ol><li>Voer voor intragastrische toediening bij muizen de volgende procedure uit. Houd de muis in de linkerhand en houd in de rechterhand het maagperfusieapparaat vast. Steek de naald van de spuit in de mond en schuif deze langs de achterwand van de keelholte van de muizen naar beneden. Glijd langs de keelholte naar beneden terwijl de muizen slikken en blijf vooruit gaan. Wanneer er een gevoel van weerstand was en de spuit in de keelholte kon worden geduwd, trekt u de naald eruit en voltooit u de injectie.</li>
	</ol></li>
	<li>Behandel de controle- en modelgroep met dezelfde hoeveelheid zoutoplossing (zie Materiaaltabel).</li>
	<li>Behandel de muizen in elke groep eenmaal per dag op hetzelfde tijdstip tijdens de toedieningsperiode met het juiste medicijn.</li>
</ol>4. Evaluatie van het UC-CRC-model en de werkzaamheid van LJZD
<ol><li>Indexscore ziekteactiviteit OPMERKING: Volgens tabel 2 werd de score van de ziekteactiviteitsindex (DAI) geëvalueerd door gewichtsverlies, fecale viscositeit en ontlastingsbloeding van de muizen te combineren.<ol><li>Noteer dagelijks het gewicht van de muizen vanaf het begin van adaptieve voeding tot het einde van de medicamenteuze behandeling.</li>
		<li>Observeer zorgvuldig de fecale consistentie van elke experimentele muis en noteer de stoelgang als een van de drie aandoeningen: normale, dunne ontlasting en waterige diarree.</li>
		<li>Noteer de fecale bloeding van proefdieren als een van de drie aandoeningen: geen bloeding, weinig bloeding en zichtbaar bloed in de ontlasting.</li>
	</ol></li>
	<li>Detectie van IL-6-niveau in serum<ol><li>Behandel muizen met LJZD of 5-ASA gedurende 9 weken. Fixeer de muizen door met de linkerhand de nekhuid van de muis vast te pakken en zachtjes op de experimentele tafel te drukken om de laterale decubituspositie in te nemen. Knip de snorharen van de muizen af met een schaar. Knip de snorharen van de muizen voorzichtig af met een schaar (zie Materiaaltabel) om bloedbesmetting te voorkomen. OPMERKING: Muizen die niet vrij konden wiebelen, werden geacht correct te zijn gefixeerd. Als dit niet gebeurt, moeten de muizen worden gerepareerd.</li>
		<li>Verdoof de muis door inademing van 2% isofluraan. Steriliseer de huid rond de oogbol met ethanol (zie Tabel met materialen). Druk zachtjes op de ooghuid aan de zijkant om de oogbol verstopt en uitpuilend te maken.</li>
		<li>Klem de oogbol vast met een elleboogpincet en verwijder de oogbollen nauwkeurig en snel. Laat het bloed in de centrifugaalbuis druppelen (zie Tabel met materialen). Tik daarbij op het hart van de muis om de bloedafname te versnellen.</li>
		<li>Bewaar het afgenomen bloed gedurende 30 minuten op kamertemperatuur en centrifugeer het gedurende 10 minuten op 3.500 x g . Verzamel het supernatans en detecteer het IL-6-niveau volgens de instructies van de IL-6-inhoudsdetectiekit (zie Materiaaltabel).</li>
	</ol></li>
	<li>Colorectaal weefsel scheiden<ol><li>Euthanaseer de muizen na bloedafname door 5% overdosis isofluraan en cervicale dislocatie in te ademen (zie materiaaltabel) in overeenstemming met de dierethiek.</li>
		<li>Houd de muizen in een cryogene anatomische omgeving. Immobiliseer de muizen in rugligging. Knip het haar van de onderbuik af met een schaar en steriliseer het met ethanol.</li>
		<li>Knijp in het snijpunt tussen de twee dijwortels en de buikmiddellijn met een ooglidtang (zie Tabel met materialen). Knip met een schaar een dwarse incisie van ongeveer 1-1,5 cm.</li>
		<li>Knip een longitudinale incisie langs de mediaanlijn van de buik vanaf het middelpunt van de transversale incisie naar de processus xiphoid.</li>
		<li>Verwijder de pericolorectale weefsels in de richting van de anus om het colorectum te scheiden van het omliggende weefsel. Pas op dat u het colorectum niet beschadigt.</li>
		<li>Duw de huid van de buik naar de zijkanten om het colorectum volledig bloot te leggen. Verwijder het colorectum uit de buikholte met een ooglidtang en snijd de segmenten van de anus tot aan de blindedarm af (uitgezonderd); De totale lengte is ongeveer 10 cm. Bewaar de verkregen colorectale weefsels in zoutoplossing bij 4 °C.</li>
	</ol></li>
	<li>Evaluatie van de lengte en het gewicht van het rectum<ol><li>Extraheer de zoutoplossing bij 4 °C met een naald van 5 ml (zie Materiaaltabel) om de binnenkant van het colorectum te spoelen. Plaats vervolgens het colorectum op absorberend papier om het vocht van het weefsel te absorberen.</li>
		<li>Weeg de colorectale weefsels en plaats ze vervolgens op A4-papier om hun lengte te meten.</li>
	</ol></li>
	<li>Meet het aantal tumoren in het colorectum<ol><li>Snijd het colorectum in de lengte door om het volledig te ontvouwen en observeer het aantal en de grootte van de tumoren in het colorectum.</li>
	</ol></li>
	<li>Pathologische analyse van het colorectum<ol><li>Fixeer het colorectum gedurende 24 uur in 4% paraformaldehyde. Veranker het gefixeerde rectale weefsel in gesmolten paraffine en doorsnede continu met een dikte van 5 μm door een weefselbevriezingsmicrotoom.</li>
		<li>Volgens de procedure van Hou et al.24 de secties in xyleen ontwaxen en vervolgens dehydrateren met seriële concentraties ethanol. Na 5 minuten kleuring met hematoxyline-oplossing, spoelt u de secties af met zuiver water. Kleurs daarna gedurende 1 minuut met 0,5% eosine-oplossing (zie Materiaaltabel).</li>
		<li>Voer opnieuw gradiëntuitdroging en xyleentransparante behandeling uit. Sluit de secties af en observeer ze onder de optische microscoop (zie Tabel met materialen) en foto, zoals beschreven door Xie et al.25.</li>
	</ol></li>
	<li>Immunohistochemische analyse van colorectum<ol><li>Dewax en dehydrateer de secties volgens de bovenstaande methode. Repareer het antigeen in de secties met een hogedruk thermische reparatietechniek, zoals beschreven door Gok et al.26.</li>
		<li>Week de secties gedurende 15 minuten in endogene peroxidaseblokkers bij kamertemperatuur. Sluit de secties af met geitenserum (zie Materiaaltabel).</li>
		<li>Voeg het primaire antilichaam ZO-1 (1:1000), Occludine (1:1000) en KI67 (1:500; zie Materiaaltabel) toe aan de secties en incubeer een nacht bij 4 °C. Spoel de secties af met PBS-buffer (zie Materiaaltabel), voeg er secundair antilichaam voor algemeen gebruik (1:5000; zie Materiaaltabel) aan toe en incubeer bij 37 °C gedurende 30 min.</li>
		<li>Voeg de DAB-oplossing (zie Materiaaltabel) toe aan de secties voor kleurontwikkeling. Bestkleur de secties met hematoxyline-oplossing.</li>
		<li>Dehydrateer, transparantiseer en sluit de secties opnieuw af. Observeer de expressie van eiwit door de optische microscoop.</li>
	</ol></li>
</ol>

Liujunzi Afkooksel: een effectieve behandeling voor UC-CRC-preventie

De auteurs hebben niets te onthullen.

CRC is een van de meest voorkomende vormen van kanker ter wereld, met ongeveer 1.148.000 nieuwe gevallen en meer dan 576.000 sterfgevallen per jaar. CRC kan worden onderverdeeld in drie typen op basis van verschillende oorzaken, waaronder erfelijk, sporadisch en UC-CRC31. De incidentie van CRC bij patiënten met inflammatoire darmziekten zoals CU is significant hoger dan die in de algemene bevolking. CU stimuleert de ontwikkeling van CRC via de ontstekingskankerroute, die verschilt van de typische ...

Colorectale kanker (CRC) is een veel voorkomende gastro-intestinale maligniteit, de derde meest voorkomende maligniteit en de op één na meest voorkomende doodsoorzaak ter wereld, goed voor 10% van de wereldwijde kankerincidentie en 9.4% van de totale kankergerelateerde sterfte 1,2. Genetische factoren, chronische ontstekingen, vetrijke voeding, diabetes en abnormale darmflora zijn risicofactoren voor CRC 3,4. Onder hen is inflammatoire darmziekte, met name ulceratieve coloproctitis (CU), een duidelijke risicofactor voor CRC 5,6. UC-geassocieerde CRC (UC-CRC) is een overgangsproces van ontsteking, atypische hyperplasie en kanker op basis van chronische ontsteking van het colorectum, die verschilt van het typische adenoom-adenocarcinoomontwikkelingsmodel van CRC 7,8. Vergeleken met de algemene bevolking is het risico op CRC ongeveer 10-40 keer hoger bij patiënten met inflammatoiredarmaandoeningen9.
Momenteel is chirurgie nog steeds de standaardbehandeling voor CRC, en afhankelijk van de locatie en het stadium van de tumor zijn bestralingstherapie, systemische medicamenteuze therapie of een combinatie van beidemogelijk10. Hoewel deze traditionele behandelingsmodaliteiten grote vooruitgang hebben geboekt, is de prognose vanwege de hoge heterogeniteit en het recidiefpercentage van CRC slecht en is het behandelingseffect niet ideaal11,12. Daarom zijn vroege opsporing, vroege diagnose en uitgebreide behandeling de sleutel tot het verbeteren van de overlevingskans van CRC-patiënten, en het is vooral belangrijk om aandacht te besteden aan de transformatie van CU naar CRC. In de loop der jaren heeft de traditionele Chinese geneeskunde (TCM) veel aandacht getrokken bij de behandeling van UC-CRC of chronische gastritis vanwege de beperkte bijwerkingen en aanzienlijke werkzaamheid. Op basis van dialectische behandeling hebben beroemde beoefenaars van de Chinese geneeskunde van verschillende generaties een groot aantal klassieke recepten gemaakt, zoals Huangqi Jianzhong afkooksel13, Sijunzi afkooksel14 en Sishen pil15.
Liujunzi afkooksel (LJZD) is ontstaan uit de werken van Yi Xue Zheng Zhuan, samengesteld in de Ming-dynastie en is een klassiek recept in TCM16. Zoals te zien is in tabel 1, bestaat LJZD uit zes traditionele kruiden, waaronder Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf. (Dangshen), Poria cocos (Schw.) Wolf (Fuling), Atractylodes macrocephala Koidz. (Baizhu), Glycyrrhiza uralensis Fisch. (Gancao), Citrus reticulata Blanco (Chenpi) en Pinellia ternata (Thunb.) Breit (Banxia), dat het effect heeft van het aanvullen van qi en het versterken van de milt, het drogen van vocht en het oplossen van slijm. In de moderne klinische praktijk wordt het vaak gebruikt voor de behandeling van chronische gastritis, maagzweren en zweren in de twaalfvingerige darm. Modern farmacologisch onderzoek heeft aangetoond dat LJZD en gemodificeerde LJZD een hoge toepassingswaarde hebben bij de adjuvante behandeling van CU en kanker van het spijsverteringskanaal 17,18,19.
Op dit moment zijn er veel manieren om UC-CRC-muismodellen te construeren, maar het door azoxymethaan (AOM)/dextraansulfaatnatrium (DSS) geïnduceerde muismodel is het meest gebruikte UC-CRC-model; de klinische symptomen, morfologische en pathologische observaties hebben aangetoond dat het model sterk lijkt op menselijke UC-CRC20,21. Het basisprincipe is om eerst carcinogenese te induceren met chemisch carcinogeen AOM en vervolgens muizen continu bloot te stellen aan de inflammatoire stimulatieomgeving van DSS om de continue schade en reparatie van het darmslijmvliesepitheel te simuleren, waardoor een UC-CRC-muismodel wordt geconstrueerd22. Het doel van deze studie is om een muismodel van UC-CRC op te stellen door intraperitoneale injectie van AOM en cyclische stimulatie van DSS op korte termijn en om het effect van het geneesmiddel en het moleculaire mechanisme van LJZD op UC-CRC te evalueren om een wetenschappelijke basis te bieden voor de behandeling van UC-CRC.

<table><tbody><tr><td>Azoxymethane</td><td>Sigma</td><td>A5486</td><td></td></tr><tr><td>5-amino salicylic acid</td><td>Kuihua Pharmaceuticals Group Jiamusi Luling Pharmaceutical Co., Ltd</td><td>3819413</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6J muizen</td><td>Liaoning Changsheng Biotechnology Co., Ltd</td><td>NO 210726210100853716</td><td></td></tr><tr><td>Dekglas</td><td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd</td><td>10212432C</td><td></td></tr><tr><td>DAB-kleurinkit</td><td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd</td><td>2005289</td><td></td></tr><tr><td>Ontwateringsmachine </td><td>Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd</td><td>JJ-12J</td><td></td></tr><tr><td>Dextransulfaat natrium</td><td>Dalian Meilun Biotechnology Co., Ltd</td><td>MB5535</td><td></td></tr><tr><td>Inbeddingsmachine</td><td>Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd</td><td>JB-P5</td><td></td></tr><tr><td>Hematoxyline-eosine kleurstof</td><td>Wuhan Hundred Degree Biotechnology Co., Ltd</td><td>B1000</td><td></td></tr><tr><td>IL-6</td><td>Jiangsu Meimian Industrial Co., Ltd</td><td>MM-0163M2</td><td></td></tr><tr><td>Isofluraan</td><td>RWD Life Science Co., Ltd</td><td>R510-22-10</td><td></td></tr><tr><td>KI67 primaire antistof</td><td>Google Biotechnology Inc</td><td>GB121141</td><td></td></tr><tr><td>Neutrale gom</td><td>Wuhan Hundred Degree Biotechnology Co., Ltd</td><td>10004160</td><td></td></tr><tr><td>Objectglaasje</td><td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd</td><td>10212432A</td><td></td></tr><tr><td>Occludin primaire antistof</td><td>Affnity</td><td>DF7504</td><td></td></tr><tr><td>Orthostatisch optisch microscoop</td><td>Nikon</td><td>Nikon Eclipse CI</td><td></td></tr><tr><td>Pathologische microtoom</td><td>Shanghai Leica Instrument Co., Ltd</td><td>RM2016</td><td></td></tr><tr><td>ZO-1 primaire antistof</td><td>Abcam</td><td>ab221547</td><td></td></tr></tbody></table>

vaststelling van een coloproctitis-kankermodel bij muizen en evaluatie van het therapeutisch effect van de chinese geneeskunde

Establishment of Coloproctitis Cancer Model in Mice and Evaluation of Therapeutic Effect of Chinese Medicine

Colorectale kanker (CRC) is een veel voorkomende maligniteit van het spijsverteringsstelsel en is wereldwijd de derde meest voorkomende maligniteit geworden en de tweede belangrijkste doodsoorzaak als gevolg van maligniteit. Ulceratieve coloproctitis (CU) is een precancereuze laesie en UC-geassocieerde CRC (UC-CRC) is het meest voorkomende subtype van CRC. Daarom is een redelijk UC-CRC-model de hoeksteen en garantie voor de ontwikkeling van nieuwe geneesmiddelen. Traditionele Chinese geneeskunde (TCM) wordt veel gebruikt bij de behandeling van UC-CRC vanwege de goede werkzaamheid. Als een klassiek tonicum voorschrift van TCM, is Liujunzi afkooksel (LJZD) veel gebruikt bij de behandeling van UC-CRC. In deze studie werd een UC-CRC-model opgesteld door azomethaan en dextraansulfaatnatrium te combineren, en werd de LJZD toegediend. De gegevens bevestigden dat LJZD de overgang naar kanker bij UC-CRC effectief kan remmen door gebruik te maken van het lichaamsgewicht van de muis, de colorectale lengte, pathologische en ontstekingsfactoren, de colorectale barrièrefunctie en kankermarkers. Dit protocol biedt een systeem voor het evalueren van de werkzaamheid van TCM bij de preventie en behandeling van UC-CRC.

Het afkooksel van LJZD werd bereid volgens de samenstellingsverhouding van geneesmiddelen in tabel 1 en de afkookmethode van TCM in figuur 1A. Volgens het tijdstip aangegeven in figuur 1B werden muizen op de 7edag intraperitoneaal geïnjecteerd met 1 mg/ml AOM en kregen muizen vrije toegang tot drinkwater met 2% DSS in de 3e, 6e en 9eweek. Het UC-CRC-muismodel werd met succes vastgesteld in de15e</...

Dit protocol biedt een muismodel van ulceratieve coloproctitis-geassocieerde colorectale kanker geïnduceerd door azomethaan in combinatie met dextraansulfaatnatrium. Het model werd gebruikt om de werkzaamheid van traditionele Chinese geneeswijzen bij de preventie en behandeling van colorectale kanker te evalueren.

Vaststelling van een coloproctitis-kankermodel bij muizen en evaluatie van het therapeutisch effect van de Chinese geneeskunde

Colorectal cancer (CRC) is a common malignancy of the digestive system and has become the third most common malignancy worldwide and the second leading ...

Deze studie ging over de preventie en behandeling van coloproctitiskanker met traditionele Chinese geneeskunde. We streven ernaar een muismodel voor coloproctitiskanker op te stellen en de indicatoren van de traditionele Chinese geneeskunde te evalueren. We hebben bevestigd dat het Chinese medicijn Liujunzi-afkooksel een effectieve behandeling is voor de preventie van coloproctitis kanker.In de toekomst zullen we werken aan het identificeren van gevoeligere biomarkers voor darm- en endeldarmkanker en het screenen van Liujunzi-afkooksel op therapeutische doelen.

establishment-coloproctitis-cancer-model-mice-evaluation-therapeutic

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Twee technieken kunnen worden gebruikt om dit model te stellen: injectie van een kankercel suspensie in de blindedarmkeutels muur of transplantatie van een stukje van subcutane tumor op de blindedarm. Dit model is handig voor het bestuderen van de natuurlijke progressie van colorectale kanker en testen van nieuwe therapeutische middelen tegen colorectale kanker.

Orthotope Muis Model van colorectale kanker

We tonen een protocol waarbij toediening van het genotoxisch azoxymethaan (AOM), gevolgd door drie cycli van het pro-ontstekingsmiddel dextransulfaat natrium (DSS) snel en efficiënt genereert colon tumoren in muizen met morfologische en moleculaire overeenkomsten met die van menselijke colitis geassocieerde kanker.

Modeling Colitis geassocieerde kanker met Azoxymethaan (AOM) en dextransulfaat natrium (DSS)

In de afgelopen jaren zijn nieuwe generatie endoscopen ontpopt als belangrijk diagnostisch onderzoek hulpmiddelen voor het evalueren van muizen colitis en colorectale tumoren. We presenteren hier een gedetailleerd protocol voor endoscopische beoordeling van ontsteking en colorectale tumoren in muizen, evenals een nieuw scoresysteem dat decimale identifiers gebruikt om de endoscopische ernst van colitis en colorectale tumoren documenteren.

Flexibele colonoscopie in Muizen aan de ernst van colitis en Colorectale Tumoren Evalueer behulp van een gevalideerde Endoscopische Scoring System

We beschrijven methoden voor longitudinaal bewaken van de werkzaamheid van therapieën voor de behandeling van colonische pathologieën bij muizen met behulp van een star endoscoop. Dit protocol kan gemakkelijk worden gebruikt voor de karakterisering van de therapeutische respons van een individuele tumor in levende muizen en ook voor het monitoren van mogelijke ziekterecidieven.

Niet-invasieve evaluatie van de werkzaamheid van nieuwe therapieën voor Intestinale Pathologieën gebruik van een serieel Endoscopische Imaging van levende muizen

We beschrijven de oprichting van orthotopische colorectale tumoren via injectie van tumorcellen of organoïden in de cecum van muizen en de daaropvolgende isolatie van circulerende tumorcellen (CTC's) uit dit model.

Isolatie van circulerende tumorcellen in een orthotopische muismodel van colorectale kanker

Het gepresenteerde protocol beschrijft een facile chirurgische verwijdering van de appendix (caecal patch) in een muis gevolgd door de inductie van inflammatoire darmziekte-geassocieerde colorectale kanker. Dit Murine appendectomie model maakt onderzoek mogelijk naar de biologische rol van de appendix in de pathogenese van menselijke gastro-intestinale aandoeningen.

Murine appendectomie model van chronische colitis geassocieerde colorectale kanker door precieze lokalisatie van caecal patch

Deze studie richt zich op de in vivo subcutane inductie van luminescente colorectale kankercellen in een muizenmodel en de daaropvolgende luminescentiemeting met behulp van een beeldvormingssysteem. De procedure heeft tot doel een reproduceerbaar tumorgroeimodel op te zetten voor real-time monitoring en therapeutische evaluatie.

Subcutane injectie van menselijke colorectale kankercellen bij athymische naakte muizen om de werkzaamheid van antitumoren te evalueren

Een methode wordt beschreven voor de menselijke retinoblastoom tumoren verspreiden in muizen. Tumorcellen worden rechtstreeks geïnjecteerd in de ogen van het immuunsysteem van deficiënte muizen. Secundaire tumoren zijn met succes gebruik van beide cellen direct geoogst van menselijke tumoren en beschaafde tumorspheres.

Oprichting en Voortplanting van Human Retinoblastoom Tumoren in het immuunsysteem van deficiënte muizen

Deze methode is ontwikkeld met als doel het leveren van een constante geneesmiddeloplossing via de halsslagader, de farmacokinetiek van nieuwe geneesmiddelen evalueren muismodellen.

Halsslagader Infusions voor farmacokinetische en farmacodynamische analyse van Taxanen in Muizen

Hier wordt de methode beschreven om een syngene muismodel van orthotope blaastumor op te zetten om de antitumoreffectiviteit van het bacteriële eiwit HP-NAP te evalueren.

Evaluatie van de werkzaamheid van de<em&gt; H. pylori</em&gt; Protein HP-NAP als een therapeutisch hulpmiddel voor de behandeling van blaaskanker in een orthotope Murine Model

Leer hoe een muismodel voor coloproctitiskanker wordt opgezet en de effectiviteit van traditionele Chinese geneeskunde, met name Liujunzi-decoctie, wordt geëvalueerd. Deze methode helpt onderzoekers kankerpreventie te bestuderen.

Vaststelling van een coloproctitis-kankermodel bij muizen en evaluatie van het therapeutisch effect van de Chinese geneeskunde

Meer video's verkennen