Name: Snelle scheiding en weergave van actieve fibrinogenolytische middelen in Sipunculus nudus door middel van fibrinogeen-polyacrylamide-gelelektroforese (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-04-19T13:50:00.000+00:00
Duration: 4 min 36 s
Description: Leer een vereenvoudigde fibrinogen-PAGE-methode voor het screenen van fibrinogenolytische middelen in Sipunculus nudus. Deze efficiënte techniek versnelt de ontwikkeling van nieuwe trombolytische geneesmiddelen voor cardiovasculaire aandoeningen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Onthulling van fibrinogenolytische middelen in pindawormen met fibrinogeen-PAGE

<ol><li>Bikdeli, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((COVID-19+and+thrombotic+or+thromboembolic+disease%3A+Implications+for+prevention%2C+antithrombotic+therapy%2C+and+follow-up%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">COVID-19 and thrombotic or thromboembolic disease: Implications for prevention, antithrombotic therapy, and follow-up.</a> J Am Coll Cardiol. 75 (23), 2950-2973 (2020).</li>
<li>Tsivgoulis, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombolysis+for+acute+ischaemic+stroke%3A+current+status+and+future+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Neurol%22%5BJournal%5D)">Thrombolysis for acute ischaemic stroke: current status and future perspectives.</a> Lancet Neurol. 22 (5), 418-429 (2023).</li>
<li>Tang, M., Hu, C., Lin, H., Yan, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibrinolytic+drugs+induced+hemorrhage%3A+mechanisms+and+solutions%5BTitle%5D)+AND+%22Blood+Coagul+Fibrinolysis%22%5BJournal%5D)">Fibrinolytic drugs induced hemorrhage: mechanisms and solutions.</a> Blood Coagul Fibrinolysis. 34 (5), 263-271 (2023).</li>
<li>Lu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purification%2C+characterization%2C+and+chemical+modification+of+Bacillus+velezensis+SN-14+fibrinolytic+enzyme%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Biol+Macromol%22%5BJournal%5D)">Purification, characterization, and chemical modification of Bacillus velezensis SN-14 fibrinolytic enzyme.</a> Int J Biol Macromol. 177, 601-609 (2021).</li>
<li>Abu-Tahon, M. A., Abdel-Majeed, A. M., Ghareib, M., Housseiny, M. M., Abdallah, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombolytic+and+anticoagulant+efficiencies+of+purified+fibrinolytic+enzyme+produced+from+Cochliobolus+hawaiiensis+under+solid-state+fermentation%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnol+Appl+Biochem%22%5BJournal%5D)">Thrombolytic and anticoagulant efficiencies of purified fibrinolytic enzyme produced from Cochliobolus hawaiiensis under solid-state fermentation.</a> Biotechnol Appl Biochem. 70 (6), 1954-1971 (2023).</li>
<li>Lin, W., Lin, H., Xin, P., Yan, H., Kang, B., Tang, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Comprehensive+approach+to+analyze+the+cell+components+of+cerebral+blood+clots%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A Comprehensive approach to analyze the cell components of cerebral blood clots.</a> J Vis Exp. (197), e65791(2023).</li>
<li>Tang, M., Lin, H., Hu, C., Yan, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Affinity+purification+of+a+fibrinolytic+enzyme+from+Sipunculus+nudus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Affinity purification of a fibrinolytic enzyme from Sipunculus nudus.</a> J Vis Exp. (196), e65631(2023).</li>
<li>Tang, M., Lin, H., Huang, Y., Xu, R., Cui, X., Yan, H. Plasmin affinity purification method based on agarose gel and plasmin and application thereof. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://patents.google.com/patent/CN116103270A/en?oq=CN202310108470">https://patents.google.com/patent/CN116103270A/en?oq=CN202310108470</a> (2023).</li>
<li>Walton, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+fibrin+plate+method+for+the+assay+of+plasminogen+activators%5BTitle%5D)+AND+%22Clinica+Chimica+Acta%22%5BJournal%5D)">An improved fibrin plate method for the assay of plasminogen activators.</a> Clinica Chimica Acta. 13 (5), 680-684 (1966).</li>
<li>Ngere, J. B., Ebrahimi, K. H., Williams, R., Pires, E., Walsby-Tickle, J., McCullagh, J. S. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ion-exchange+chromatography+coupled+to+mass+spectrometry+in+life+science%2C+environmental%2C+and+medical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Ion-exchange chromatography coupled to mass spectrometry in life science, environmental, and medical research.</a> Anal Chem. 95 (1), 152-166 (2023).</li>
<li>Kato, S., Takeuchi, K., Iwaki, M., Miyazaki, K., Honda, K., Hayashi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chitin-+and+streptavidin-mediated+affinity+purification+systems%3A+A+screening+platform+for+enzyme+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Angew+Chem+Int+Ed+Engl%22%5BJournal%5D)">Chitin- and streptavidin-mediated affinity purification systems: A screening platform for enzyme discovery.</a> Angew Chem Int Ed Engl. 62 (31), e202303764(2023).</li>
<li>Sharma, N., Sharma, R., Rajput, Y. S., Mann, B., Singh, R., Gandhi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Separation+methods+for+milk+proteins+on+polyacrylamide+gel+electrophoresis%3A+Critical+analysis+and+options+for+better+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22International+Dairy+Journal%22%5BJournal%5D)">Separation methods for milk proteins on polyacrylamide gel electrophoresis: Critical analysis and options for better resolution.</a> International Dairy Journal. 114, 104920(2021).</li>
<li>Xu, R., Ma, G., Chen, L., Cui, X. Preparation and application of natural fibrinolytic enzyme from peanut worm. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://patents.google.com/patent/CN109295042A/en">https://patents.google.com/patent/CN109295042A/en</a> (2019).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1&nbsp; M Tris-HCl (pH 6.8)</td><td>Solarbio</td><td>T1020</td><td></td></tr><tr><td>1.5 M Tris-HCl (pH 8.8)</td><td>Solarbio</td><td>T1010</td><td></td></tr><tr><td>30% Acrylamide/Bis-acrylamide</td><td>Biosharp</td><td>BL513B</td><td></td></tr><tr><td>Ammonium persulfate</td><td>XiLONG SCIENTIFIC</td><td>7727-54-0</td><td></td></tr><tr><td>Beaker</td><td>PYREX</td><td>2-9425-02</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge Tube (1.5 mL)</td><td>Biosharp</td><td>BS-15-M</td><td></td></tr><tr><td>Constant Temperature Incubator</td><td>JINGHONG</td><td>JHS-400</td><td></td></tr><tr><td>Coomas Brillant Blue Stainning solution</td><td>Beyotime</td><td>P0017F</td><td></td></tr><tr><td>Electronic Analytical Balance</td><td>DENVER</td><td>TP-213</td><td></td></tr><tr><td>Fibrinogen</td><td>Solarbio</td><td>F8051</td><td></td></tr><tr><td>Gel loading pipette tips, Bulk</td><td>Biosharp</td><td>BS-200-GTB</td><td></td></tr><tr><td>Homogenizer</td><td>AHS</td><td>ATS-1500</td><td></td></tr><tr><td>Horizontal rotation oscillator</td><td>NuoMi</td><td>NMSP-600</td><td></td></tr><tr><td>Milli-Q Reference</td><td>Millipore</td><td>Z00QSV0CN</td><td></td></tr><tr><td>Mini-PROTEAN Tetra Cell</td><td>BIO-RAD</td><td>165-8000~165-8007</td><td></td></tr><tr><td>N,N,N',N'-Tetramethylethylenediamine</td><td>Sigma</td><td>T9281</td><td></td></tr><tr><td>Pipette Tip (1 mL)</td><td>Axygene</td><td>T-1000XT-C</td><td></td></tr><tr><td>Pipette Tip (10 &micro;L)</td><td>Axygene</td><td>T-10XT-C</td><td></td></tr><tr><td>Pipette Tip (200 &micro;L)</td><td>Axygene</td><td>T-200XT-C</td><td></td></tr><tr><td>Pipettor (1 mL)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>ZY18723</td><td></td></tr><tr><td>Pipettor (10&micro;L)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>ZX98775</td><td></td></tr><tr><td>Pipettor (200 &micro;L)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>ZY20280</td><td></td></tr><tr><td>Pipettor (50 &micro;L)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>ZY15331</td><td></td></tr><tr><td>Refrigerated Centrifuge</td><td>cence</td><td>H1650R</td><td></td></tr><tr><td>Sodium dodecyl sulfate</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>V900859</td><td></td></tr><tr><td>Tris</td><td>Solarbio</td><td>T8060</td><td></td></tr><tr><td>Tris-HCl</td><td>Solarbio</td><td>T8230</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Solarbio</td><td>T8200</td><td></td></tr></tbody></table>

snelle scheiding en weergave van actieve fibrinogenolytische middelen in sipunculus nudus door middel van fibrinogeen-polyacrylamide-gelelektroforese

Rapid Separation and Display of Active Fibrinogenolytic Agents in Sipunculus nudus through Fibrinogen-Polyacrylamide Gel Electrophoresis

Snelle scheiding en weergave van actieve fibrinogenolytische middelen in Sipunculus nudus door middel van fibrinogeen-polyacrylamide-gelelektroforese

Fibrinogenolytic agents that can dissolve fibrinogen directly have been widely used in anti-coagulation treatment. Generally, identifying new ...

rapid-separation-display-active-fibrinogenolytic-agents-sipunculus

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Biochemie

In this video, we demonstrate a two-dimensional gel electrophoresis method that separates individual proteins from a complex protein mixture obtained from tumor tissues of human nonfunctional pituitary adenoma (NFPA). The proteins are separated based on their electric charge in the first dimension and further separated based on molecular weights in the second dimension.

Two-Dimensional Polyacrylamide Gel Electrophoresis: A Separation Technique for Analysis of Proteins in Complex Protein Mixture Based on Charge and Molecular Weight

This video demonstrates the use of a UV-visible spectrophotometer for monitoring insoluble fibrin clot formation as a function of the change in the solution turbidity. The UV-visible spectrophotometer measures the solution’s absorbance over time, which represents the turbidity change due to the insoluble fibrin clot formation.

UV-Visible Spectroscopy for Monitoring Fibrin Clot Formation

Recombinante prototype schuimend virus integrase eiwit is het vaak besmet met een bacteriële nuclease tijdens het zuiveringsproces ongehinderd. Deze methode nuclease besmetting identificeert en verwijdert het uit de definitieve opstelling van het enzym.

Detectie en verwijdering van de Nuclease besmetting tijdens het zuiveringsproces ongehinderd van recombinante Prototype schuimend Virus Integrase

Het doel is om bioactieve kleine moleculen, peptiden uit een complex plantenextract en eiwitten uit pathogene microben te fractioneren en te isoleren door gebruik te maken van de isoelectrische focusmethode (IEF) met vloeibare fase. Verder werden de gescheiden moleculen geïdentificeerd en hun bioactiviteit bevestigd.

Scheiding van bioactieve kleine moleculen, peptiden uit natuurlijke bronnen en eiwitten uit microben door preparative isoelectric Focus (IEF) Methode

Dit rapport beschrijft technieken om gesulfateerde glycosaminoglycanen (GAG's) uit biologische monsters te isoleren en te zuiveren en een polyacrylamidegel-elektroforesebenadering om hun grootte te benaderen. GAG's dragen bij aan de weefselstructuur en beïnvloeden signaleringsprocessen via elektrostatische interactie met eiwitten. GAG-polymeerlengte draagt bij aan hun bindingsaffiniteit voor verwante liganden.

Detectie van glycosaminoglycanen door polyacrylamide gel-elektroforese en zilverkleuring

Hier presenteren we een affiniteitszuiveringsmethode van een fibrinolytisch enzym van Sipunculus nudus die eenvoudig, goedkoop en efficiënt is.

Affiniteitszuivering van een fibrinolytisch enzym van Sipunculus nudus

Het experiment dat hier wordt gebruikt, toont een methode van moleculaire docking in combinatie met cellulaire thermische verschuivingstest om de interactie tussen kleine moleculen en eiwitdoelen te voorspellen en te valideren.

Voorspelling en validatie van eiwitdoelen van een verbinding met kleine moleculen

Proteïnasen zijn van vitaal belang voor bacteriële pathogenese, waardoor invasie en immuunontwijking mogelijk worden. Extractie in één stap van cytoplasmatische en membraaneiwitten van bacteriën in hun actieve vorm is schrijnend. Dit video-artikel demonstreert de extractie van volledige cellulaire eiwitten van Leptospira voor zymografie-analyse om gelatinasen te detecteren en te karakteriseren.

Extractie in één stap en zymografische analyse van bacteriële gelatinasen

Dit werk beschrijft een microfluissue-assay die schuifspanning gebruikt om de vorming van tromben in het bloed te triggeren en karakteriseert de trombus aan de hand van meerdere dimensies van uitlezen. De test kan de protrombische neiging van bloedmonsters meten en is daardoor nuttig voor ziektediagnose, geneesmiddelenontdekking, evenals basismechanistische studies gerelateerd aan trombose.

Thrombus Profiling Assay: Een op microfludiica gebaseerd platform voor het volledig karakteriseren van biomechanische trombogenese

Dit protocol beschrijft de Nijmegen Hemostasis Assay, die gelijktijdige, tijdsgebonden meting van trombine- en plasmingeneratie mogelijk maakt om een geïntegreerde beoordeling van stolling en fibrinolyse te bieden. De assay heeft als doel de karakterisering van het hemostatische evenwicht in onderzoek en klinische omgevingen te verbeteren, buiten het bereik van conventionele hemostatische tests.

De Nijmegen Hemostasis-assay: gelijktijdige fluorogene meting van trombine- en plasminegeneratie in één put

Leer een vereenvoudigde fibrinogen-PAGE-methode voor het screenen van fibrinogenolytische middelen in Sipunculus nudus. Deze efficiënte techniek versnelt de ontwikkeling van nieuwe trombolytische geneesmiddelen voor cardiovasculaire aandoeningen.

Snelle scheiding en weergave van actieve fibrinogenolytische middelen in Sipunculus nudus door middel van fibrinogeen-polyacrylamide-gelelektroforese (Video) | JoVE Journal

Snelle scheiding en weergave van actieve fibrinogenolytische middelen in Sipunculus nudus door middel van fibrinogeen-polyacrylamide-gelelektroforese

Meer video's verkennen