January 3rd, 2025
Hier beschrijven we een eenvoudig en economisch protocol om onbevooroordeelde kwantificering van de pulmonale microvasculaire dichtheid voor longweefsel van hele muizen uit te voeren met behulp van enkelvoudige kleuring van isolectine B4.
Ons onderzoek is gericht op het kwantificeren van pulmonale microvasculaire dichtheid in verschillende longkwabben van muizen, rekening houdend met anatomische verschillen en leeftijdsgerelateerde veranderingen, met behulp van isolectine B4-kleuring en ImageJ-analyse. De belangrijkste vragen die we proberen te beantwoorden, zijn hoe we de microvasculaire dichtheid in verschillende longkwabben nauwkeurig kunnen kwantificeren en welke veranderingen optreden in de microvasculaire dichtheid van lobben bij veroudering. Recente ontwikkelingen in pulmonaal microvasculair onderzoek, waaronder verbeterde technieken voor het opruimen en fixeren van weefsel, geavanceerde beeldvorming en softwaretools voor nauwkeurige kwantificering.
Deze ontwikkelingen vergroten ons begrip van microvasculaire veranderingen bij veroudering en aanverwante ziekten, zoals astma en COVID-19, en bieden inzichten voor mogelijke therapieën. De belangrijkste uitdagingen zijn het nauwkeurig lokaliseren van laesies, het correct verdelen van longweefsel, het verminderen van fixeermiddelgerelateerde weefselschade en het ontbreken van specifieke markers voor longendotheelcellen. Traditionele methoden zien vaak de variaties in vorm en vascularisatie over verschillende longkwabben over het hoofd.
Ons protocol pakt de kloof aan door een alomvattende benadering te bieden voor het doorsnijden van longlobben en het kwantificeren van microvasculaire dichtheid met behulp van isolectine vóór het kleuren. De combinatie van IB4-kleuring met de gratis software ImageJ voor geavanceerde microvasculaire dichtheidsanalyse zorgt voor nauwkeurige en bruikbare resultaten. De cellulaire en moleculaire mechanismen waarmee pulmonale microvasculaire laesies deelnemen aan de progressie van longgerelateerde ziekten, en ontwikkelen nieuwe strategieën of doelen voor het redden van de pulmonale microvasculaire functie om longherstel te bevorderen en functioneel herstel te induceren.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Deze studie richt zich op het kwantificeren van pulmonale microvasculaire dichtheid in muizenlonglobben, rekening houdend met anatomische verschillen en leeftijdsgerelateerde veranderingen. Met behulp van isolectine B4-kleuring en ImageJ-analyse, wil het onderzoek de nauwkeurigheid van microvasculaire dichtheidsmetingen in verschillende longkwabben verbeteren.
Quantitative assessment of pulmonary microvascular density across distinct lung lobules addresses a critical gap in preclinical respiratory research, enabling more accurate modeling of microvascular dysfunction and remodeling. This protocol enhances predictive confidence in disease-relevant systems by accounting for anatomical and age-related heterogeneity, supporting translational continuity from discovery through preclinical validation. The approach is directly relevant for biopharma teams prioritizing mechanistic de-risking and target validation in pulmonary vascular research portfolios.
This protocol integrates into the discovery-to-preclinical continuum by enabling hypothesis-driven quantification of microvascular changes in murine lung lobules.