Name: Knaagdier Inferieure Vena Cava Venoplastiek Ballon Model (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-05-24T14:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 44 s
Description: Leer een overlevingsmodel voor knaagdieren om venoplastieballoninterventies te testen bij veneuze trombose. Deze methode helpt onderzoekers het immuunsysteem en trombusdynamiek in vivo bestuderen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Deze studie wordt ondersteund door de American Venous Forum (AVF) 2023 Basic Science Research Grant en Surmodics, Inc.

Het volgende protocol volgt het beleid en de richtlijnen van het Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) van de Universiteit van Michigan (UMICH), de principes van de Amerikaanse overheid voor het gebruik en de verzorging van gewervelde dieren die worden gebruikt bij testen, onderzoek en training, en de ARRIVE-richtlijnen 2.0. De UMICH Animal Welfare Assurance-overeenkomst is in overeenstemming met OLAW en USDA en is volledig geaccrediteerd door AAALAC International. Dit protocol is goedgekeurd met het ID-nummer PRO00010841. Mannelijke uitgeteelde Sprague Dawley-ratten van Charles River Laboratories, met een gewicht van 450 g en een leeftijd van 15 weken, werden gebruikt.
1. Anesthesie bij ratten
<ol><li>Haal de dieren uit hun kooi en plaats ze in een preoperatieve inductiegaskamer met verdoving van 5% isofluraan en 100% zuurstof met een debiet van 0,8 tot 1 l/min (verdampergestuurd) om algemene anesthesie op te wekken.</li>
	<li>Verdoof ratten in de anesthesie-inductiekamer, haal ze uit de kamer, weeg, smeer hun ogen met steriele oogheelkundige zalf en plaats ze vervolgens in dorsale ligruimte op een warmwatercirculerend verwarmingsapparaat. Bevestig voldoende diepte van de anesthesie met behulp van pedaalreflex (stevige teenknijp).</li>
	<li>Scheer de ventrale buik met een elektrische tondeuse. Handhaaf algemene anesthesie op 2,5% isofluraan en 100% zuurstof op 0,8 tot 1 l/min met een niet-rebreathing-circuit door een neuskegel.</li>
</ol>2. Echografie van ratten
<ol><li>Bewaak fysiologische beoordelingen, waaronder ademhalingsfrequentie, hartslag en temperatuur, tijdens beeldvorming.</li>
	<li>Voor abdominale beeldvorming van de inferieure vena cava (IVC) brengt u geleidende gel aan en oriënteert u de transducer in een dwarspositie. Terwijl u de perifere vasculaire voorinstelling instelt, gebruikt u de tweedimensionale beeldvormingsmodus of B-modus, laat u de lineaire sonde (10 MHz) op het midden van de buik zakken en past u de diepte met druk aan totdat de buikvaten in zicht komen.</li>
	<li>Onderscheid IVC van de abdominale aorta door de samendrukbaarheid te beoordelen en door de stroom te beoordelen met behulp van zowel kleur- als gepulseerde golf-Doppler-modus met een hoogfrequente lineaire sonde (10 mHz).<ol><li>Wanneer u compressie toepast met de ultrasone sonde, maakt u onderscheid tussen de twee, aangezien de IVC samendrukbaar is, terwijl de aorta zijn vorm en doorgankelijkheid behoudt.</li>
	</ol></li>
	<li>Beoordeel de richting en snelheid van de bloedstroom met behulp van zowel kleuren- als gepulseerde golf-Doppler. Het kleurendopplervenster geeft de stroom naar de sonde weer in rood en stroomt weg van de sonde in blauw. Schakel het instrument over naar de pulsgolf-Doppler-modus (Duplex-modus) om de richting en snelheid van de bloedstroom in de loop van de tijd te beoordelen. Verkrijg de nodige stroombeelden met behulp van de geautomatiseerde tool voor het vastleggen van beelden van de ultrasone machine (de exacte specificaties voor beeldacquisitie kunnen variëren per echografiesysteem).<ol><li>Gebruik de volgende beoordelingsmethode: de aorta heeft bloedstroom naar de sonde en een trifasische golfvorm, terwijl de IVC een spontane stroom heeft weg van de sonde met een veel lagere amplitude.</li>
		<li>Als de proximale IVC een normale golfvorm vertoont, maar er distaal een niet-fasische of afwezige (vlakke) golfvorm wordt gedetecteerd, onderzoek dan de mogelijkheid van een veneuze obstructie tussen deze onderzoekspunten.</li>
	</ol></li>
	<li>Zodra de IVC is gelokaliseerd, identificeert u het middengedeelte, dat zich in het middelste derde deel bevindt, inferieur aan de nieraders en superieur aan de IVC-bifurcatie, hoogstwaarschijnlijk waar de lumbale aders zich bevinden.</li>
	<li>Meet in het midden van IVC de diameter van muur tot muur in het dwarsaanzicht met behulp van het B-modusbeeld van de dwarsdoorsnede, waarbij u de breedste diameter van het vat vastlegt. Beeldvormingsacquisitie kan variëren in verschillende echografiemachines. Sla gegevens op met behulp van compact disks (cd's) in DICOM-bestanden.</li>
</ol>3. Microchirurgie en herstel bij ratten
<ol><li>Reinig de buik met in gaas gedrenkte chloorhexidinescrub en chloorhexidine-oplossing 3x om een aseptische chirurgische toestand te garanderen.</li>
	<li>Plaats gesteriliseerde huishoudfolie als een chirurgische wikkel om de borstkas en het buikgebied van de rat, de microscoopknoppen (vergroting en focus) en het oculair te bedekken.</li>
	<li>Maak een incisie in de ventrale middellijn (3 cm) ongeveer 2 cm onder de processus xiphoid met een irisschaar door de huid en de buikwand, waardoor de buikinhoud bloot komt te liggen. Gebruik steriel met zoutoplossing doordrenkt gaas van 2 inch x 2 inch om de darmen naar de rechterkant van het dier te reflecteren.</li>
	<li>Voer voor IVC-blootstelling een stompe dissectie uit met behulp van een steriele applicator met katoenen punt. Plaats een draadspeculum in de incisie, waardoor IVC-visualisatie mogelijk is.</li>
	<li>Schroei alle IVC-lumbale takken dicht met behulp van een fijne puntcauterisatie bij lage temperatuur, van de nieraders tot de iliacale bifurcatie, en maak de zijtakken vast met 7-0 niet-resorbeerbare polypropyleen hechtingen.</li>
	<li>Plaats een proximaal gebogen vasculaire microclip op de IVC, die gescheiden is van de aorta en net onder de nieraders ligt. Plaats een rechte microclip op de distale IVC, die gescheiden is van de aorta en superieur is aan de IVC-bifurcatie.</li>
	<li>Plaats een 8-0 nylon U-steek hechtdraad caudaal aan de linker nierader gecentreerd op het voorste oppervlak van de IVC.</li>
	<li>Plaats een geslepen voerdraad van 0,014 mm met de venoplastiekballon teruggeplaatst, retrograde naar de bloedstroom in de infrarenale IVC, caudaal naar de gebogen microclip.</li>
	<li>Schuif de ballon in het midden van de IVC met behulp van de Seldinger-techniek. Verwijder de geslepen voerdraad en blaas de venoplastiekballon gedurende 3 minuten op met een IVC-overstretch van 10% tot 15% met behulp van een opblaasspuit van 20 ml om positieve druk te genereren over een bereik van 0-30 Atm. Spoel alle systemen met steriele zoutoplossing vóór IVC-canulatie om luchtembolie te voorkomen. OPMERKING: Een IVC van 2,8 mm zou een venoplastiek ondergaan tot 3,22 mm (15% overrekking). De vereiste opblaasdruk om de gewenste rek te bereiken, wordt bepaald door de eigenschappen van de ballon en is beschikbaar op de verpakking van de fabrikant.</li>
	<li>Draai de U-steek vast bij het leeglopen en verwijderen van de gifoplastiekballon. Verwijder de microclips.</li>
	<li>Sluit de laparotomiesite op een tweelaagse manier. Gebruik een 5-0 polyglactine resorbeerbare synthetische hechtdraad in een doorlopend patroon om zowel de buikwand als de huid te sluiten.</li>
	<li>Injecteerbare suspensie met verlengde afgifte, 0,65 mg/kg subcutaan (SC) postoperatief toedienen als pijnstiller voor ratten, omdat het de biomarkerpanels van ontstekingsmoleculen voor eiwitanalyse niet verstoort.</li>
	<li>Herstel ratten in een individuele kooi, observeer postoperatief (30 min) onder een verwarmingslamp (minimale afstand - 24 inch afstand van de kooi) en keer dan terug naar hun oorspronkelijke wooneenheden.</li>
	<li>Voer voor schijndieren uit elke experimentele groep alleen de dissectie uit, zonder de ligatie, cauterisatie en canulatie van de IVC-takken.</li>
	<li>Plaats bij posttrombotische aandoeningen gedurende 24 uur een proximale rechte vasculaire microclip op de IVC, die gescheiden is van de aorta, net onder de nieraders. Gebruik dezelfde dissectie- en sluittechnieken.<ol><li>Controleer op de echografische tekenen van IVC-occlusie, waaronder de visualisatie van de IVC-clip, bevestiging van distale IVC zonder stroom en opgezwollen gemeenschappelijke darmaderen. Follow-uptijdstippen kunnen worden aangepast aan de specificaties van het onderzoek.</li>
		<li>Om de fysiologische veranderingen die worden gemodelleerd te observeren, selecteert u tijdstippen in de eerste 72 uur voor vroege trombivorming en van 3 tot 7 dagen na de procedure voor latere trombi-resolutie. Latere tijdstippen die in dit model zijn getest, zijn 7 tot 28 dagen 5,13.</li>
	</ol></li>
	<li>Gebruik de technieken in stap 3.5-3.9 voor post-trombotische ballonvenoplastiek met de volgende kanttekeningen: Een hogere insufflatordruk kan nodig zijn om de gewenste overrekking te bereiken, aangezien de IVC-diameter toeneemt bij posttrombotische omstandigheden.</li>
	<li>Voer euthanasie uit volgens de aanbevelingen van de huidige richtlijnen van de American Veterinary Medical Association voor euthanasie voor knaagdieren door twee bevestigingsmethoden uit te voeren (bloedverwijdering en verwijdering van vitale organen) om ervoor te zorgen dat het dier niet zal herleven.</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig01.jpg"> Figuur 1: Verdeling van transabdominale duplexmetingen van de diameter van de transversale IVC (mid-infrarenale doorsnede). De meting werd gedaan aan de hand van het gewicht van het dier. Er werd geen significante correlatie gevonden tussen het gewicht en de IVC-diameter. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig01large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
4. Voorbereiding van het monster
<ol><li>Voer bevestigende weefseloverdracht uit van met geneesmiddelen beklede venoplastiekballonnen met behulp van high-performance vloeistofchromatografie (HPLC) -testtechniek.</li>
	<li>Ontleed de IVC en aorta en verwijder en bloc voor formaline-gefixeerde paraffine-inbedding en histologische analyse.</li>
	<li>Gebruik voor eiwitanalyse de RIPA-buffer in een verdunningsconcentratie van 60.000 μg/g monster, verwerk met een weefselhomogenisator in een ruimte met lage temperatuur bij 4 °C en bewaar deze na verwerking bij -80 °C.</li>
</ol>

Het Model van de de Venoplastiekballon van het knaagdier voor Studies van de Diepe Behandeling van de ader

<ol><li>Prandoni, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+long-term+clinical+course+of+acute+deep+venous+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Inter+Med%22%5BJournal%5D)">The long-term clinical course of acute deep venous thrombosis.</a> Ann Inter Med. 125 (1), 1-7 (1996).</li>
<li>Prandoni, P., Kahn, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Post-thrombotic+syndrome%3A+prevalence%2C+prognostication+and+need+for+progress%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Haematol%22%5BJournal%5D)">Post-thrombotic syndrome: prevalence, prognostication and need for progress.</a> Br J Haematol. 145 (3), 286-295 (2009).</li>
<li>Gloviczki, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+2023+Society+for+Vascular+Surgery%2C+American+Venous+Forum%2C+and+American+Vein+and+Lymphatic+Society+clinical+practice+guidelines+for+the+management+of+varicose+veins+of+the+lower+extremities.+Part+II%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vas+Surg+Venous+Lymph+Diso%22%5BJournal%5D)">The 2023 Society for Vascular Surgery, American Venous Forum, and American Vein and Lymphatic Society clinical practice guidelines for the management of varicose veins of the lower extremities. Part II.</a> J Vas Surg Venous Lymph Diso. 12 (1), 101670(2024).</li>
<li>Henke, P., Sharma, S., Wakefield, T., Myers, D., Obi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insights+from+experimental+post-thrombotic+syndrome+and+potential+for+novel+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Res%22%5BJournal%5D)">Insights from experimental post-thrombotic syndrome and potential for novel therapies.</a> Transl Res. 225, 95-104 (2020).</li>
<li>Diaz, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Choosing+a+mouse+model+of+venous+thrombosis%3A+A+consensus+assessment+of+utility+and+application%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscl+Thrombo+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Choosing a mouse model of venous thrombosis: A consensus assessment of utility and application.</a> Arterioscl Thrombo Vasc Biol. 39 (3), 311-318 (2019).</li>
<li>Lee, Y. U., Lee, A. Y., Humphrey, J. D., Rausch, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histological+and+biomechanical+changes+in+a+mouse+model+of+venous+thrombus+remodeling%5BTitle%5D)+AND+%22Biorheology%22%5BJournal%5D)">Histological and biomechanical changes in a mouse model of venous thrombus remodeling.</a> Biorheology. 52 (3), 235-245 (2015).</li>
<li>Xie, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correspondence+of+ultrasound+elasticity+imaging+to+direct+mechanical+measurement+in+aging+DVT+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Correspondence of ultrasound elasticity imaging to direct mechanical measurement in aging DVT in rats.</a> Ultrasound Med Biol. 31 (10), 1351-1359 (2005).</li>
<li>Moini, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Venoplasty+and+stenting+in+post-thrombotic+syndrome+and+non-thrombotic+iliac+vein+lesion%5BTitle%5D)+AND+%22Minim+Invasive+Ther+Allied+Technol%22%5BJournal%5D)">Venoplasty and stenting in post-thrombotic syndrome and non-thrombotic iliac vein lesion.</a> Minim Invasive Ther Allied Technol. 29 (1), 35-41 (2020).</li>
<li>Chaitidis, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+of+post-thrombotic+syndrome%3A+A+comprehensive+review%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Pharma+Des%22%5BJournal%5D)">Management of post-thrombotic syndrome: A comprehensive review.</a> Curr Pharma Des. 28 (7), 550-559 (2022).</li>
<li>Dangas, G. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In-stent+restenosis+in+the+drug-eluting+stent+era%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">In-stent restenosis in the drug-eluting stent era.</a> J Am Coll Cardiol. 56 (23), 1897-1907 (2010).</li>
<li>Neglén, P., Berry, M. A., Raju, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endovascular+surgery+in+the+treatment+of+chronic+primary+and+post-thrombotic+iliac+vein+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Euro+J+Vas+Endovas+Surg%22%5BJournal%5D)">Endovascular surgery in the treatment of chronic primary and post-thrombotic iliac vein obstruction.</a> Euro J Vas Endovas Surg. 20 (6), 560-571 (2000).</li>
<li>Sharifi, M., Mehdipour, M., Bay, C., Smith, G., Sharifi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endovenous+therapy+for+deep+venous+thrombosis%3A+The+TORPEDO+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Catheter+Cardiovasc+Interv%22%5BJournal%5D)">Endovenous therapy for deep venous thrombosis: The TORPEDO trial.</a> Catheter Cardiovasc Interv. 76 (3), 316-325 (2010).</li>
<li>Nicklas, J. M., Gordon, A. E., Henke, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resolution+of+deep+venous+thrombosis%3A+Proposed+immune+paradigms%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Resolution of deep venous thrombosis: Proposed immune paradigms.</a> Int J Mol Sci. 21 (6), 2080(2020).</li>
<li>Li, J., Kim, S. G., Blenis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapamycin%3A+One+drug%2C+many+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabol%22%5BJournal%5D)">Rapamycin: One drug, many effects.</a> Cell Metabol. 19 (3), 373-379 (2014).</li>
<li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapamycin+regulates+Akt+and+ERK+phosphorylation+through+mTORC1+and+mTORC2+signaling+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Carcinogen%22%5BJournal%5D)">Rapamycin regulates Akt and ERK phosphorylation through mTORC1 and mTORC2 signaling pathways.</a> Mol Carcinogen. 49 (6), 603-610 (2010).</li>
<li>Diaz, J. A., Farris, D. M., Wrobleski, S. K., Myers, D. D., Wakefield, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inferior+vena+cava+branch+variations+in+C57BL%2F6+mice+have+an+impact+on+thrombus+size+in+an+IVC+ligation+%28stasis%29+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemo%22%5BJournal%5D)">Inferior vena cava branch variations in C57BL/6 mice have an impact on thrombus size in an IVC ligation (stasis) model.</a> J Thromb Haemo. 13 (4), 660-664 (2015).</li>
<li>Schönfelder, T., Jäckel, S., Wenzel, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+deep+vein+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Gef%C3%A4sschirurgie%22%5BJournal%5D)">Mouse models of deep vein thrombosis.</a> Gefässchirurgie. 22 (1), 28-33 (2017).</li>
<li>de Barros, R. S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphometric+analysis+of+rat+femoral+vessels+under+a+video+magnification+system%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Bras%22%5BJournal%5D)">Morphometric analysis of rat femoral vessels under a video magnification system.</a> J Vasc Bras. 16 (1), 73-76 (2017).</li>
</ol>

Er werden geen belangenconflicten gemeld.

De VBM kan worden uitgevoerd bij ratten ≥ 250 g met behulp van ballonnen in het bereik van 2,5-3,5 mm. Voor ratten van meer dan 750 g wordt de techniek beperkt door een grotere hoeveelheid vetweefsel in de buikholte en de orgaangrootte in plaats van veranderingen in de IVC-diameter. Uit onze ervaring hebben we ontdekt dat 10 of meer dieren per groep nodig zijn om statistische significantie tussen de groepen te verkrijgen voor aderwandeiwitanalyse of activiteitstesten en histologie. Periodieke temperatuurcontrole en bewaking van de ademhalingsfrequentie tijdens chirurgische ingrepen zijn van groot belang om het succes van de procedure te garanderen, evenals een zorgvuldig postoperatief beheer.
VBM is veilig (91,2% overlevingskans, 83/91 uitgevoerde procedures) en reproduceerbaar met een gemiddelde proceduretijd van 30 minuten. Proceduregerelateerde morbiditeit omvat anesthesiecomplicaties (1%, 1/91), bijwerkingen van opioïden (1%, 1/91), bloedingen (2,1%, 2/91) en trombose (4,3%, 4/91). IVC-bloedingen werden tijdens de modelontwikkeling aanzienlijk verminderd door gebruik te maken van een retrograde IVC-canulatiebenadering met het inbrengpunt naast de infrarenale IVC, die een bredere hoek biedt voor draadinbrengen met minder interferentie door de buikorganen. Ook tijdens de inbreng- en insufflatiefasen raden wij een operatieassistent aan om de juiste toegediende druk, de opblaastijd en het intrekken van de geslepen voerdraad te garanderen. Bij het leeglopen moet ervoor worden gezorgd dat de venoplastiekballon correct wordt opgehaald om te voorkomen dat de IVC-wand op het inbrengpunt wordt gescheurd. Drukmetingen worden gevolgd door de fabrikant om hyperinflatie en scheuren van de ballon te voorkomen. Deze metingen dragen over het algemeen bij aan een stabielere aanpak, het verminderen van bloedingscomplicaties en het verbeteren van de overleving van dieren.
IVC-bloedingen kunnen ook worden verzacht met de volgende voorzorgsmaatregelen. Controleer eerst de volledige cauterisatie van de achtertakken en ligaties van de zijtakken. Dit garandeert ook de reproduceerbaarheid van de bevindingen op basis van eerdere IVC-ligatie-staseanalyse van knaagdieren 5,16,17. Ten tweede, controleer de juiste occlusie met de proximale en distale clips om volledige hemostatische controle te garanderen. Controleer ten slotte de volledige afsluiting van de U-stitch-hechting bij het verwijderen van de ballon voordat u de IVC-clips verwijdert. Als er een bloeding aanwezig is, zal zachte druk op de IVC met een applicator met wattenstaafje totdat hemostatische controle is bereikt, het bloeden meestal stoppen. Aanvullende hemostatische controlemiddelen, zoals resorbeerbaar gelatinepoeder, kunnen worden gebruikt in geval van bloedingen.
Trombotische complicaties zouden minimaal moeten zijn als het opblazen van de ballon, het leeglopen en de sluitingstijd van de U-stitch-hechting minder dan 5 minuten is. Indien nodig kan antistolling worden toegediend. Tot op heden is er geen volledig percutane procedure om de minimaal invasieve ballonvenoplastieën na te bootsen die momenteel bij mensen worden uitgevoerd. De grootte van het toegangsvat (femurader van de rat) is aanzienlijk kleiner (gemiddeld 0,81 mm)18 dan de buitendiameter van de kleinste in de handel verkrijgbare 4F-huls (1,61 mm) die nodig zou zijn voor een volledig endovasculaire procedure. Beperkingen zijn onder meer de behoefte aan bekwame microchirurgen en de behoefte aan gespecialiseerde apparatuur.
Concluderend simuleert het VBM-model nauwkeurig het klinische scenario van diepe veneuze venoplastiek na DVT. Het is een waardevol hulpmiddel voor het bestuderen van het endovasculaire effect van venoplastiekballonnen op het IVC met verschillende medicijnalternatieven op meerdere tijdstippen. Toekomstige toepassingen voor deze techniek zijn onder meer het preklinisch testen van andere medische hulpmiddelen, waaronder stents, trombectomiekkatheters, balloncoatings en nieuwe farmacologische therapieën.

Diepe veneuze obstructies van onopgeloste trombi zijn een veelvoorkomend gevolg van diepe veneuze trombose (DVT) en zijn een van de oorzaken van posttrombotisch syndroom (PTS), dat miljarden dollars kost aan gezondheidszorg en een aanzienlijke invloed heeft op de kwaliteit van leven 1,2,3. PTS is een unieke inflammatoire pathologie met als gevolg aderwandfibrose4 die niet volledig is vastgelegd in DVT-modellenvoor kleine dieren 5,6,7, en wat nog belangrijker is, eerdere modellen kunnen de respons op therapeutische interventies niet evalueren. Trombotische veneuze obstructies worden vaak behandeld door stenting en ballonvenoplastiek 8,9; Dergelijke interventies worden belemmerd door een hoog herinterventiepercentage als gevolg van restenose en occlusie 10,11,12.
Ondanks de beschikbaarheid van met medicijnen beklede ballonnen om arteriële-specifieke stenose/occlusies aan te pakken, bestaan er geen voor diepe aders. Het moleculaire mechanisme achter restenose is slecht begrepen in aderen en heeft geen directe therapie4. Daarom is ons doel om een diermodel te presenteren dat lokaal toegediende therapieën kan testen via venoplastiekballonnen die posttrombotische obstructies van diepe veneuze simuleren. Dit model reproduceert de posttrombotische aandoening en evalueert hoe verschillende soorten venoplastiekballonnen de aderwand in vivo beïnvloeden.

<table><tbody><tr><td>3-0 DemeCRYL</td><td>DemeTech</td><td>G183019F4P</td><td>12 per box</td></tr><tr><td>5-0 DemeCRYL</td><td>DemeTech</td><td>G285017B0P</td><td>12 per box</td></tr><tr><td>7-0 DemeLENE</td><td>DemeTech</td><td>PM197011F13M</td><td>12 per box</td></tr><tr><td>8-0 DemeLON</td><td>DemeTech</td><td>NL868007C7P</td><td>12 per box</td></tr><tr><td>Angled Clip Applier</td><td>SCANLAN</td><td>3795-01A</td><td>7-1/4&Prime; (18,5 cm)</td></tr><tr><td>Baxter 0,9% Sodium Chloride Irrigation Bottle</td><td>Baxter</td><td>SKU: 195-7124</td><td>1000mL Bottle</td></tr><tr><td>Bovie Cautery Low Temperature Fine Tip</td><td>Symmetry Surgical Inc</td><td>AA00</td><td>10/bx</td></tr><tr><td>Buprenorphine</td><td>Fidelis Animal Health</td><td>SKU- 099114</td><td>1,3mg/mL, 3mL</td></tr><tr><td>CD (Sprague Dawley) Rats</td><td>Charles River</td><td>Strain Code 001</td><td>Male, 400 gm</td></tr><tr><td>Clip-It Traceable Timer</td><td>TRACEABLE PRODUCTS</td><td>Cat. No. 5046</td><td></td></tr><tr><td>Cotton-Tip Applicator 3"</td><td>Dukal Corporation</td><td>922-00037BX100</td><td>1000/BOX</td></tr><tr><td>Enzymatic Surgical Instrument Detergent and Presoak</td><td>Medline</td><td>MDS88000B9</td><td>1 Gal</td></tr><tr><td>Eye Lube</td><td>Optixcare</td><td>SKU-065441</td><td>20gm&nbsp;</td></tr><tr><td>Gaymar T/Pump Stryker Localized Warming/Cooling Therapy System</td><td>Stryker</td><td>TP700</td><td></td></tr><tr><td>Heifetz Microclips 12mmx2,25mm</td><td>SCANLAN</td><td>3795-20</td><td>Straight</td></tr><tr><td>Heifetz Microclips 12mmx2,25mm</td><td>SCANLAN</td><td>3795-28</td><td>Curved</td></tr><tr><td>Heifetz Microclips 8mmx1,75mm&nbsp;</td><td>SCANLAN</td><td>3795-14</td><td>Straight</td></tr><tr><td>Heifetz Microclips 8mmx1,75mm&nbsp;</td><td>SCANLAN</td><td>3795-18</td><td>Curved</td></tr><tr><td>Inflation device&nbsp;</td><td>Merit Medical</td><td>IN4130</td><td>BasixCOMPAK with Analog Display</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>MFR VETONE</td><td>SKU-501017</td><td>100mL, Liquid for Inhalation</td></tr><tr><td>Microsurgery kit containing tweezers and forceps</td><td>Customized</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Oxygen, E-tank</td><td>Medline</td><td>MDM1630</td><td></td></tr><tr><td>Sharpened Guidewire</td><td>Customized</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sterile Glad Press-n-Seal</td><td>Glad</td><td>SKU # PSS-140</td><td>ETO Exposed</td></tr><tr><td>Sterile Nonwoven Gauze Sponges 2s 4ply 4x4&nbsp;</td><td>Medline</td><td>SKU PRM21444H</td><td>100Ct</td></tr><tr><td>Surgical microscope&nbsp;</td><td>Zeiss</td><td>S100 / OPMI pico</td><td></td></tr><tr><td>Surgical Scrub &amp; Handwash</td><td>Vetoquinol</td><td>NDC: 17030-003-16</td><td>16 oz</td></tr><tr><td>Ultrasound Gel</td><td>Medline</td><td>CTR001305</td><td>8,5 oz, 12/CS</td></tr><tr><td>Ultrasound system</td><td>Siemens</td><td>ACUSON Antares</td><td>3-D, Color, Continuous wave (CW), Pulsed wave (PW), Power CW/CW Spectral</td></tr><tr><td>Venoplasty Balloon</td><td>Customized</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

knaagdier inferieure vena cava venoplastiek ballon model

Rodent Inferior Vena Cava Venoplasty Balloon Model

Ballonvenoplastiek is een veelgebruikte klinische techniek voor de behandeling van diepe veneuze stenose en occlusie als gevolg van trauma, aangeboren anatomische afwijkingen, acute diepe veneuze trombose (DVT) of stenting. Chronische diepe veneuze obstructie wordt histopathologisch gekenmerkt door trombose, fibrose of beide. Momenteel is er geen directe behandeling beschikbaar om deze pathologische processen aan te pakken. Daarom is een betrouwbaar in vivo diermodel nodig om nieuwe interventies te testen. Het knaagdieroverleving inferieure vena cava (IVC) venoplastiekballonmodel (VBM) maakt de studie van ballonvenoplastiek bij niet-trombotische en post-trombotische aandoeningen op meerdere tijdstippen mogelijk. Het lokale en systemische effect van gecoate en ongecoate venoplastiekballonnen kan worden gekwantificeerd via weefsel-, trombus- en bloedtesten zoals real-time polymerasekettingreactie (RT-PCR), western blot, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), zymografie, aderwand- en trombuscelanalyse, volbloed- en plasmatesten en histologische analyse. De VBM is reproduceerbaar, repliceert chirurgische menselijke ingrepen, kan lokale veranderingen in de aderwand-trombi-eiwit identificeren en maakt meerdere analyses van hetzelfde monster mogelijk, waardoor het aantal dieren dat per groep nodig is, wordt verminderd.

De VBM is een model dat het effect van venoplastiekballonnen evalueert bij volledige hemostasecontrole. Eerst hebben we de diameter van de IVC (mid-infrarenale sectie) gekwantificeerd, zoals weergegeven in figuur 1, voor de juiste grootte van de ballon. Ten tweede wordt de ontwikkelde stap-voor-stap microchirurgische techniek geïllustreerd in figuur 2, en laten we ook voorbeelden zien van de kritieke stappen in figuur 3. Let op de retrograde benadering die wordt gebruikt voor de IVC-canulatie met de geslepen voerdraad.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig02.jpg"> Figuur 2: Microchirurgische techniek voor het testen van gifoplastiekballonnen bij ratten. De gebruikte techniek wordt hier beschreven. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig02large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig03.jpg"> Figuur 3: In vivo beelden van de inzettechniek. (A) Hemostatische controle. (B) U-steek op infrarenale IVC. (C) Draadinbrengen door middel van U-steek met 3 mm ballon met sirolimuscoating. (D) Ballonvenoplastiek retrograde ontplooiing (Sirolimus gecoat). Afkortingen: IVC = inferieure vena cava; AO = Aorta; CBV = Gecoate ballonvenoplastiek. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig03large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
Andere normale metingen van de veneuze bloedvaten en verschillen tussen de IVC en de aorta worden gemarkeerd in figuur 4. Trombotische echografiebevindingen zijn opgenomen in figuur 5. Ten slotte kan in figuur 6 een vergelijking worden gemaakt tussen de diameter van preoperatieve echografie en posttrombotische metingen. De gemiddelde Doppler-stroomsnelheid met gepulseerde golf (mm/s) in de inferieure vena cava voor en na het plaatsen van de clip van het vat wordt weergegeven in figuur 7.
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig04.jpg"> Figuur 4: Representatieve transabdominale duplexbeelden, met voorbeelden van een berekening van de transversale IVC-diameter. (A) Proximale IVC. (B) Mid-infrarenale IVC. (C) Distale IVC. Kleurendoppleranalyse van (D) Mid-infrarenale IVC en (E) Abdominale aorta. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig04large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig05.jpg"> Figuur 5. Afbeeldingen met afbeeldingen voor en na de plaatsing van de clip. (A) Echografie na plaatsing van de clip die IVC-occlusie bevestigen. (B) Proximale en distale aortastroom. (C) Proximale IVC-stroom. (D) Gemeenschappelijke darmaders. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig05large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig06.jpg"> Figuur 6. Echografie beelden. Ultrasone veranderingen voor en na 15 min, 30 min en 45 min, ter bevestiging van IVC-occlusie. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig06large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig07.jpg"> Figuur 7: Gemiddelde Doppler-stroomsnelheid met gepulseerde golf. Gemiddelde stroomsnelheid (mm/s) in de inferieure vena cava voor en na het plaatsen van de clip (**: P ≤ 0,01, Mann-Whitney-test uitgevoerd). Foutbalken geven een standaardfout weer. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig07large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
Om de uitkomst van verschillende venoplastiekinterventies met nieuwe coatings te analyseren, raden we de meting van effectieve eiwitten aan die het on-target effect van het betreffende medicijn kunnen aantonen. Voor de met sirolimus beklede venoplastiekballon die hier wordt gebruikt, hebben we de gefosforyleerde AKT (p-AKT) eiwitniveaus van IVC-lysaten van ratten gemeten, wat de remming van de mTOR-route bevestigt, aangezien p-AKT een stroomafwaarts eiwit is dat afneemt als reactie op sirolimus14,15. We kunnen in figuur 8 zien hoe, na venoplastiek met gecoate ballonnen (CBV), p-AKT significant is afgenomen in vergelijking met de schijngroep.
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig08.jpg"> Figuur 8: Eiwit p-AKT niveaus. Eiwitniveaus van IVC-lysaten van ratten van schijn- versus gecoate ballonvenoplastiek (CBV) onder normale omstandigheden die het doeleffect bevestigen met remming van de mTOR-route met behulp van met sirolimus venoplastiek gecoate ballonnen. (**: P ≤ 0,01, Mann-Whitney-test uitgevoerd). Foutbalken geven een standaardfout weer. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig08large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>

Het protocol presenteert een overlevingsmodel voor knaagdieren om interventies met een venoplastiekballon (VB) te testen in niet-trombotische, trombotische en posttrombotische diepe aders.

Knaagdier Inferieure Vena Cava Venoplastiek Ballon Model

Balloon venoplasty is a commonly used clinical technique to treat deep vein stenosis and occlusion as a consequence of trauma, congenital anatomic ...

rodent-inferior-vena-cava-venoplasty-balloon-model

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

De elektrolytische inductie van endotheel activatie aan het interne oppervlak van de vena cava inferior resulteert in een veneuze soort trombusvorming te wijten aan endotheel activatie en gedeeltelijke bloed stasis, twee componenten van de triade Virchow's.

Elektrolytische Inferior Vena Cava Model (EIM) van veneuze trombose

De muis volledige stase model van de vena cava inferior trombose levert kwantificeerbare hoeveelheden aderwand weefsel en trombus. Het is nuttig gebleken voor het evalueren van interacties tussen de ader muur en de occlusieve trombus en bij de beoordeling van de progressie van acute naar chronische ontsteking.

Muis Compleet Stasis Model van Inferior Vena Cava trombose

Om onze kennis van cellulaire en moleculaire neotissue vorming te verbeteren, werd een muizenmodel van het TEVG recent ontwikkelde. De transplantaten werden geïmplanteerd infrarenale vena cava tussenvoeging enten in C57BL / 6 muizen. Dit model behaalt dezelfde resultaten als die bereikt bij onze klinische onderzoek, maar over een veel kortere tijd-cursus.

Implantatie van de vena cava inferior Interpositie Graft in muismodel

Dit protocol maakt gebruik van een ballonkatheter om een ​​intraluminale blessure aan de rat halsslagader veroorzaken en voortaan ontlokken neointimale hyperplasie. Dit is een gevestigd model voor de studie van de mechanismen van vasculaire remodellering reactie op letsel. Het wordt ook veel gebruikt om de geldigheid van mogelijke therapeutische benaderingen te ontwikkelen.

Vasculaire Ballon Letsel en Intraluminale Administration in Rat halsslagader

Pulmonaire arteriële hypertensie (PAH) is een ziekte van pulmonaire arteriolen die leidt tot hun obliteratie en de ontwikkeling van rechterventrikelfalen. Rodentmodellen van PAH zijn cruciaal voor het begrijpen van de pathofysiologie van PAH. Hier demonstreren we hemodynamische karakterisering, met rechter hartkatheterisatie en echografie, bij de muis en de rat.

Hemodynamische karakterisatie van diermodellen van pulmonale arteriële hypertensie

We hebben een model van pericardiale patch-angioplastiek ontwikkeld dat kan worden gebruikt in zowel aders met een kleine diameter als in slagaders. Dit model kan worden gebruikt om veneuze en arteriële neointimale hyperplasievorming te vergelijken.

Patch angioplastie in het Rat Aorta of Inferior Vena Cava

We beschrijven hier stenose in de vena cava inferior als lymfkliertest model van diep-veneuze trombose. Dit model recapituleert bloed stroom beperking, een van de grote trekkers van veneuze trombose bij de mens.

Stenose van de Vena Cava Inferior: een lymfkliertest Model van diep-veneuze trombose

De wederopbouw van de suprahepatic vena cava (SHVC) blijft een moeilijke stap in rat orthotopic lever transplantatie. In dit artikel tonen we een stapsgewijze protocol voor SHVC wederopbouw in ratten met behulp van een roman magnetische wapendrager-techniek.

Een Rat Model van Orthotopic met behulp van een roman magnetische Anastomosis techniek voor Suprahepatic Vena Cava wederopbouw levertransplantatie

Een aortocaval fistel werd gecreëerd door het prikken van de Murine infra-nieraorta door beide muren in de inferieure Vena Cava en werd gevolgd door het creëren van een stenose in zijn uitstroom via gedeeltelijke ligatie van de inferieure vena cava. Dit reproduceerbare model kan worden gebruikt om centraal veneuze stenose te bestuderen.

Murine model van centraal veneuze stenose met behulp van Aortocaval fistel met een uitstroom stenose

Het huidige protocol is gericht op het experimenteel creëren van veneuze intimale hyperplasie door het onderwerpen van aderen aan arteriële bloeddruk voor het ontwikkelen van strategieën om veneuze intimale hyperplasie te verzachten na revascularisatie chirurgie met behulp van adergrafts.

Een konijn veneuze interposition model nabootsen revascularisatie chirurgie met behulp van ader grafts te beoordelen Intimal Hyperplasie onder arteriële bloeddruk

Een gedetailleerde methodologie voor het opstellen van een minimaal invasief rattenmodel van longembolie met behulp van autologe bloedstolsels wordt beschreven. Er worden ook aanvullende methoden geboden voor het kwantificeren van het infarctgebied en het visualiseren van de pulmonale arteriële boom.

Opstelling van een minimaal invasief rattenmodel van longembolie met behulp van autologe bloedstolsels

Leer een overlevingsmodel voor knaagdieren om venoplastieballoninterventies te testen bij veneuze trombose. Deze methode helpt onderzoekers het immuunsysteem en trombusdynamiek in vivo bestuderen.

Knaagdier Inferieure Vena Cava Venoplastiek Ballon Model

Meer video's verkennen