Het Mouse Stroke Unit Protocol met gestandaardiseerde neurologische scores voor translationele onderzoeken naar muisberoertes

Het muisberoertemodel met intravasculaire occlusie vertaalt de huidige trombectomie- en reperfusiebehandelingen goed, maar het vertaalt niet de effectieve routines van de klinische beroerte-eenheid. Hier in deze video demonstreren we ons bewezen translationele concept voor muisslageenheden en gestandaardiseerde neurologische beoordelingsschaal. De eerste methode van ons protocol verwijst naar de muisslageenheid.

Beoordeel dagelijks de klinische status van het dier en bereken de risicocertificeringsscore door punten bij elkaar op te tellen, zoals hier weergegeven. Pas de frequentie en intensiteit van de ondersteuning aan volgens de RSS en de fase na de beroerte van het dier. Voor actieve voedingsondersteuning pakt u de muis voorzichtig maar stevig vast vanuit zijn nekvacht.

Stabiliseer zijn wang met een middelvinger en schuif de middelvinger naar de neus van de muis tegen zijn wang en houd deze vast. Plaats de punt van de spuit tussen de tanden naar de binnenkant van de wang. Geef elke keer ongeveer 40 of 50 microliter gelvoeding.

Plaats de muis voorzichtig terug in de kooi en herhaal het voeren na één tot twee minuten. Vervolgens wordt de brandpuntscomponent van de experimentele lijnschaal gedemonstreerd. Begin met test één voor parese van de voorpoten.

Til de muis voorzichtig op van zijn staartbasis en onderzoek de voorpoten. Scoor nul voor symmetrische voorwaartse extensie en mobiliteit van de voorpoten. Scoor één voor milde flexie en verminderde beweging van contralesionale ledematen.

Scoor twee voor milde flexie van de contralesionale ledemaat. Scoor drie voor hechting van de contralesionale ledemaat aan de romp en scoor vier voor plegische ledemaat zonder ledemaat of lichaamsbeweging. Beoordeel nu de parese van de achterpoten.

Blijf de muis bij de staart vasthouden zoals in test één. Onderzoek de achterpoten, scoor nul voor symmetrische extensie en beweging van de achterpoten. Scoor één voor asymmetrie van de achterpoten met aanzienlijk verminderde beweging en asymmetrische positie van de contralesionale achterpoot.

Blijf de muis bij de staartbasis vasthouden om de symmetrie van de romp te beoordelen. Scoor nul voor normale symmetrische rompflexie naar beide zijden en geen aanhoudende rompflexie van meer dan 30 graden ten opzichte van de verticale as. Scoor er een voor een duidelijke rompflexie van meer dan 30 graden ten opzichte van de verticale as met contralesionale overheersing.

Test nu op cirkelgedrag. Plaats de muis voorzichtig op een vlakke ondergrond en laat hem minstens een minuut vrij bewegen. Observeer het bewegingspatroon.

Scoor nul als de muis snel en lineair beweegt. Scoor er een voor de neiging om naar één kant te draaien, maar niet in nauwe cirkels. Scoor twee voor gesloten inconstante cirkels aan één kant.

Scoor drie voor constante nauwe cirkels aan één kant en scoor vier voor draaien, zwaaien of helemaal geen beweging. Test nu op lichaamssymmetrie. Ga verder vanaf test vier en laat de muis vrij bewegen op het platte oppervlak.

Let op de as van neus tot staart. Scoor nul voor een normale houding, verhoogde romp vanaf de bank en rechte staart. Scoor er een voor lichte asymmetrie wanneer het lichaam iets naar één kant buigt en de staart distaal gebogen is.

Scoor twee voor matige asymmetrie wanneer het lichaam naar de contralesionale kant leunt of buigt en de staart proximaal gebogen is. Scoor drie voor prominente asymmetrie wanneer het lichaam gebogen is, één kant op de bank ligt en de staart duidelijk gebogen is. En scoor vier voor extreme asymmetrie wanneer het lichaam gebogen is en één kant constant op de bank ligt.

Ga nu voor test zes verder vanaf test vijf en observeer de manier van lopen. Controleer op motorische tekorten in het lopen. Scoor nul voor normaal lopen wanneer de ledematen flexibel, symmetrisch en snel zijn.

Scoor er een voor stijve, onbuigzame en langzamere gang zonder mank te lopen. Scoor twee voor duidelijk mank lopen met asymmetrische bewegingen. Scoor drie voor beven, drijven of vallen na een zachte duw.

Scoor vier voor geen spontane wandeling. Test nu op verplicht cirkelen. Houd de muis bij zijn staartbasis vast en til hem iets van het oppervlak zodat hij op zijn voorpoten loopt.

Observeer zijn beweging. Scoor nul voor normale lineaire beweging. Scoor er een voor de neiging om naar één kant te draaien.

Scoor er twee wanneer de muis naar één kant cirkelt bij volledig gesloten cirkels. Scoor er drie als het draait en zijn beweging traag is. En scoor vier als de muis niet vooruitgaat en het voorste deel van de romp op de bank ligt.

Hier beschrijven we hoe je de houdingstest uitvoert. Plaats de muis op uw handpalm zoals weergegeven in de video en zwaai deze voorzichtig heen en weer. Merk op hoe de muis zijn rechtopstaande positie behoudt en balanceert tegen zijwaartse krachten, zijn lichaam komt niet in contact met de handpalm of vingers.

Beeldmateriaal van verschillende scores van die test is niet nuttig, omdat de score sterk afhankelijk is van het detecteren van snelle en subtiele bewegingen van de muis die door de hand worden gevoeld en visuele aanwijzingen niet voldoende zijn om te scoren. Voor uw gemak beschrijven we elke partituur in de vorm van tekst. Beoordeel nu de plaatsing van de voorpoten.

Houd de muis vanaf zijn rug of vanaf zijn staartbasis vast en richt hem op de straal als een te bereiken doelwit. Let op symmetrisch uitreiken. Zodra het de balk vastpakt, trek je het voorzichtig weg en observeer je of de voorpoten symmetrisch loskomen.

Scoor nul voor symmetrisch uitreiken en loslaten. Scoor er één voor elke asymmetrie. Test nu op sensomotorische uitval van de voorpoten.

Houd de muis bij zijn rug vast zoals gedemonstreerd en stimuleer achtereenvolgens de voorpoten met een fijne punt. Scoor nul voor normale, snelle grijpbewegingen. Scoor er een voor het afwezig of duidelijk vertraagd vastpakken van de contralesionale voorpoot.

Test vervolgens zijn straal lopen. Plaats de muis op de balk met zijn neus-staartas evenwijdig eraan en laat hem balanceren of op de balk lopen. Observeer evenwicht, parese van ledematen en vallen.

Houd altijd uw hand onder het dier voor het geval het eraf valt. Scoor nul wanneer de muis in een stabiele houding balanceert en naar één kant van de straal loopt. Scoor er een als hij de zijkant van de balk vastpakt en er niet op loopt.

Houd er rekening mee dat het enige tijd nodig kan hebben om nog op de balk te balanceren. Scoor twee wanneer een ledemaat van de balk valt. Scoor drie als twee ledematen van de balk vallen.

Scoor vier wanneer de muis probeert te balanceren op de balk, maar er na 40 seconden af valt. Houd er rekening mee dat in deze test de muis maximaal 60 seconden moet worden geobserveerd. Scoor vijf als er een val is die plaatsvindt tussen 20 en 40 seconden.

En scoor zes als hij geen poging doet om te balanceren of aan de balk te hangen. Beoordeel het gevoel van de snorharen. Plaats de muis op een open werkblad en stimuleer de snorharen met succes met een dun wattenstaafje met lange punt.

Als u vanuit een blinde hoek komt, observeer dan de draaireactie. Scoor nul voor normaal snel draaien bij bilaterale stimulatie. Scoor één voor een langzamere contralesionale respons.

Scoor twee voor afwezige contralesionale respons. Scoor drie voor afwezige contralesionale en langzamere ipsilesionale respons. En scoor vier voor bilaterale afwezige respons.

Test op klimvermogen. Plaats de muis in het midden van een met rubber bekleed oppervlak in een hoek van 45 graden en observeer zijn reactie terwijl hij probeert te klimmen. Scoor nul wanneer de muis snel naar de top van het oppervlak klimt.

Scoor er een als het met spanning klimt en er zwakte van de ledematen aanwezig is. Scoor twee als hij de helling vasthoudt en niet wegglijdt of klimt. Scoor drie wanneer het van de helling glijdt ondanks inspanning om vallen te voorkomen.

En scoor er vier als het zonder moeite glijdt om vallen te voorkomen. Het protocol voor de eenheid muisberoerte heeft de overleving van muizen na de filamenteuze occlusie van de middelste hersenslagader reproduceerbaar ondersteund, met behoud van een overlevingspercentage van 80%. Als aanvulling op de focale ESS kunt u een laddersporttest gebruiken om zowel voor- als achterpootzwakte gedurende maximaal zes maanden te detecteren en te kwantificeren.