Name: Eiwittechniek door gist Surface Display (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-29T13:40:00.000+00:00
Duration: 5 min 49 s
Description: Leer gist surface display voor eiwittechniek om eiwitvarianten te verrijken die binden aan specifieke antigenen. Deze methode biedt precieze controle over selectieomstandigheden en flowcytometrische visualisatie tijdens het sorteerproces.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Eiwitfuncties optimaliseren door middel van technieken voor het weergeven van gistoppervlakken

<table><tbody><tr><td>10-bèta electrocompetent E. coli&nbsp;</td><td>NEB</td><td>C3020K</td><td></td></tr><tr><td>Agar-Agar, Kobe I</td><td>Carl Roth</td><td>5210.5</td><td></td></tr><tr><td>Ampicillin natriumzout</td><td>Carl Roth</td><td>K029.2</td><td></td></tr><tr><td>Anti-c-myc antilichaam, clone 9E10, AF488</td><td>Invitrogen</td><td>MA1-980-A488 (Thermo Fisher)</td><td></td></tr><tr><td>Anti-c-myc antilichaam, clone 9E10, AF647</td><td>Invitrogen</td><td>MA1-980-A647 (Thermo Fisher)</td><td></td></tr><tr><td>Anti-HA antilichaam, clone 16B12, AF488</td><td>BioLegend</td><td>901509 (Biozym)</td><td></td></tr><tr><td>Anti-HA antilichaam, clone 16B12, AF647</td><td>BioLegend</td><td>682404 (Biozym)</td><td></td></tr><tr><td>BamHI-HF</td><td>NEB</td><td>R3136S</td><td></td></tr><tr><td>Rund serum albumine, cold ethanol fractie</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A4503</td><td></td></tr><tr><td>Citroenzuur monohydraat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C1909</td><td></td></tr><tr><td>D-Galactose</td><td>Carl Roth</td><td>4987.2</td><td></td></tr><tr><td>D-Glucose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G8270</td><td></td></tr><tr><td>Difco gist stikstof base</td><td>Becton Dickinson (BD)&nbsp;</td><td>291940</td><td></td></tr><tr><td>Di-Natrium waterstof fosfaat heptahydraat</td><td>Carl Roth</td><td>X987.3</td><td></td></tr><tr><td>DL-Dithiothreitol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D0632</td><td></td></tr><tr><td>D-Sorbitol</td><td>Carl Roth</td><td>6213.1</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco&rsquo;s fosfaat gebufferde zoutoplossing (10x)</td><td>Thermo Scientific</td><td>14190169</td><td></td></tr><tr><td>Dynabeads Biotin Binder</td><td>Invitrogen</td><td>11047 (Fisher Scientific)</td><td></td></tr><tr><td>DynaMag-2 Magneet</td><td>Thermo Fisher</td><td>12321D</td><td></td></tr><tr><td>EBY100</td><td>ATCC</td><td>MYA-4941</td><td></td></tr><tr><td>Electroporatie cuvet 1 mm (voor E.coli)</td><td>VWR</td><td>732-1135</td><td></td></tr><tr><td>Electroporatie cuvet 2 mm (voor gist)</td><td>VWR</td><td>732-1136</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol absoluut</td><td>MERCK</td><td>1070172511</td><td></td></tr><tr><td>GeneMorph II Random Mutagenesis Kit</td><td>Agilent Technologies</td><td>200550</td><td></td></tr><tr><td>Gibco Bacto Casamino Zuren</td><td>Becton Dickinson (BD)</td><td>223120</td><td></td></tr><tr><td>Glycerol</td><td>AppliChem</td><td>131339.1211</td><td></td></tr><tr><td>LE agarose&nbsp;</td><td>Biozym</td><td>840004</td><td></td></tr><tr><td>Lithiumaccetaan dihydraat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L4158</td><td></td></tr><tr><td>Monarch DNA Gel Extractie Kit</td><td>NEB</td><td>T1020S</td><td></td></tr><tr><td>Monarch PCR &amp; DNA Cleanup Kit</td><td>NEB</td><td>T1030S</td><td></td></tr><tr><td>Multifuge 1S-R</td><td>Heraeus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>NheI-HF</td><td>NEB</td><td>R3131S</td><td></td></tr><tr><td>Outgrowth medium</td><td>NEB</td><td>B9035S</td><td></td></tr><tr><td>pCTCON2</td><td>Addgene</td><td>#41843</td><td></td></tr><tr><td>Penicilline G natriumzout</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P3032</td><td></td></tr><tr><td>Penta-His antilichaam, AF488</td><td>Qiagen</td><td>35310</td><td></td></tr><tr><td>Penta-His antilichaam, AF647</td><td>Qiagen</td><td>35370</td><td></td></tr><tr><td>Pepton ex caseine trachtisch verteerd</td><td>Carl Roth</td><td>8986.3</td><td></td></tr><tr><td>Q5 High-Fidelity DNA Polymerase&nbsp;</td><td>NEB</td><td>M0491S</td><td></td></tr><tr><td>SaII-HF</td><td>NEB</td><td>R3138S</td><td></td></tr><tr><td>Natriumacetaat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S8750-1KG</td><td></td></tr><tr><td>Natriumchloride</td><td>Carl Roth</td><td>3957.2</td><td></td></tr><tr><td>Natrium diwaterstoffosfaat monohydraat</td><td>Carl Roth</td><td>K300.2</td><td></td></tr><tr><td>Steritop draadgewonden flesdopfilter</td><td>MERCK</td><td>S2GPT01RE</td><td></td></tr><tr><td>Streptavidine, AF488</td><td>Invitrogen</td><td>S32354 (Thermo Fisher)</td><td></td></tr><tr><td>Streptavidine, AF647</td><td>Invitrogen</td><td>S32357 (Thermo Fisher)</td><td></td></tr><tr><td>Streptomycine sulfaat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S6501</td><td></td></tr><tr><td>Tri-Natrium citraat dihydraat</td><td>Carl Roth</td><td>4088.1</td><td></td></tr><tr><td>UV-Vis spectrofotometer</td><td>Agilent</td><td>8453</td><td></td></tr><tr><td>Gist extract, micro-gegranuleerd</td><td>Carl Roth</td><td>2904.4</td><td></td></tr><tr><td>Zymoprep Yeast Plasmid Miniprep II</td><td>Zymo Research</td><td>D2004&nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

eiwittechniek door gist surface display

Protein Engineering by Yeast Surface Display

Eiwittechniek door gist Surface Display

Protein engineering enables the improvement of existing functions of a given protein or the generation of novel functions. One of the most widely used and ...

protein-engineering-by-yeast-surface-display

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bio-engineering

We presenteren een gedetailleerd protocol om mutantenbibliotheken te construeren en te screenen voor gerichte evolutiecampagnes in Saccharomyces cerevisiae.

Geregisseerd Evolution Method in<em&gt; Saccharomyces cerevisiae</em&gt;: Mutant Bibliotheek Creatie en Screening

Hier introduceren we een protocol voor het gebruik van substraten met gistoppervlak voor enzymatische modificatietests. Het platform werd gedemonstreerd met behulp van de analyse van de defosforyleringsactiviteit van tyrosinefosfatase SHP-2 tegen een van zijn substraten als een representatieve enzymatische modificatietest.

Enzymatische modificatie en beoordeling van flowcytometrie van door het gistoppervlak weergegeven eiwitten

We hebben een gedecellulariseerde long extracellulaire matrix en nieuwe biomimetische bioreactor die kunnen worden gebruikt om functionele longweefsel te genereren. Door zaaien cellen in de matrix en het kweken in de bioreactor, genereren wij weefsel dat effectieve gasuitwisseling laat zien wanneer transplanted in vivo voor een korte periode van tijd.

Procedure voor Lung Techniek

We beschrijven een methode voor het meten bindingsenergie, worden uitgedrukt als weefsel oppervlaktespanning, tussen de cellen in 3D weefsel-achtige aggregaten. Verschillen in weefsel oppervlaktespanning is aangetoond dat zij correleren met invasiviteit van de longen, de spieren, en hersentumoren, en zijn fundamentele determinanten van oprichting van ruimtelijke relaties tussen de verschillende celtypen.

Meting van Aggregate samenhang door weefseloppervlak Tensiometry

Een veelzijdige plasma lithografie techniek is ontwikkeld om stabiel oppervlak patronen te genereren voor de begeleiding van cellulaire bevestiging. Deze techniek kan toegepast worden op mobiele netwerken, inclusief degenen die natuurlijke weefsels na te bootsen en is gebruikt voor het bestuderen van meerdere, verschillende celtypes te creëren.

Plasma Lithografie Surface Patterning voor de schepping van Cell Networks

Het ontwerp van een synthetische operon codeert voor zowel de secretoire inrichting en de structurele monomeren Curli vezels beschreven. Overproductie van deze amyloïden en hechtende polymeren kan een meetbare versterking van de hechting van...

Techniek Adherent Bacteriën door het creëren van een synthetische Curli Operon

Biocompatibele pH responsieve sol-gel nanosensors kan in poly (melkzuur-co-glycolzuur) (PLGA) electrospun steigers worden opgenomen. De geproduceerde zelfrapportage steigers kunnen worden gebruikt voor in situ bewaking van micromilieu omstandigheden tijdens het kweken van cellen op de scaffold. Dit is gunstig als de 3D cellulaire construct kan in real-time zonder de proef.

Zelfrapportage Stellingen voor 3-dimensionale Cultuur van de Cel

Werkwijze voor nanovezels en complexe nanostructuren verkrijgen uit een of meerdere extracellulaire matrixeiwitten beschreven. Deze methode maakt gebruik van proteïne-oppervlak interacties vrijstaande eiwit gebaseerde materialen maken met instelbare samenstelling en architectuur voor gebruik in een verscheidenheid van tissue engineering en biotechnologische toepassingen.

ECM Eiwit nanovezels en nanostructuren Engineered behulp-Surface geïnitieerde Vergadering

Hier presenteren we een protocol dat het gebruik van Kelvin sonde krachtmicroscopie uitlegt als een hulpmiddel voor het genereren van hoge resolutie nano-schaal oppervlaktepotentiaal kaarten. Dit hulpmiddel werd toegepast om de rol van oppervlaktepotentiaal op de bindingscapaciteit van micro-organismen aan substraatoppervlakken te beoordelen.

Oppervlakte Potentieel Meting van Bacteriën Met behulp Kelvin Probe Force Microscopy

Dit is een richtlijn voor het construeren van in vivo vasculair weefsel met behulp van een microchirurgische arterioveneuze lus of een doorstromende pedikkelconfiguratie binnen een weefselengineeringkamer. De gegenereerde vasculaire weefsels kunnen worden gebruikt voor orgaanregeneratie en vervanging van weefselderven, evenals voor medicijntesten en ziektemodellering.

Tissue Engineering door Intrinsic Vascularisatie in een<em&gt; In Vivo</em&gt; Tissue Engineering Chamber

Leer gist surface display voor eiwittechniek om eiwitvarianten te verrijken die binden aan specifieke antigenen. Deze methode biedt precieze controle over selectieomstandigheden en flowcytometrische visualisatie tijdens het sorteerproces.

Eiwittechniek door gist Surface Display

Meer video's verkennen