Een meervoudig geïntegreerd sociaal stressmodel voor psychiatrische stoornissen bij vrouwelijke C57BL/6J-muizen

Dit onderzoek heeft tot doel te begrijpen hoe chronische sociale stress leidt tot psychiatrische symptomen bij vrouwelijke muizen door een multi-geïntegreerd sociaal stressmodel op te zetten. De meeste momenteel beschikbare modellen voor psychiatrische stoornissen zijn opgesteld met behulp van mannelijke dieren. Dit protocol introduceert een nieuw muismodel dat is ontworpen om deze aandoeningen bij vrouwelijke muizen te bestuderen. Deze studie heeft een betrouwbaar diermodel ontwikkeld dat ons in staat stelt om de neurofysiologische mechanismen die ten grondslag liggen aan psychiatrische stoornissen bij vrouwelijke muizen te onderzoeken.

[Verteller] Plaats om te beginnen een 10 centimeter lange acrylbuis met een inwendige diameter van 26 millimeter in elke kooi van vrouwelijke proefmuizen en winnaarskandidaten, zodat ze kunnen acclimatiseren en leren er gedurende drie dagen doorheen te gaan. Om muizen te trainen voor buiscompetitie, pak je voorzichtig de staart van elke muis vast en plaats je deze op tafel. Houd vervolgens de muis bij de staart vast en plaats deze aan het ene uiteinde van de buis. Laat de staart los zodra de muis de buis binnengaat en laat deze vrijwillig passeren. Plaats nu de muis aan het andere uiteinde van de buis en herhaal dezelfde procedure. Nadat u het hele proces nog een keer hebt herhaald, plaatst u de muis terug in zijn thuiskooi. Maak voor het screenen van de winnaar een 30 centimeter lange acrylbuis met een inwendige diameter van 26 millimeter en teken een zichtbare middenlijn op de buis. Houd beide kandidaat-muizen bij hun staart vast en plaats ze aan weerszijden van de buis. Laat ze binnenkomen en elkaar in het midden ontmoeten, laat ze dan tegelijkertijd los en start de timer. Identificeer de winnaar als de muis die de ander uit de buis duwt en beloon hem met één punt. Breng beide muizen terug naar hun thuiskooi. Rangschik de muizen op basis van hun totale scores. Voor screening op CD1-agressor plaatst u een C57-mannetjesmuis gedurende drie minuten rechtstreeks in de thuiskooi van een CD1-mannetje. Registreer de latentie tot de eerste aanval, het aantal aanvallen en de duur van agressief gedrag binnen de periode van drie minuten als indicatoren van agressiviteit, en herhaal de screeningprocedure gedurende twee extra dagen. Voor het mislukken van de sociale competitie plaatst u een meervoudige geïntegreerde sociale stress- of MISS-muis en een winnaarsmuis aan weerszijden van de buis, zodat ze naar voren lopen en elkaar in het midden ontmoeten. De MISS muis wordt door de winnaar uit de buis geduwd. Wissel de posities van de twee muizen en herhaal de interactie. Breng vervolgens zowel de MISS- als de winnaarsmuizen terug naar hun thuiskooien. Voor de aangepaste modellering van plaatsvervangende sociale nederlaagstress, plaatst u een vrouwelijke MISS-muis in de kooi van een CD1-agressor, opgesloten onder een geperforeerde acrylhoes om plaatsvervangende observatie van agressieve interacties mogelijk te maken. Breng een mannelijke C57-indringermuis in de kooi om gedurende 10 minuten fysiek te worden aangevallen door de CD1-muis. Verwijder na 10 minuten de mannelijke indringer en geef de vrouwelijke MISS-muis en nog eens vijf minuten sensorische blootstelling aan de CD1-muis. Vervang na vijf minuten de CD1-muis door een nieuwe mannelijke C57-indringermuis en herhaal de hele procedure drie keer. Breng de MISS-muis vervolgens terug naar zijn thuiskooi. Om vervolgens onontkoombare overbevolkingsstress te modelleren, plaatst u een ondoorzichtige hoes in een standaard kooi met beddengoed. Introduceer dagelijks 30 minuten 12 tot 15 vrouwelijke muizen, ofwel alle MISS-muizen of gemengd met andere vrouwtjes in de mouw. Voor sociaal isolement, huisvest MISS-muizen individueel wanneer ze geen sociale competitie missen, plaatsvervangende nederlaagstress of overbevolkingsstress ondergaan voor de rest van de 10-daagse modelleringsperiode. De sucrose-voorkeurstest, die anhedonie evalueert door de voorkeur voor een zoete oplossing boven water te meten, toonde aan dat de sucrose-voorkeur significant lager was bij aan MISS blootgestelde muizen in vergelijking met naïeve controles. De totale vloeistofinname in de sucrosevoorkeurstest, inclusief zowel water als sucrose, verschilde niet significant tussen MISS en naïeve muizen, wat aangeeft dat de verminderde sucrosevoorkeur niet het gevolg was van veranderde vloeistofconsumptie. De staartsuspensietest, die gedragswanhoop beoordeelt door passieve immobiliteit te meten, onthulde dat aan MISS blootgestelde muizen significant langere immobiliteitstijden hadden dan naïeve muizen. Bovendien toonde de open veldtest die werd gebruikt om angst te evalueren door de tijd te meten die in het midden van een open arena werd doorgebracht, aan dat aan MISS blootgestelde muizen significant minder tijd in de centrale zone doorbrachten in vergelijking met naïeve muizen. Het verhoogde plus-doolhof, dat angst meet door het vermijden van open armen, toonde aan dat aan MISS blootgestelde muizen significant minder tijd in de open armen doorbrachten dan naïeve controles.