4 april 2025
Dit manuscript introduceert een gestandaardiseerd protocol voor een 5/6 nefrectomie door middel van scherpe bipolectomie via middellijnlaparotomie in een rattenmodel, met als doel een toestand van nierinsufficiëntie te induceren via nierparenchymreductie met een grote mate van methodische precisie en een laag risico op technische fouten.
De reikwijdte van dit specifieke gebied van ons onderzoek is het leveren van sterk gestandaardiseerde en gecontroleerde diermodellen voor specifieke aandoeningen en ziekten. Met behulp van dit protocol voor subtotale nefrectomie bieden we een gestandaardiseerd model voor nierinsufficiëntie bij ratten. Ons protocol biedt het voordeel van de intra-abdominale as voor andere viscerale organen.
Dit is vooral waardevol als gelijktijdige procedures op andere organen nodig zijn voor het gewenste diermodel. De meest relevante huidige experimentele uitdaging is het feit dat het chirurgisch verminderen van het totale nierparenchym met een gestandaardiseerde hoeveelheid niet noodzakelijkerwijs resulteert in dezelfde mate van nierinsufficiëntie. Verdere postoperatieve certificering door middel van laboratoriumtests kan dus nodig zijn.
Leg om te beginnen de polyfilamentligaturen, siliconenvatlussen, stompe revisieklemmen, fijne voorbereidingsscharen, tangen, hemostatische pleisters, belichtingsapparatuur, een verwarmingskussen en chirurgische voorbereidingshaken op de operatietafel. Dien aan de verdoofde rat 100% zuurstof toe via een neonataal gezichtsmasker. Scheer het gewenste toegangsgebied en desinfecteer de operatieplaats door gesteriliseerde wattenstaafjes in een cirkelvormige beweging aan te brengen met afwisselende scrubs van 70% ethanol en povidon-jodium.
Om een mediane mini-laparotomie uit te voeren, maakt u een eerste mediane huidincisie van ongeveer drie centimeter over de buik, gevolgd door een incisie in de fascia langs de linea alba. Bereik chirurgische blootstelling van de nier door chirurgische kompressen en voorbereidingshaken te plaatsen. Raak het nierparenchym vervolgens alleen aan met bevochtigde wattenstaafjes.
Stel de nier bloot door het perirenale vet vast te pakken dat aan de fascia van de Gerota is bevestigd. Oefen spanning uit om de fascia plaatselijk van het nierparenchym op te tillen. Snijd en ondermijn de fascia met het scherpe uiteinde van een schaarrand en ga verder met een longitudinale dissectie van de fascia van de Gerota.
Voer vervolgens een stompe degloving van de fascia van de Gerota uit met behulp van een gesloten schaar. Ondermijn geleidelijk de fascia rond het parenchym en vouw het fasciakapsel mediaal. Draag de nierhilum met een siliconen vaatlus voor een betere vasculaire controle.
Plaats de punt van de tang in de retroperitoneale ruimte om de nier te stabiliseren om een dorsale ontsnapping van de nier tijdens het snijproces te voorkomen. Voer vervolgens met een schaar de craniale scherpe eenderde niercolectomie uit in één nauwkeurig gerichte beweging. Bereik hemostase door een hemostatische pleister aan te brengen of handmatige compressie te gebruiken met stompe instrumenten.
U kunt ook een hilaire YASARGIL-klem aanbrengen om de bloedstroom te verminderen. Voer de caudale scherpe renale colectomie op dezelfde manier uit als de craniale colectomie. Gebruik een gehoekt dissectievlak om meer nierparenchym aan de hilaire zijde te behouden en minder aan de laterale zijde om hilair letsel te voorkomen en urineverlies uit het bekkensysteem te verminderen.
Na het mobiliseren van de nier, tunnelt u het nierhilum met behulp van stompe revisieklemmen, slingert u het nierhilum met een polyfilamentligatuur. Plaats een veilige schuifknoop op het nierhilum dicht bij de buikvaten om de nierbloedstroom en de urineleider af te sluiten. Ontleed de hilum scherp met een schaar en verwijder de nier.
Controleer vervolgens de hemostase en snijd de ligatuuruiteinden af. Plaats een hoekhechting op de abdominale fascia met behulp van een polyfilament hechtdraad. Ga door met het hechten van de abdominale fascia met een lopende hechtdraad, pak ongeveer twee millimeter weefsel per hap vast en plaats elke beet vier millimeter uit elkaar.
Hecht de huidlaag met enkele hechtingen, pak drie millimeter weefsel per hap en laat zes millimeter tussen elke steek. De fysiologische waarden van het resterende nierparenchym vertoonden oxygenatieniveaus van ongeveer 60%, wat wijst op levensvatbaarheid na resectie. Verkeerd geperfundeerd nierweefsel vertoonde significant lagere oxygenatieniveaus van 20,9%, consistent met niet-levensvatbaar weefsel.
Perfusiewaarden duidden op fysiologische perfusie in de overgebleven nier, waardoor de levensvatbaarheid van het weefsel werd versterkt.
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's
Dit manuscript presenteert een gestandaardiseerd protocol voor het uitvoeren van een 5/6 nefrectomie via scherpe bipolectomie in een ratmodel. Het doel is om renale insufficiëntie op te wekken met precisie en minimale technische fouten.
Een gestandaardiseerde 5/6 nefrectomie bij ratten biedt een robuust preklinisch model voor chronische nierziekte, wat mechanistische risicoreductie en translationele continuïteit in nieronderzoek mogelijk maakt. Dit model ondersteunt farmaceutische en biomoleculaire studies door reproduceerbare biologische complexiteit en toegang tot intraoperatieve beeldvormingsvalidatie te bieden. De precisie en reproduceerbaarheid ervan zijn cruciaal voor besluitvorming in de pijplijn en crossfunctionele R&D-afstemming bij de ontdekking van geneesmiddelen voor de nefrologie.
Dit model is geïntegreerd in het continuüm van ontdekking tot preklinisch onderzoek en ondersteunt de identificatie van lead-verbindingen, mechanistische studies en de translationele validatie van biomarkers in het nieronderzoek.