Name: Een kwantitatieve beoordeling van de fagocytose van allogene en xenogene erytrocyten door macrofagen van ratten in vitro (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-22T14:05:00.000+00:00
Duration: 9 min 1 s
Description: Ontdek een gestandaardiseerde methode om fagocytose van xenogene en allogene erytrocyten door ratmacrofagen kwantitatief te beoordelen. Dit protocol biedt een relatieve fagocytose-index en inzichten voor xenotransplantatie-onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Ito, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NOD%2FSCID%2FGAMMAC%28null%29+mouse%3A+An+excellent+recipient+mouse+model+for+engraftment+of+human+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">NOD/SCID/GAMMAC(null) mouse: An excellent recipient mouse model for engraftment of human cells.</a> Blood. 100 (9), 3175-3182 (2002).</li>
<li>Szpirer, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+models+of+human+diseases+and+related+phenotypes%3A+A+novel+inventory+of+causative+genes%5BTitle%5D)+AND+%22Mamm+Genome%22%5BJournal%5D)">Rat models of human diseases and related phenotypes: A novel inventory of causative genes.</a> Mamm Genome. 33 (1), 88-90 (2022).</li>
<li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival-assured+liver+injury+preconditioning+%28SALIC%29+enables+robust+expansion+of+human+hepatocytes+in+Fah+Rag2%28-%2F-%29+IL2rg%28-%2F-%29+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci+%28Weinh%29%22%5BJournal%5D)">Survival-assured liver injury preconditioning (SALIC) enables robust expansion of human hepatocytes in Fah Rag2(-/-) IL2rg(-/-) rats.</a> Adv Sci (Weinh). 8 (19), e2101188(2021).</li>
<li>Rongvaux, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corrigendum%3A+Development+and+function+of+human+innate+immune+cells+in+a+humanized+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Corrigendum: Development and function of human innate immune cells in a humanized mouse model.</a> Nat Biotechnol. 35 (12), 1211(2017).</li>
<li>Furuya, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+evidence+of+a+macrophage+barrier+in+the+xenotransplantation+of+human+hematopoietic+stem+cells+to+severely+immunodeficient+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Xenotransplantation%22%5BJournal%5D)">The evidence of a macrophage barrier in the xenotransplantation of human hematopoietic stem cells to severely immunodeficient rats.</a> Xenotransplantation. 28 (4), e12702(2021).</li>
<li>Barclay, A. N., Van den Berg, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+interaction+between+signal+regulatory+protein+alpha+%28SIRP%CE%B1%29+and+CD47%3A+Structure%2C+function%2C+and+therapeutic+target%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">The interaction between signal regulatory protein alpha (SIRPα) and CD47: Structure, function, and therapeutic target.</a> Annu Rev Immunol. 32, 25-50 (2014).</li>
<li>Ide, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+for+CD47-SIRPalpha+signaling+in+xenograft+rejection+by+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Role for CD47-SIRPalpha signaling in xenograft rejection by macrophages.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 104 (12), 5062-5066 (2007).</li>
<li>Matlung, H. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+CD47-SIRP%CE%B1+signaling+axis+as+an+innate+immune+checkpoint+in+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Immunol+Rev%22%5BJournal%5D)">The CD47-SIRPα signaling axis as an innate immune checkpoint in cancer.</a> Immunol Rev. 276 (1), 145-164 (2017).</li>
<li>Oldenborg, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+CD47+as+a+marker+of+self+on+red+blood+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Role of CD47 as a marker of self on red blood cells.</a> Science. 288 (5473), 2051-2054 (2000).</li>
<li>Gu, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+quantitative+method+for+measuring+innate+phagocytosis+by+human+monocytes+using+real-time+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+A%22%5BJournal%5D)">A quantitative method for measuring innate phagocytosis by human monocytes using real-time flow cytometry.</a> Cytometry A. 85 (4), 313-321 (2014).</li>
<li>Joffe, A. M., Bakalar, M. H., Fletcher, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage+phagocytosis+assay+with+reconstituted+target+particles%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Macrophage phagocytosis assay with reconstituted target particles.</a> Nat Protoc. 15 (7), 2230-2246 (2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0,05% Trypsin-EDTA</td><td>ThermoFisher</td><td>25300062</td><td></td></tr><tr><td>Deep Red Cell Tracker</td><td>ThermoFisher</td><td>&nbsp;C34565</td><td>Het poeder (15 &mu;g) werd opgelost in DMSO (20 &mu;L)</td></tr><tr><td>Dimethyl Sulfoxide (DMSO)</td><td>Sigma</td><td>D2650</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline (DPBS)</td><td>ThermoFisher</td><td>C10010500BT</td><td></td></tr><tr><td>Ficoll-Paque PLUS</td><td>Cytiva</td><td>17144002</td><td></td></tr><tr><td>Ficoll-Paque PREMIUM</td><td>Cytiva</td><td>17544602</td><td></td></tr><tr><td>Mouse Anti-Human CD235a BV421 Antibody</td><td>BD Biosciences</td><td>562938</td><td></td></tr><tr><td>Mouse Anti-Rat CD163 FITC Antibody</td><td>BIO-RAD</td><td>MCA342F</td><td></td></tr><tr><td>Protein K</td><td>Sigma</td><td>P2308</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640</td><td>ThermoFisher</td><td>11875093</td><td></td></tr></tbody></table>

een kwantitatieve beoordeling van de fagocytose van allogene en xenogene erytrocyten door macrofagen van ratten in vitro

A Quantitative Assessment of the Phagocytosis of Allogeneic and Xenogeneic Erythrocytes by Rat Macrophages In Vitro

Een kwantitatieve beoordeling van de fagocytose van allogene en xenogene erytrocyten door macrofagen van ratten in vitro

Xenogeneic cell transplantation often faces significant immune rejection, even in immunodeficient animal models. Among residual immune components, ...

a-quantitative-assessment-phagocytosis-allogeneic-xenogeneic

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie en Infectie

Een nieuwe methode om macrofagen te verkrijgen van de primaire cultuur van de levercellen wordt beschreven. Deze methode maakt gebruik van de proliferatie van macrofagen in de cultuur, gevolgd door het schudden van de cultuur kolven en zuivering door middel van selectieve gehechtheid aan plastic schaaltjes. Deze techniek biedt een efficiënte lever macrofagen, zonder ingewikkelde apparatuur en vaardigheden.

Een eenvoudige en efficiënte methode om macrofagen Isolaat van Mixed primaire culturen van Adult levercellen

Source: Nagre, N., et al. Alveolar Macrophage Phagocytosis and Bacteria Clearance in Mice. J. Vis. Exp. (2019).This video demonstrates the assessment of complement receptor-mediated phagocytosis using sheep red blood cells opsonized with IgM and complement, followed by their uptake by mouse macrophages. The extent of phagocytosis is quantified by measuring a blue chromogenic product formed through hemoglobin-catalyzed oxidation of diaminofluorene.

Modeling Complement-Mediated Phagocytosis Using Opsonized Red Blood Cells In Vitro

This video demonstrates an assay to monitor independent macrophage-mediated red blood cell (RBC) phagocytosis events. Mouse immunoglobulin G (IgG)-opsonized human RBCs are incubated with mouse macrophages and observed under a confocal microscope. The RBCs are engulfed by macrophages via a phagocytic cup formation and targeted for lysosomal degradation.

Real-Time Imaging of Macrophage Phagocytosis of IgG-Opsonized Red Blood Cells

This video demonstrates a flow cytometry-based phagocytosis assay involving labeled and opsonized Plasmodium falciparum-infected erythrocytes by monocytes. Flow cytometry identifies fluorescence in monocytes, confirming the successful identification of opsonized erythrocytes through phagocytosis.

An Assay for Quantifying Antibody-Mediated Phagocytosis of Parasite-Infected Erythrocytes

This video showcases a monocyte monolayer assay utilizing primary monocytes from peripheral blood to assess Fcγ receptor-mediated phagocytosis with poly D antibody-opsonized R2R2 red blood cells.

An Assay for Studying Fc&#947; Receptor-Driven Phagocytosis in Monocyte Monolayers

Microgliale fagocytose is essentieel voor het behoud van weefselhomeostase en onvoldoende fagocytosefunctietesten is betrokken bij pathologie. Echter, het beoordelen van microglia functie in vivo is technisch uitdagend. We hebben een eenvoudige maar robuuste techniek ontwikkeld voor het nauwkeurig bewaken en kwantificeren van de fagocytische potentieel van microglia in een fysiologische omgeving.

Het beoordelen van het netvlies Microgliale fagocytosefunctietesten<em&gt; In Vivo</em&gt; Met behulp van een flowcytometrie-gebaseerde test

De monocyt monolaag assay (MMA) is een in vitro assay dat geïsoleerde primaire monocyten gebruikt, verkregen uit perifeer vol bloed van zoogdieren, om Fcγ receptor (FcγR)-gemedieerde fagocytose te evalueren.

Toepassing van een monocyt monolaag Gehalte aan Fcy receptor-gemedieerde fagocytose evalueren

Hier beschrijven we methoden draaiende schijf confocale microscopie afbeelding één fagocytische gebeurtenissen via muis resident peritoneale macrofagen. De protocollen kunnen worden uitgebreid tot andere fagocytische cellen.

Time-lapse 3D beeldvorming van fagocytose door macrofagen van de muis

Hier presenteren we een protocol om te beoordelen van muis peritoneale macrofaag fagocytose met behulp van verbeterde groene fluorescentie eiwit-uiting van Escherichia coli.

Met behulp van verbeterde eiwit-uiting van groene fluorescentie Escherichia Coli te beoordelen muis peritoneale Macrophage fagocytose

Wij rapporteren hier gemeenschappelijke methoden voor het analyseren van de fagocytische functie van lymfkliertest alveolaire macrofagen en bacteriële klaring van de Long. Deze methoden bestuderen in vitro fagocytose van fluoresceïne isothiocyanaat kralen en in vivo fagocytose van Pseudomonas aeruginosa Green Fluorescent Protein. Ook beschrijven we een methode voor het ontruimen van P. aeruginosa bij muizen.

Alveolaire macrofaag fagocytose en bacteriën mijnen in muizen

We hebben verbeteringen en bijgewerkte methoden ontwikkeld voor de bestaande monocyt-monolaagtest (MMA), waarin macrofagen worden gebruikt om de klinische relevantie van allo-antilichamen van rode bloedcellen in transfusiegeneeskunde en immunologie beter te voorspellen. Deze test wordt de monocyt-macrofaagtest (M-MA) genoemd.

Voorspelling van de significantie van antilichamen tegen rode bloedcellen met behulp van de monocyt-macrofaagtest

Ontdek een gestandaardiseerde methode om fagocytose van xenogene en allogene erytrocyten door ratmacrofagen kwantitatief te beoordelen. Dit protocol biedt een relatieve fagocytose-index en inzichten voor xenotransplantatie-onderzoek.

Een kwantitatieve beoordeling van de fagocytose van allogene en xenogene erytrocyten door macrofagen van ratten in vitro

Meer video's verkennen