Name: Modellering van dysplastisch en functioneel longalveolair herstel na griepinfectie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-19T14:10:00.000+00:00
Duration: 7 min 45 s
Description: Leer intranasale toediening van influenzavirus en analyse van longschade bij muizen. Deze methode onthult transcriptieveranderingen in endotheelcellen en alveolaire macrofagen voor onderzoek naar longherstel.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Mammoto, A., Mammoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+niche+in+lung+alveolar+development%2C+homeostasis%2C+and+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Bioeng+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Vascular niche in lung alveolar development, homeostasis, and regeneration.</a> Front Bioeng Biotechnol. 7, 318(2019).</li>
<li>Tsikis, S. T., Hirsch, T. I., Fligor, S. C., Quigley, M., Puder, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+the+lung+endothelial+niche+to+promote+angiogenesis+and+regeneration%3A+a+review+of+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Biosci%22%5BJournal%5D)">Targeting the lung endothelial niche to promote angiogenesis and regeneration: a review of applications.</a> Front Mol Biosci. 9, 1093369(2022).</li>
<li>Torrego, A., Pajares, V., Mola, A., Lerma, E., Franquet, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influenza+A+%28H1N1%29+organising+pneumonia%3A+figure+1%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ+Case+Rep%22%5BJournal%5D)">Influenza A (H1N1) organising pneumonia: figure 1.</a> BMJ Case Rep. 2010, bcr1220092531(2010).</li>
<li>Murota, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influenza+H1N1+virus-associated+pneumonia+often+resembles+rapidly+progressive+interstitial+lung+disease+seen+in+collagen+vascular+diseases+and+COVID-19+pneumonia%3B+CT-pathologic+correlation+in+24+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Radiol+Open%22%5BJournal%5D)">Influenza H1N1 virus-associated pneumonia often resembles rapidly progressive interstitial lung disease seen in collagen vascular diseases and COVID-19 pneumonia; CT-pathologic correlation in 24 patients.</a> Eur J Radiol Open. 7, 100297(2020).</li>
<li>Niethamer, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defining+the+role+of+pulmonary+endothelial+cell+heterogeneity+in+the+response+to+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Defining the role of pulmonary endothelial cell heterogeneity in the response to acute lung injury.</a> eLife. 9, e53072(2020).</li>
<li>Klomp, M., Ghosh, S., Mohammed, S., Khan, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+virus+to+inflammation%2C+how+influenza+promotes+lung+damage%5BTitle%5D)+AND+%22J+Leukoc+Biol%22%5BJournal%5D)">From virus to inflammation, how influenza promotes lung damage.</a> J Leukoc Biol. 110 (1), 115-122 (2021).</li>
<li>Newton, A. H., Cardani, A., Braciale, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+host+immune+response+in+respiratory+virus+infection%3A+balancing+virus+clearance+and+immunopathology%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Immunopathol%22%5BJournal%5D)">The host immune response in respiratory virus infection: balancing virus clearance and immunopathology.</a> Semin Immunopathol. 38 (4), 471-482 (2016).</li>
<li>Jones, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+injury-induced+mesenchymal-epithelial+cell+niche+coordinates+regenerative+responses+in+the+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">An injury-induced mesenchymal-epithelial cell niche coordinates regenerative responses in the lung.</a> Science. 386 (6727), eado5561(2024).</li>
<li>Niethamer, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Longitudinal+single-cell+profiles+of+lung+regeneration+after+viral+infection+reveal+persistent+injury-associated+cell+states%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Longitudinal single-cell profiles of lung regeneration after viral infection reveal persistent injury-associated cell states.</a> Cell Stem Cell. 32 (2), 302-321.e6 (2025).</li>
<li>Belser, J. A., Gustin, K. M., Katz, J. M., Maines, T. R., Tumpey, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+traditional+intranasal+and+aerosol+inhalation+inoculation+of+mice+with+influenza+A+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22Virology%22%5BJournal%5D)">Comparison of traditional intranasal and aerosol inhalation inoculation of mice with influenza A viruses.</a> Virology. 481, 107-112 (2015).</li>
<li>Oltean, T., Maelfait, J., Saelens, X., Vandenabeele, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Need+for+standardization+of+influenza+A+virus-induced+cell+death+in+vivo+to+improve+consistency+of+inter-laboratory+research+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Discov%22%5BJournal%5D)">Need for standardization of influenza A virus-induced cell death in vivo to improve consistency of inter-laboratory research findings.</a> Cell Death Discov. 10 (1), 247(2024).</li>
<li>Nguyen, T. -Q., Rollon, R., Choi, Y. -K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+influenza+research%3A+strengths+and+weaknesses%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">Animal models for influenza research: strengths and weaknesses.</a> Viruses. 13 (6), 1011(2021).</li>
<li>Jin, X. -Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+pathogenicity+of+influenza+virus-induced+pneumonia+mouse+model+following+intranasal+and+aerosolized+intratracheal+inoculation%5BTitle%5D)+AND+%22Virol+J%22%5BJournal%5D)">Comparative pathogenicity of influenza virus-induced pneumonia mouse model following intranasal and aerosolized intratracheal inoculation.</a> Virol J. 21 (1), 240(2024).</li>
<li>Revelli, D. A., Boylan, J. A., Gherardini, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+non-invasive+intratracheal+inoculation+method+for+the+study+of+pulmonary+melioidosis%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Infect+Microbiol%22%5BJournal%5D)">A non-invasive intratracheal inoculation method for the study of pulmonary melioidosis.</a> Front Cell Infect Microbiol. 2, 164(2012).</li>
<li>Cantu, A., Gutierrez, M. C., Dong, X., Leek, C., Anguera, M., Lingappan, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+recovery+from+neonatal+hyperoxic+lung+injury+by+sex+as+a+biological+variable%5BTitle%5D)+AND+%22Redox+Biol%22%5BJournal%5D)">Modulation of recovery from neonatal hyperoxic lung injury by sex as a biological variable.</a> Redox Biol. 68, 102933(2023).</li>
<li>Sunagar, R., Kumar, S., Namjoshi, P., Rosa, S. J., Hazlett, K. R. O., Gosselin, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+an+outbred+mouse+model+for+Francisella+tularensis+vaccine+development+and+testing%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Evaluation of an outbred mouse model for Francisella tularensis vaccine development and testing.</a> PLoS One. 13 (12), e0207587(2018).</li>
<li>Cowley, P. M., Roberts, C. R., Baker, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+the+health+status+of+mice+with+bleomycin-induced+lung+injury+by+using+body+condition+scoring%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Med%22%5BJournal%5D)">Monitoring the health status of mice with bleomycin-induced lung injury by using body condition scoring.</a> Comp Med. 69 (2), 95-102 (2019).</li>
<li>Gonzalez, A. J., Ijezie, E. C., Balemba, O. B., Miura, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Attenuation+of+influenza+A+virus+disease+severity+by+viral+coinfection+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">Attenuation of influenza A virus disease severity by viral coinfection in a mouse model.</a> J Virol. 92 (23), e00881-e00918 (2018).</li>
<li>Lv, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinetics+of+pulmonary+immune+cells%2C+antibody+responses+and+their+correlations+with+the+viral+clearance+of+influenza+A+fatal+infection+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Virol+J%22%5BJournal%5D)">Kinetics of pulmonary immune cells, antibody responses and their correlations with the viral clearance of influenza A fatal infection in mice.</a> Virol J. 11, 57(2014).</li>
<li>Liberti, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolar+epithelial+cell+fate+is+maintained+in+a+spatially+restricted+manner+to+promote+lung+regeneration+after+acute+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Alveolar epithelial cell fate is maintained in a spatially restricted manner to promote lung regeneration after acute injury.</a> Cell Rep. 35 (6), 109092(2021).</li>
<li>Cipolla, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhalable+and+nasal+biologics%3A+analytical%2C+formulation%2C+development%2C+and+regulatory+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Aerosol+Med+Pulm+Drug+Deliv%22%5BJournal%5D)">Inhalable and nasal biologics: analytical, formulation, development, and regulatory considerations.</a> J Aerosol Med Pulm Drug Deliv. 2024, (2025).</li>
<li>Cardiff, R. D., Miller, C. H., Munn, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Manual+hematoxylin+and+eosin+staining+of+mouse+tissue+sections%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb+Protoc%22%5BJournal%5D)">Manual hematoxylin and eosin staining of mouse tissue sections.</a> Cold Spring Harb Protoc. 2014 (6), (2014).</li>
<li>Bouvier, N. M., Lowen, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+influenza+virus+pathogenesis+and+transmission%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">Animal models for influenza virus pathogenesis and transmission.</a> Viruses. 2 (8), 1530-1563 (2010).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1.5 mL tube&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-682-557</td><td></td></tr><tr><td>100 &micro;m celstrainer</td><td>Falcon</td><td>352360</td><td></td></tr><tr><td>15 mL conische buis</td><td>Falcon</td><td>352196</td><td></td></tr><tr><td>1x PBS</td><td>Gibc0</td><td>10010-023</td><td></td></tr><tr><td>40 &micro;m celstrainer</td><td>Falcon</td><td>352340</td><td></td></tr><tr><td>5 mL buis</td><td>Globe</td><td>6101C</td><td></td></tr><tr><td>50 mL conische buis</td><td>Falcon</td><td>352098</td><td></td></tr><tr><td>A/PR/8/34 Influenza Virus stock</td><td>ATCC&nbsp;</td><td>VR-95PQ</td><td>Verschillende partijen hebben een verschillend virustiter</td></tr><tr><td>ACK Lysis Buffer</td><td>Quality Biological</td><td>118-156-101</td><td></td></tr><tr><td>Anti-TRKB Antilichaam</td><td>R&amp;D Systems</td><td>AF1494</td><td></td></tr><tr><td>Bleekmiddel</td><td>Clorox</td><td></td><td>10% Bleekmiddel</td></tr><tr><td>Bovine Serum Albumine</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A8022</td><td></td></tr><tr><td>CO2 Anesthesie Inductie Kamer</td><td>Elke</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Collagenase Type I</td><td>Gibco</td><td>17100017</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Milipore Sigma</td><td>28718-90-3</td><td></td></tr><tr><td>Dispase</td><td>Corning</td><td>CB-40235</td><td></td></tr><tr><td>Dissectiegereedschap: schaar, gebogen pincet, recht pincet</td><td>Elke</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Dnase</td><td>Sigma Aldrich</td><td>4716728001</td><td></td></tr><tr><td>D-PBS</td><td>Corning</td><td>21-031-CM</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Pharmco</td><td>111000200</td><td></td></tr><tr><td>Glazen flesjes</td><td>DWK Life Sciences</td><td>986562</td><td></td></tr><tr><td>IJsemmer</td><td>Elke</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Isofluraan</td><td>Covetrus</td><td>29404</td><td></td></tr><tr><td>Naalden, 21&ndash;23 G</td><td>Elke</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>P20/P200 pipet&nbsp;</td><td>Pipetman</td><td>F144056M/F144058M,</td><td></td></tr><tr><td>P20/P200 pipettips</td><td>Thomas Scientific</td><td>1159M43/1159M40</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyd (PFA)&nbsp;</td><td>Thermo Scientific</td><td>J19943-k2</td><td>2%PFA</td></tr><tr><td>Pipetman</td><td>Elke</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Kunststof of kartonnen vriesdozen</td><td>Elke</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Veiligheidsmes</td><td>Elke</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Ring Stand</td><td>Elke</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Serologische pipetten, 5 mL</td><td>Falcon</td><td>357543</td><td></td></tr><tr><td>Slide Top Inductie Muis Isofluraan Kamer</td><td>Somni Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hechtdraad</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9422522</td><td></td></tr><tr><td>Spuitbuis en luer-locks</td><td>Elke</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Spuit, 10 mL</td><td>Elke</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Bureauanesthesie Machine Isofluraan</td><td>Ohmeda</td><td>Ohmeda Isotec- 4</td><td>De stroomsnelheid moet 2.5&ndash;3% zijn</td></tr><tr><td>Ultra-lage smeltpunt agarose</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A5030-1G</td><td></td></tr><tr><td>Weegschaal</td><td>OHAUS</td><td>CS200</td><td></td></tr></tbody></table>

modellering van dysplastisch en functioneel longalveolair herstel na griepinfectie

Modeling Dysplastic and Functional Lung Alveolar Repair after Influenza Infection

Modellering van dysplastisch en functioneel longalveolair herstel na griepinfectie

Viral infection causes both acute and long-term damage to the lung alveolus, the specialized tissue structure responsible for gas exchange between the ...

modeling-dysplastic-functional-lung-alveolar-repair-after-influenza

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie en Infectie

We beschrijven de snelle isolatie van primaire murine type II alveolaire epitheelcellen (AECII) door flowcytometrische negatieve selectie. Deze AECII vertonen hoge levensvatbaarheid en zuiverheid en zijn geschikt voor diverse functionele en moleculaire studies over hun rol bij luchtwegaandoeningen zoals auto of infectieziekten.

Flowcytometrische Isolatie van primaire Murine Type II alveolaire epitheelcellen voor Functionele en moleculaire studies

We hebben een muislongletselmodel ontwikkeld door intra-tracheale injectie van bacteriën Pseudomonas aeruginosa. Dit model bootst longletsel tijdens pneumonie na en is klinisch relevant.

Pseudomonas aeruginosa Induced Lung Injury Model

We beschrijven een manier om snel en eenvoudig de long diffusiecapaciteit bij muizen te meten en laten zien dat het voldoende gevoelig is voor fenotypeveranderingen in meerdere veelvoorkomende longpathologieën. Deze metriek brengt dus directe translationele relevantie voor de muismodellen, aangezien diffusiecapaciteit ook gemakkelijk bij mensen kan worden gemeten.

Fenotypering Mouse Longfunctie In Vivo Met de Lung diffusiecapaciteit

Muizen pneumonectomie is een veel gebruikt model van compenserende longgroei. Deze procedure kan worden gebruikt in combinatie met lijn tracing of transgene muismodellen om de onderliggende mechanismen te verduidelijken.

Muis Pneumonectomie Model van Compenserende Lung Groei

Interne longoppervlakte (ISA) is een kritisch criterium voor de beoordeling van longmorfologie en fysiologie bij longziekten en schade-geïnduceerde alveolaire regeneratie. We beschrijven hier een gestandaardiseerde methode die de metafora voor ISA kan minimaliseren in zowel longpneumonectomy als protes implantatie muis modellen.

Een gestandaardiseerde methode voor het meten van het interne longoppervlak door middel van muizenpneumonectomy en prothese implantatie

Hier presenteren we methoden om secundaire bacteriële pneumonie onderzoeken te verbeteren door een niet-invasieve route van instillatie in de onderste luchtwegen te bieden, gevolgd door pathogeen herstel en transcriptie analyse. Deze procedures zijn reproduceerbaar en kunnen worden uitgevoerd zonder gespecialiseerde apparatuur zoals canules, geleidings draden of glasvezelkabels.

Een nauwkeurig pathogeen lever-en Terugwinningssysteem voor Muriene modellen van secundaire bacteriële pneumonie

Dit manuscript beschrijft de opstelling van een infectieus model van longontsteking bij muizen en de respectieve karakterisering van letselresolutie, samen met methoden voor het kweken van bacteriën en intratracheale instillatie. Een nieuwe benadering met behulp van hoogdimensionale flowcytometrie om het immuunlandschap te evalueren, wordt ook beschreven.

Experimenteel model om de resolutie van longontsteking te evalueren

Long-op-chip-modellen overtreffen traditionele 2D-culturen door de lucht-vloeistofinterface en endotheelcelperfusie na te bootsen, waardoor de bloedstroom en de uitwisseling van voedingsstoffen worden gesimuleerd die cruciaal zijn voor longfysiologiestudies. Dit verhoogt de relevantie van longonderzoek en biedt een dynamische, fysiologisch nauwkeurige omgeving om het begrip en de behandeling van luchtweginfecties te bevorderen.

Immunocompetent alveolus-op-chip-model voor het bestuderen van alveolaire mucosale immuunresponsen

Dit protocol demonstreert de orofaryngeale aspiratietechniek voor gebruik in het bleomycine muizenmodel van longfibrose.

orofaryngeale toediening van bleomycine in het muizenmodel van longfibrose

Dit protocol schetst een methode voor het induceren van longfibrose bij muizen door herhaalde orofaryngeale toediening van bleomycine, wat pathologische kenmerken oplevert die sterk lijken op die van idiopathische longfibrose.

Verfijnd muizenmodel van idiopathische longfibrose

Leer intranasale toediening van influenzavirus en analyse van longschade bij muizen. Deze methode onthult transcriptieveranderingen in endotheelcellen en alveolaire macrofagen voor onderzoek naar longherstel.

Modellering van dysplastisch en functioneel longalveolair herstel na griepinfectie

Meer video's verkennen