Name: Verbeterde ruimtelijke mapping van maagspierlagen van de muis met behulp van een aangepaste Swiss roll-techniek (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-25T14:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 18 s
Description: Leer een aangepaste Swiss roll-techniek voor geheel-maag immunokleuring bij muizen. Deze methode behoudt ruimtelijke oriëntatie en maakt gelijktijdige visualisatie van alle maagregio's in één sectie mogelijk voor betrouwbaar histologisch onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Chaudhry, S. R., Liman, M. N. P., Omole, A. E., Peterson, D. C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aChaudhry%2C+SR+%22Anatomy%2C+abdomen+and+pelvis%3A+Stomach%22">Anatomy, abdomen and pelvis: Stomach</a>. , StatPearls. (2025).</li>
<li>Sanders, K. M., Drumm, B. T., Cobine, C. A., Baker, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ca%282%2B%29+dynamics+in+interstitial+cells%3A+Foundational+mechanisms+for+the+motor+patterns+in+the+gastrointestinal+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Ca(2+) dynamics in interstitial cells: Foundational mechanisms for the motor patterns in the gastrointestinal tract.</a> Physiol Rev. 104 (1), 329-398 (2024).</li>
<li>Moolenbeek, C., Ruitenberg, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+%26%2334%3BSwiss+roll%26%2334%3B%3A+A+simple+technique+for+histological+studies+of+the+rodent+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">The &#34;Swiss roll&#34;: A simple technique for histological studies of the rodent intestine.</a> Lab Anim. 15 (1), 57-59 (1981).</li>
<li>Li, S., You, S., Mao, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+multiplex+immunofluorescence+imaging+of+mouse+intestinal+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for multiplex immunofluorescence imaging of mouse intestinal tumors.</a> STAR Protoc. 6 (2), 103776(2025).</li>
<li>Bialkowska, A. B., Ghaleb, A. M., Nandan, M. O., Yang, V. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+Swiss-rolling+technique+for+intestinal+tissue+preparation+for+immunohistochemical+and+immunofluorescent+analyses%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Improved Swiss-rolling technique for intestinal tissue preparation for immunohistochemical and immunofluorescent analyses.</a> J Vis Exp. (113), e54161(2016).</li>
<li>Dooley, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimized+protocol+for+intestinal+Swiss+rolls+and+immunofluorescent+staining+of+paraffin-embedded+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Optimized protocol for intestinal Swiss rolls and immunofluorescent staining of paraffin-embedded tissue.</a> J Vis Exp. (209), e66977(2024).</li>
<li>Hayashi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet-derived+growth+factor+receptor-alpha+regulates+proliferation+of+gastrointestinal+stromal+tumor+cells+with+mutations+in+KIT+by+stabilizing+ETV1%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Platelet-derived growth factor receptor-alpha regulates proliferation of gastrointestinal stromal tumor cells with mutations in KIT by stabilizing ETV1.</a> Gastroenterology. 149 (2), 420-432.e16 (2015).</li>
<li>Hayashi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TRP53-mediated+cell+cycle+arrest+of+precursors+underlies+interstitial+cell+of+Cajal+depletion+during+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">TRP53-mediated cell cycle arrest of precursors underlies interstitial cell of Cajal depletion during aging.</a> Cell Mol Gastroenterol Hepatol. 11 (1), 117-145 (2021).</li>
<li>Rothenberg, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+a+cKit%28%2B%29+colonic+crypt+base+secretory+cell+that+supports+Lgr5%28%2B%29+stem+cells+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Identification of a cKit(+) colonic crypt base secretory cell that supports Lgr5(+) stem cells in mice.</a> Gastroenterology. 142 (5), 1195-1205 (2012).</li>
<li>Gomez-Pinilla, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ano1+is+a+selective+marker+of+interstitial+cells+of+Cajal+in+the+human+and+mouse+gastrointestinal+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Gastrointest+Liver+Physiol%22%5BJournal%5D)">Ano1 is a selective marker of interstitial cells of Cajal in the human and mouse gastrointestinal tract.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 296 (6), G1370-G1381 (2009).</li>
<li>Lee, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anoctamin+1%2FTMEM16A+controls+intestinal+Cl%28-%29+secretion+induced+by+carbachol+and+cholera+toxin%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Anoctamin 1/TMEM16A controls intestinal Cl(-) secretion induced by carbachol and cholera toxin.</a> Exp Mol Med. 51 (8), 1-14 (2019).</li>
<li>Uhlen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-based+map+of+the+human+proteome%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Tissue-based map of the human proteome.</a> Science. 347 (6220), 1260419(2015).</li>
<li>Uhlen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+human+protein+atlas+for+normal+and+cancer+tissues+based+on+antibody+proteomics%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Proteomics%22%5BJournal%5D)">A human protein atlas for normal and cancer tissues based on antibody proteomics.</a> Mol Cell Proteomics. 4 (12), 1920-1932 (2005).</li>
<li>San Roman, A. K., Jayewickreme, C. D., Murtaugh, L. C., Shivdasani, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wnt+secretion+from+epithelial+cells+and+subepithelial+myofibroblasts+is+not+required+in+the+mouse+intestinal+stem+cell+niche+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Wnt secretion from epithelial cells and subepithelial myofibroblasts is not required in the mouse intestinal stem cell niche in vivo.</a> Stem Cell Reports. 2 (2), 127-134 (2014).</li>
<li>Drokhlyansky, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+human+and+mouse+enteric+nervous+system+at+single-cell+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">The human and mouse enteric nervous system at single-cell resolution.</a> Cell. 182 (6), 1606-1622.e23 (2020).</li>
<li>Jiang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+and+tracing+Grem1%28%2B%29+stromal+cells+in+an+Apc+%28Min%2F%2B%29+mouse+utilizing+cryopreserved+intestinal+sections+prepared+via+modified+Swiss-roll+technique%5BTitle%5D)+AND+%22iScience%22%5BJournal%5D)">Mapping and tracing Grem1(+) stromal cells in an Apc (Min/+) mouse utilizing cryopreserved intestinal sections prepared via modified Swiss-roll technique.</a> iScience. 27 (11), 111173(2024).</li>
<li>Izbeki, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+Kitlow+progenitors%2C+reduced+stem+cell+factor+and+high+oxidative+stress+underlie+gastric+dysfunction+in+progeric+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Loss of Kitlow progenitors, reduced stem cell factor and high oxidative stress underlie gastric dysfunction in progeric mice.</a> J Physiol. 588 (Pt 16), 3101-3117 (2010).</li>
<li>Hayashi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperglycemia+increases+interstitial+cells+of+Cajal+via+MAPK1+and+MAPK3+signaling+to+ETV1+and+KIT%2C+leading+to+rapid+gastric+emptying%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Hyperglycemia increases interstitial cells of Cajal via MAPK1 and MAPK3 signaling to ETV1 and KIT, leading to rapid gastric emptying.</a> Gastroenterology. 153 (2), 521-535.e20 (2017).</li>
<li>Gao, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia-inducible+factor+1alpha+stabilization+restores+epigenetic+control+of+nitric+oxide+synthase+1+expression+and+reverses+gastroparesis+in+female+diabetic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Hypoxia-inducible factor 1alpha stabilization restores epigenetic control of nitric oxide synthase 1 expression and reverses gastroparesis in female diabetic mice.</a> Gastroenterology. 165 (6), 1458-1474 (2023).</li>
<li>Kuro-o, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mutation+of+the+mouse+klotho+gene+leads+to+a+syndrome+resembling+ageing%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Mutation of the mouse klotho gene leads to a syndrome resembling ageing.</a> Nature. 390 (6655), 45-51 (1997).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>#5SF Forceps</td><td>FINE SCIENCE TOOLS</td><td>11252-00</td><td></td></tr><tr><td>Bovine serum albumin&nbsp;</td><td>SIGMA-ALDRICH</td><td>A7906</td><td></td></tr><tr><td>ColdVision MC-LS LED light source</td><td>SCHOTT</td><td>MC-LS</td><td></td></tr><tr><td>Confocal software&nbsp;</td><td>Nikon</td><td>Nikon NIS-Elements Imaging Software</td><td></td></tr><tr><td>Cryoseal XYL</td><td>Epredida</td><td>9312-4</td><td></td></tr><tr><td>DAPI (4',6-diamidino-2-phenylindole, dilactate)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>D3571</td><td></td></tr><tr><td>Dissection Dishes, Large</td><td>Living Systems&nbsp; Instrumentation</td><td>SKU: DD-90</td><td></td></tr><tr><td>Donkey anti-goat AF647 pAb</td><td>Life Technologies</td><td>A21447</td><td>Lot: 1739289 RRID:AB_2535864</td></tr><tr><td>Donkey anti-mouse AF555 pAb</td><td>Life Technologies</td><td>A31570</td><td>Lot: 1774719 RRID:AB_2536180</td></tr><tr><td>Donkey anti-rabbit AF488 pAb</td><td>Life Technologies</td><td>A21206</td><td>Lot: 2668665 RRID:AB_2535792</td></tr><tr><td>E-cadharin (1:400 dilution)</td><td>BD Bioscience</td><td>610181</td><td>lot: 25510 RRID:AB_397580</td></tr><tr><td>Eosin</td><td>ELITechGroup</td><td>$SS-071C</td><td></td></tr><tr><td>Epoxy Coated Forceps</td><td>FINE SCIENCE TOOLS</td><td>11210-10</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>SIGMA-ALDRICH</td><td>459828-4L</td><td></td></tr><tr><td>FLEX TUBE 1.5 mL</td><td>Eppendorf</td><td>22364111</td><td></td></tr><tr><td>Gauze Sponges</td><td>Fisherscientific</td><td>22-362-178</td><td></td></tr><tr><td>Hardened Fine Scissors</td><td>FINE SCIENCE TOOLS</td><td>14090-09</td><td></td></tr><tr><td>Hematoxylin</td><td>Epredia</td><td>7211</td><td></td></tr><tr><td>KIT (0.2 &micro;g/mL; 1:1000 dilution)</td><td>R&amp;D Systems</td><td>AF1356</td><td>Lot: IEO0217101 RRID: AB_354750</td></tr><tr><td>LENS CLEANING SOLUTION 1OZ SPRAY BOTTLE</td><td>Nikon</td><td>77013066</td><td></td></tr><tr><td>Microscope Cover Glass</td><td>Fisher Scientific</td><td>12541016</td><td></td></tr><tr><td>Microscope Slides</td><td>CardinalHealth</td><td>M6133A</td><td></td></tr><tr><td>Minutien Pins</td><td>FINE SCIENCE TOOLS</td><td>26002-20</td><td></td></tr><tr><td>MYH11 (1:400 dilution)</td><td>Biomedical Technologies</td><td>BT-562</td><td>RRID:AB_10013421</td></tr><tr><td>Nail polish</td><td>SINFUL COLORS</td><td>7.33855E+11</td><td></td></tr><tr><td>Needle 30 G x 1/2 in.&nbsp;</td><td>BD Bioscience</td><td>305106</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyde</td><td>SIGMA-ALDRICH</td><td>158127-500G</td><td></td></tr><tr><td>Personna Single Edge Blades</td><td>The Razor Blade Co.</td><td>76247-652</td><td></td></tr><tr><td>ReadyProbes Mouse-on-Mouse IgG Blocking Solution (30x)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>R37621</td><td>Lot: 3226230</td></tr><tr><td>SlowFade Diamond Antifade Mountant (Mounting media)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>S36972</td><td></td></tr><tr><td>StainTray 10 slides staining system</td><td>Simport Scientific</td><td>M918-2</td><td></td></tr><tr><td>Stereo microscope 0.8x-5x</td><td>Nikon</td><td>SMZ645</td><td></td></tr><tr><td>Sucrose&nbsp;</td><td>SIGMA-ALDRICH</td><td>S9378-1KG</td><td></td></tr><tr><td>Surface-Amps X-100 (Triton X)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>28314</td><td></td></tr><tr><td>TMEM16A (ANO1: 1:400 dilution)</td><td>Abcam</td><td>ab53212&nbsp;</td><td>Lot: GP3295656-1 RRID: AB_883075</td></tr><tr><td>Transfer Pipet</td><td>Falcon</td><td>357575</td><td></td></tr><tr><td>TUBB3 (1:400 dilution)</td><td>Cell signaling technology</td><td>4466</td><td>Lot: 5 RRID: AB_1904176</td></tr><tr><td>Xylenes&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>X3P-1GAL</td><td>LOT 206238</td></tr></tbody></table>

verbeterde ruimtelijke mapping van maagspierlagen van de muis met behulp van een aangepaste swiss roll-techniek

Enhanced Spatial Mapping of Mouse Gastric Muscle Layers Using a Modified Swiss Roll Technique

Met de nieuwe methode omvatten muisachtige maagrollen alle drie de belangrijkste regio's van de maag: fundus, corpus en antrum, samen met een klein deel van de slokdarm en de duodenum in één sectie. Door de hele maag in één sectie op te nemen, kan een uitgebreide regionale analyse mogelijk worden (Figuur 1). Hematoxyline- en eosinekleuring (H&amp;E) van hele beelden van de maagrollen toonde een goed bewaarde maagarchitectuur in alle regio's, waardoor de mucosale, submucosale en muscularis-lagen duidelijk zichtbaar werden (Figuur 3). Figuur 4 toont representatieve immunofluorescentie kleuring van interstitiële cellen van Cajal (ICC; pacemakercellen die ritmische langzame golven genereren onder de fasische darmmotiliteit; geïdentificeerd door KIT en ANO1), enterische neuronen (neuronen van het enterisch zenuwstelsel die gastro-intestinale motiliteit coördineren; geïdentificeerd door TUBB3-immunokleuring) en kernen (DAPI). In het maagslijmvlies wordt KIT ook tot expressie gebracht in Paneth- en bekercellen, zoals eerder gerapporteerd 9,10,11. ANO1 wordt ook sterk tot expressie gebracht in het maagepitheel, met name in de kolomvormige epitheelcellen van de fundus, wat overeenkomt met zijn rol in chloridetransport en mucosale secretie11. Daarnaast wordt TUBB3 tot expressie gebracht in bepaalde maagendocriene cellen en slijmafscheidende cellen, volgens gegevens uit de Human Protein Atlas12,13. Figuur 5 toont representatieve immunofluorescerende kleuring van gladde spiercellen gelabeld met MYH11, maagslijmvliesepitheelcellen gelabeld met E-cadherine, en ICC gelabeld met KIT. MYH11 wordt ook tot expressie gebracht in myofibroblasten in het maagslijmvlies, zoals eerder gerapporteerd14. Samen bevestigen deze immunofluorescentieresultaten dat ons protocol de weefselarchitectuur behoudt.
<img alt="Figuur 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69673/69673fig1.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 1"> 
Figuur 1: Bereiding van de "Swiss roll" van de muizenmaag voor cryosectie. (A) De hele maag wordt direct na verwijdering in een zwarte, met siliconen gecoate dissectieschaal geplaatst, gevuld met koud fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS) om de weefselintegriteit te behouden. (B) De maag wordt geopend langs het midden van de duodenum. (C) De buik wordt voorzichtig uitgerekt en in de schaal gepind om plat te liggen zonder overmatige spanning. Langs het weefsel is een rood gestippelde lijn omlijnd om aan te geven waar het geknipt moet worden om het rollen te vergemakkelijken. (D) De geopende en gefixeerde maag wordt op PBS-gevochten filterpapier gelegd ter voorbereiding op het oprollen tot een compacte configuratie. De rode pijl toont de richting van de maagrol. (E) Weefselstukken worden ingebed in optimale snijtemperatuur (O.C.T.) verbinding en ingevroren op droogijs ter voorbereiding op cryosectie. (F) De bevroren blokken worden opgeslagen bij −80 °C en gecryosectied op 5 μm dikte voor downstream analyse. Klik <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69673/69673fig1large.jpg" target="_blank">hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figuur 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69673/69673fig2.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 2"> 
Figuur 2: ND-acquisitie-opstelling en verzadigingsvisualisatie tijdens Z-stack imaging. (A) Laser- en detectorinstellingen geconfigureerd in de confocale beeldvormingssoftware voor multikanaals spectrale beeldvorming. Er worden vier fluoroforen gebruikt: 4′,6-diamidino-2-fenylindool (DAPI), Alexa Fluor 488 (AF488), Alexa Fluor 555 (AF555) en Alexa Fluor 647 (AF647), elk gekoppeld aan bijbehorende excitatielasers en emissiedetectoren. De spectraalgrafiek toont excitatie- en emissiecurves, waardoor aanpassingen mogelijk zijn om overpraat te minimaliseren en signaaldetectie te optimaliseren. (B) Belichtingsinstellingen worden individueel aangepast voor elke fluorofor om pixelverzadiging te voorkomen en details in gebieden met hoge intensiteit te behouden. (C) Grote beeldverwervingsinstellingen (bijv. 6 × 6 velden) maakt visualisatie van de gehele maagrol mogelijk; De grootte van het beeldveld moet worden aangepast aan de grootte en compactheid van het gerolde weefsel. (D) ND Acquisitievenster toont Z-stack parameterinstellingen. Het Z-bereik wordt gedefinieerd door de boven- en onderpositie van de maagspier te selecteren, met acht stappen die de volledige diepte van het weefsel vastleggen voor driedimensionale (3D) analyse. Klik <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69673/69673fig2large.jpg" target="_blank">hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figuur 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69673/69673fig3.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 3"> 
Figuur 3: Afbeelding van een met hematoxyline en eosine gekleurde muismaag Swiss roll. Tegelscan toont het vermogen aan om de volledige maagrol van een 8 weken oude vrouwelijke C57BL/6J-muis te visualiseren. Belangrijke anatomische gebieden zijn aangegeven, waaronder de slokdarm (rode gestippelde lijn), de onderste slokdarmsluitspier (paarse gestippelde lijn), de fundus (zwarte gestippelde lijn), het corpus (blauwe stippellijn), antrum (groene gestippelde lijn) en het duodenum (oranje gestippelde lijn). Schaalbalk: 1000 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69673/69673fig3large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figuur 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69673/69673fig4.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 4"> 
Figuur 4: Confocale beelden van een Zwitserse rol van een hele muismaag: ANO1, KIT, TUBB3. Bovenste panelen: Representatieve gestikte confocale beelden van een maagrol van een 8 weken oude vrouwelijke C57BL/6J-muis, met immunokleuring voor ANO1 (groen), KIT (cyaan), TUBB3 (geel) en kernen (blauw). De gehele opgerolde maag, inclusief fundus, corpus en antrum, wordt gevisualiseerd. Schaalbalken: 1000 μm. Onderste panelen: Vergrote weergaven van het gebied dat wordt omlijnd door het wit gestippelde vakje in de bovenste panelen, met cellulaire details van interstitiële cellen van Cajal (ANO1+ en KIT+; gele pijlen) en enterische neuronen (TUBB3⁺; rode pijlen). Schaalbalken: 100 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69673/69673fig4large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figuur 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69673/69673fig5.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 5"> 
Figuur 5: Confocale beelden van een Zwitserse rol van een hele muismaag: MYH11, KIT, E-cadherine. Bovenste panelen: Representatieve gestikte confocale beelden van een maagrol van een 8 weken oude vrouwelijke C57BL/6J-muis, met immunokleuring voor MYH11 (groen), KIT (cyaan), E-cadherine (geel) en kernen (blauw). De gehele opgerolde maag, inclusief fundus, corpus en antrum, wordt gevisualiseerd. Schaalbalken: 1000 μm. Onderste panelen: Vergrote weergaven van het gebied, omlijnd door het wit gestippelde vakje in de bovenste panelen. Witte stippellijnen markeren het slijmvliesepitheel (E-cadherine) en de spierlaag (MYH11). Witte pijlen geven KIT+ interstitiële cellen van Cajal (ICC) aan. Schaalbalken: 100 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69673/69673fig5large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>

Verbeterde ruimtelijke mapping van maagspierlagen van de muis met behulp van een aangepaste Swiss roll-techniek

Spatial "omics" technologies provide unprecedented opportunities to study the biology and interactions of individual cells of the gastric neuromuscular ...

enhanced-spatial-mapping-mouse-gastric-muscle-layers-using-modified

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

De interstitiële cellen van Cajal (ICC) zijn de pacemaker cellen van het gastro-intestinale (GI) stelsel. Ze vormen complexe netwerken tussen gladde spiercellen en postganglionaire neuronale vezels GI contractiliteit te reguleren. Hier presenteren wij immunofluorescentie methoden cross-sectionele en hele-mount visualisatie van muriene ICC-netwerken.

Visualisatie van de interstitiële cellen van Cajal (ICC) Netwerk in Muizen

De in vivo meting van gladde spiercontracties langs het maag-darmkanaal van laboratoriumdieren blijft een krachtige, hoewel ondergebruikte, techniek. Flexibele, dubbele elementen spanningsmeters zijn niet commercieel verkrijgbaar en vereisen fabricage. Dit protocol beschrijft de constructie van betrouwbare, goedkope spanningsmeters voor acute of chronische implantatie bij knaagdieren.

Fabricage en Implantatie van Miniatuur Dual-element rekstrookjes voor het meten van<em&gt; In Vivo</em&gt; Maag-Weeën in Knaagdieren.

Dit artikel toont chirurgische procedures van gastro-oesofageale reflux bij muizen. Deze modellen zijn nuttige hulpmiddelen voor onderzoek naar mechanismen en behandeling van gastro-oesofageale refluxziekte en mogelijk Barrett’s slokdarm en slokdarmadenoom.

Chirurgische Modellen van Gastro-oesofageale met Muizen

Het gebruik van een eenvoudig apparaat om muizendarmen te snijden en ‘op te rollen’ om snel gehele preparaten te bereiden, wordt beschreven.

Een eenvoudig apparaat om snel te bereiden Whole Bergen van de muis Darm

Recent beschikbare video-opname- en ruimtelijk-temporele kaarttechnieken (STmap) maken het mogelijk om zowel voortplantende als mengpatronen van darmmotiliteit te visualiseren en te kwantificeren. Het doel van dit protocol is om de generatie en analyse van STmaps te verklaren met behulp van het GastroIntestinaal Motiliteitsbewakingssysteem (GIMM).

Spatiotemporele Mapping van Motiliteit in<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Bereidingen van de darmen

Dit artikel beschrijft een video-imagingtechniek en hoogwaardige ruimte-tijdelijke mapping om veranderingen in de neurale regulatie van colonische motiliteit bij volwassen muizen te identificeren. Subtiele effecten op gastro-intestinale (GI) functie kunnen worden gedetecteerd met behulp van deze aanpak in geïsoleerde weefselpreparaten om ons begrip van GI-ziekte te bevorderen.

Video Imaging en Maps Spatiotemporal om gastro-intestinale motiliteit analyseren in Muizen

Nauwkeurige identificatie en locatie van epitheelcellen langs de intestinale slijmvlies essentieel verschillende cellijnen definiëren. Een goede beeldvorming van darmweefsel is van cruciaal belang voor de identificatie van eiwit expressie patronen met maximale resolutie. Dit onderzoek heeft als doel om de optimale methoden en voorwaarden voor de verwerking van de muis intestinale weefsels af te bakenen.

Verbeterde Swiss-rolling Techniek voor darmweefsel Voorbereiding voor Immunohistochemische en Immunofluorescentie Analyses

Het volgende beschrijft de prestaties van verticale sleeve Gastrectomie in muizen. Dit is een soort gewichtsverlies chirurgie dat verwijdering van ongeveer 70% van de maag.

Een lymfkliertest Model van verticale Sleeve Gastrectomie

De darm is van vitaal belang voor de spijsvertering en opname. Elke regio - twaalfvingerige darm, jejunum, ileum, dikke darm - vervult verschillende functies vanwege unieke cellulaire structuren. Het bestuderen van darmfysiologie vereist een nauwgezette weefselanalyse. Dit protocol schetst weefselfixatie en -verwerking met behulp van de Swiss roll-techniek, waardoor nauwkeurige immunokleuring wordt gegarandeerd door middel van de juiste weefselconservering en -oriëntatie.

Geoptimaliseerd protocol voor intestinale Swiss rolls en immunofluorescerende kleuring van in paraffine ingebed weefsel

Deze studie presenteert een 3D-beeldvormingsmethode met behulp van darmweefsel en multi-fotonmicroscopie om uitgescheiden slijm te kwantificeren, waardoor nauwkeurige volumetrische analyse en visualisatie van slijmdynamiek mogelijk is als reactie op stimuli zoals carbamoylcholinechloride.

Driedimensionale kwantificering van darmslijm met behulp van beeldvorming van het hele weefsel

Leer een aangepaste Swiss roll-techniek voor geheel-maag immunokleuring bij muizen. Deze methode behoudt ruimtelijke oriëntatie en maakt gelijktijdige visualisatie van alle maagregio's in één sectie mogelijk voor betrouwbaar histologisch onderzoek.

Verbeterde ruimtelijke mapping van maagspierlagen van de muis met behulp van een aangepaste Swiss roll-techniek

Meer video's verkennen