Name: DNA-virale fractie metagenomica voor menselijke ontlastingsmonsters (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-03-24T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 15 s
Description: Leer een flexibel protocol voor DNA-extractie uit virale fracties in menselijke ontlastingsmonsters met filtratie en ultracentrifugatie. Deze methode genereert hoogwaardige viromische DNA voor metagenomische analyse.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Breitbart, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metagenomic+Analyses+of+an+Uncultured+Viral+Community+from+Human+Feces%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bacteriol%22%5BJournal%5D)">Metagenomic Analyses of an Uncultured Viral Community from Human Feces.</a> J Bacteriol. 185 (20), 6220-6223 (2003).</li>
<li>Liang, G., Bushman, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+human+virome%3A+assembly%2C+composition+and+host+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Microbiol%22%5BJournal%5D)">The human virome: assembly, composition and host interactions.</a> Nat Rev Microbiol. 19 (8), 514-527 (2021).</li>
<li>Callanan, J., Stockdale, S. R., Shkoporov, A., Draper, L. A., Ross, R. P., Hill, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biases+in+Viral+Metagenomics-Based+Detection%2C+Cataloguing+and+Quantification+of+Bacteriophage+Genomes+in+Human+Faeces%2C+a+Review%5BTitle%5D)+AND+%22Microorganisms%22%5BJournal%5D)">Biases in Viral Metagenomics-Based Detection, Cataloguing and Quantification of Bacteriophage Genomes in Human Faeces, a Review.</a> Microorganisms. 9 (3), 524(2021).</li>
<li>Garmaeva, S., Sinha, T., Kurilshikov, A., Fu, J., Wijmenga, C., Zhernakova, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studying+the+gut+virome+in+the+metagenomic+era%3A+challenges+and+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Biol%22%5BJournal%5D)">Studying the gut virome in the metagenomic era: challenges and perspectives.</a> BMC Biol. 17 (1), 84(2019).</li>
<li>Lewandowska, D. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+and+validation+of+sample+preparation+for+metagenomic+sequencing+of+viruses+in+clinical+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiome%22%5BJournal%5D)">Optimization and validation of sample preparation for metagenomic sequencing of viruses in clinical samples.</a> Microbiome. 5 (1), 94(2017).</li>
<li>Conceição-Neto, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modular+approach+to+customise+sample+preparation+procedures+for+viral+metagenomics%3A+a+reproducible+protocol+for+virome+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Modular approach to customise sample preparation procedures for viral metagenomics: a reproducible protocol for virome analysis.</a> Sci Rep. 5 (1), 16532(2015).</li>
<li>Palermo, C. N., Shea, D. W., Short, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+Different+Size+Fractions+Provides+a+More+Complete+Perspective+of+Viral+Diversity+in+a+Freshwater+Embayment%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Environ+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Analysis of Different Size Fractions Provides a More Complete Perspective of Viral Diversity in a Freshwater Embayment.</a> Appl Environ Microbiol. 87 (11), e00197-e00221 (2021).</li>
<li>Kleiner, M., Hooper, L. V., Duerkop, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+methods+to+purify+virus-like+particles+for+metagenomic+sequencing+of+intestinal+viromes%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Genomics%22%5BJournal%5D)">Evaluation of methods to purify virus-like particles for metagenomic sequencing of intestinal viromes.</a> BMC Genomics. 16 (1), 7(2015).</li>
<li>Fudyma, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploring+viral+particle%2C+soil%2C+and+extraction+buffer+physicochemical+characteristics+and+their+impacts+on+extractable+viral+communities%5BTitle%5D)+AND+%22Soil+Biol+Biochem%22%5BJournal%5D)">Exploring viral particle, soil, and extraction buffer physicochemical characteristics and their impacts on extractable viral communities.</a> Soil Biol Biochem. 194, 109419(2024).</li>
<li>Zhai, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+storage+buffer+and+storage+conditions+on+fecal+samples+for+bacteriophage+infectivity+and+metavirome+analyses%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiome%22%5BJournal%5D)">The impact of storage buffer and storage conditions on fecal samples for bacteriophage infectivity and metavirome analyses.</a> Microbiome. 11 (1), 193(2023).</li>
<li>Trubl, G., Solonenko, N., Chittick, L., Solonenko, S. A., Rich, V. I., Sullivan, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+viral+resuspension+methods+for+carbon-rich+soils+along+a+permafrost+thaw+gradient%5BTitle%5D)+AND+%22PeerJ%22%5BJournal%5D)">Optimization of viral resuspension methods for carbon-rich soils along a permafrost thaw gradient.</a> PeerJ. 4, e1999(2016).</li>
<li>Roux, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Towards+quantitative+viromics+for+both+double-stranded+and+single-stranded+DNA+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22PeerJ%22%5BJournal%5D)">Towards quantitative viromics for both double-stranded and single-stranded DNA viruses.</a> PeerJ. 4, e2777(2016).</li>
<li>Kim, K. H., Bae, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amplification+methods+bias+metagenomic+libraries+of+uncultured+single-stranded+and+double-stranded+DNA+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Environ+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Amplification methods bias metagenomic libraries of uncultured single-stranded and double-stranded DNA viruses.</a> Appl Environ Microbiol. 77 (21), 7668(2011).</li>
<li>ter Horst, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minnesota+peat+viromes+reveal+terrestrial+and+aquatic+niche+partitioning+for+local+and+global+viral+populations+%28vol+9%2C+233%2C+2021%29%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiome%22%5BJournal%5D)">Minnesota peat viromes reveal terrestrial and aquatic niche partitioning for local and global viral populations (vol 9, 233, 2021).</a> Microbiome. 9 (1), (2021).</li>
<li>Sorensen, J., Zinke, L., ter Horst, A., Santos-Medellín, C., Schroeder, A., Emerson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNase+Treatment+Improves+Viral+Enrichment+in+Agricultural+Soil+Viromes%5BTitle%5D)+AND+%22mSystems%22%5BJournal%5D)">DNase Treatment Improves Viral Enrichment in Agricultural Soil Viromes.</a> mSystems. 6 (5), e00614-e00621 (2021).</li>
<li>Santos-Medellín, C., Estera-Molina, K., Yuan, M., Pett-Ridge, J., Firestone, M. K., Emerson, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+turnover+of+soil+viral+populations+and+genotypes+overlain+by+cohesive+responses+to+moisture+in+grasslands%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Spatial turnover of soil viral populations and genotypes overlain by cohesive responses to moisture in grasslands.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 119 (45), e2209132119(2022).</li>
<li>Emerson, J. B., Geonczy, S. E., Santos-Medellín, C., ter Horst, A. M., Fudyma, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Soil+Viromics+Protocol+-+Emerson+Lab+v1%5BTitle%5D)+AND+%22Protocols.io%22%5BJournal%5D)">Soil Viromics Protocol - Emerson Lab v1.</a> Protocols.io. , https://protocols.io/view/soil-viromics-protocol-emerson-lab-v1-b7nyrmfw/v1 (2022).</li>
<li>Göller, P. C., Haro-Moreno, J. M., Rodriguez-Valera, F., Loessner, M. J., Gómez-Sanz, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uncovering+a+hidden+diversity%3A+optimized+protocols+for+the+extraction+of+dsDNA+bacteriophages+from+soil%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiome%22%5BJournal%5D)">Uncovering a hidden diversity: optimized protocols for the extraction of dsDNA bacteriophages from soil.</a> Microbiome. 8 (1), 17(2020).</li>
<li>Larsen, F. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLarsen%2C+F+%22SM+buffer%22">SM buffer</a>. , Protocols.io. https://www.protocols.io/view/sm-buffer-8epv5967jg1b/v1 (2021).</li>
<li>Camargo, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+mobile+genetic+elements+with+geNomad%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Identification of mobile genetic elements with geNomad.</a> Nat Biotechnol. , (2023).</li>
<li>Santos-Medellín, C., Blazewicz, S. J., Pett-Ridge, J., Firestone, M. K., Emerson, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viral+but+not+bacterial+community+successional+patterns+reflect+extreme+turnover+shortly+after+rewetting+dry+soils%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Ecol+Evol%22%5BJournal%5D)">Viral but not bacterial community successional patterns reflect extreme turnover shortly after rewetting dry soils.</a> Nat Ecol Evol. 7 (11), 1809-1822 (2023).</li>
<li>Halary, S., Temmam, S., Raoult, D., Desnues, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viral+metagenomics%3A+are+we+missing+the+giants%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Viral metagenomics: are we missing the giants.</a> Curr Opin Microbiol. 31, 34-43 (2016).</li>
<li>Williamson, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metagenomic+exploration+of+viruses+throughout+the+Indian+Ocean%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Metagenomic exploration of viruses throughout the Indian Ocean.</a> PLoS One. 7 (10), e42047(2012).</li>
<li>Liang, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+stepwise+assembly+of+the+neonatal+virome+is+modulated+by+breastfeeding%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The stepwise assembly of the neonatal virome is modulated by breastfeeding.</a> Nature. 581 (7809), 470-474 (2020).</li>
<li>Hillary, L. S., Knotts, T. A., Adams, S. H., Ali, M. R., Olm, M. R., Emerson, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+extraction+and+virome+processing+methods+strongly+influence+recovered+human+gut+viral+community+characteristics%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">DNA extraction and virome processing methods strongly influence recovered human gut viral community characteristics.</a> bioRxiv. , (2025).</li>
<li>Santos-Medellín, C., Zinke, L. A., ter Horst, A. M., Gelardi, D. L., Parikh, S. J., Emerson, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viromes+outperform+total+metagenomes+in+revealing+the+spatiotemporal+patterns+of+agricultural+soil+viral+communities%5BTitle%5D)+AND+%22ISME+J%22%5BJournal%5D)">Viromes outperform total metagenomes in revealing the spatiotemporal patterns of agricultural soil viral communities.</a> ISME J. 15 (7), 1956-1970 (2021).</li>
<li>Gregory, A. C., Zablocki, O., Zayed, A. A., Howell, A., Bolduc, B., Sullivan, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Gut+Virome+Database+Reveals+Age-Dependent+Patterns+of+Virome+Diversity+in+the+Human+Gut%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Host+Microbe%22%5BJournal%5D)">The Gut Virome Database Reveals Age-Dependent Patterns of Virome Diversity in the Human Gut.</a> Cell Host Microbe. 28 (5), 724-740 (2020).</li>
<li>Yilmaz, S., Allgaier, M., Hugenholtz, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+displacement+amplification+compromises+quantitative+analysis+of+metagenomes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Multiple displacement amplification compromises quantitative analysis of metagenomes.</a> Nat Methods. 7 (12), 943-944 (2010).</li>
<li>Kosmopoulos, J. C., Klier, K. M., Langwig, M. V., Tran, P. Q., Anantharaman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viromes+vs.+mixed+community+metagenomes%3A+choice+of+method+dictates+interpretation+of+viral+community+ecology%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiome%22%5BJournal%5D)">Viromes vs. mixed community metagenomes: choice of method dictates interpretation of viral community ecology.</a> Microbiome. 12 (1), 195(2024).</li>
<li>Zhai, X., Gobbi, A., Kot, W., Krych, L., Nielsen, D. S., Deng, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+single-stranded+based+library+preparation+method+for+virome+characterization%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiome%22%5BJournal%5D)">A single-stranded based library preparation method for virome characterization.</a> Microbiome. 12 (1), 219(2024).</li>
<li>Hillary, L. S., Adriaenssens, E. M., Jones, D. L., McDonald, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RNA-viromics+reveals+diverse+communities+of+soil+RNA+viruses+with+the+potential+to+affect+grassland+ecosystems+across+multiple+trophic+levels%5BTitle%5D)+AND+%22ISME+Commun%22%5BJournal%5D)">RNA-viromics reveals diverse communities of soil RNA viruses with the potential to affect grassland ecosystems across multiple trophic levels.</a> ISME Commun. 2, 34(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Bovine Serum Albumin (BSA) DNase- en Protease-vrije Poeder</td><td>Fisher BioReagents</td><td>BP9706100</td><td>Voor PPBS recept (Stap 1.1)</td></tr><tr><td>DNeasy PowerSoil Pro Kit</td><td>QIAGEN</td><td>47016</td><td>DNA extractie kit (Stap 4.1)</td></tr><tr><td>KAPA DNA HyperPrep bibliotheek kit</td><td>Roche</td><td>n/a</td><td>Bibliotheken gegenereerd door deze kit werden gesequenced met behulp van het Illumina NovaSeq 6000 platform (2 x 150 bp).</td></tr><tr><td>Magnesiumsulfaat (MgSO4), watervrij, &ge;99,5%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M7506</td><td>Voor PPBS recept (Stap 1.1)</td></tr><tr><td>Fosfaat-gebufferd Saline (PBS), 10x, pH 7.4, RNase-vrij</td><td>Invitrogen</td><td>AM9624</td><td>Voor PPBS recept (Stap 1.1)</td></tr><tr><td>Polyethersulfone (PES) membraan spuitfilters, steriele, 28 mm, 0,2 &mu;m</td><td>Corning</td><td>431229</td><td>Voor spuitfiltratie (Stap 2.9)</td></tr><tr><td>Polypropyleen conische centrifugebuizen, steriele, 50 mL</td><td>Olympus Plastics</td><td>28-108</td><td></td></tr><tr><td>Kaliumcitraat Monohydraat (Kristallijn/Gecertificeerd)</td><td>Fisher Chemical</td><td>P222</td><td>Voor PPBS recept (Stap 1.1)</td></tr><tr><td>Qubit&nbsp; Assaybuisjes</td><td>Invitrogen</td><td>Q32856</td><td>Voor DNA kwantificering (Stap 5.1)</td></tr><tr><td>Qubit 4 Fluorometer</td><td>Invitrogen</td><td>Q33238</td><td>Voor DNA kwantificering (Stap 5.1)</td></tr><tr><td>Qubit dsDNA Kwantificering Assay Kits</td><td>Invitrogen</td><td>Q32850</td><td>Voor DNA kwantificering (Stap 5.1)</td></tr><tr><td>RQ1 RNase-Vrije DNase</td><td>Promega</td><td>PR-M6101</td><td>Bevat de reactiebuffer, DNase, en stopoplossing</td></tr><tr><td>Supor hydrofiel polyethersulfone (PES) membraan spuitfilters, steriele, 32 mm, 5,00 &micro;m&nbsp;</td><td>Cytiva (Voorheen Pall Lab)</td><td>28150-956</td><td>Voor spuitfiltratie (Stap 2.9)</td></tr><tr><td>Ultracentrifuge rotor: Type 50.2 Ti Vast-Hoek Rotor, 50.000 rpm, 302.000 x g, 12 x 39 m</td><td>Beckman Coulter</td><td>337901</td><td>We gebruiken ook de Beckman Coulter Type 70 Ti Vast-Hoek Titanium Rotor (Cat. 337922). Centrifugeer gedurende 3 uur als je de 70 Ti gebruikt.</td></tr><tr><td>Ultracentrifuge buizen: 26,3 mL Polycarbonaat Fles met Dop Montage, 25 x 89mm</td><td>Beckman Coulter</td><td>355618</td><td>Compatibel met Type 50.2 Ti (Cat. 337901) en Type 70 Ti (Cat. 337922) Beckman Coulter rotors</td></tr><tr><td>Ultracentrifuge: Beckman Instruments Optima LE-80K Vloer Ultracentrifuge</td><td>Beckman Coulter</td><td>365668</td><td>We gebruiken ook de Beckman Coulter L8-70M Gekoelde Ultracentrifuge (Cat. 344196)</td></tr></tbody></table>

dna-virale fractie metagenomica voor menselijke ontlastingsmonsters

DNA Viral Size Fraction Metagenomics for Human Stool Samples

DNA-virale fractie metagenomica voor menselijke ontlastingsmonsters

Understanding the healthy human virosphere (the viral component of the microbiome) requires accurate measurements of viral community composition across a ...

dna-viral-size-fraction-metagenomics-for-human-stool-samples

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Een stap RT-PCR voor de detectie en genogroup identificatie van Norovirus isolaten van kinderen ontlasting dat primers en TaqMan probes specifiek voor de open reading frame 1 (ORF1)-ORF2 grensgebied, de geconserveerde regio van de Norovirus genoom gebruikt beschreven. Een niet-commerciële, kosteneffectieve RNA-extractie methode wordt beschreven.

Detectie en Genogrouping van Norovirussen van Children&#39;s Krukken Door Taqman een stap RT-PCR

Single Virus Genomics (SVG) is een methode om te isoleren en versterken de genomen van enkele vironen. Virale suspensies van een gemengde assemblage worden naargelang het gebruik van flowcytometrie op een objectglaasje met discrete putjes die agarose, waardoor het vastleggen van het virion en het verminderen van het genoom afschuiving bij opwerking. Whole genome amplificatie wordt bereikt door verschillende verplaatsing amplificatie (MDA) resulterend in genomisch materiaal dat geschikt is voor...

Isolatie en Genoomanalyse van Single Virionen gebruik &#39;Single Virus Genomics&#39;

This video describes DNA isolation protocol from stool samples of colon tumor-bearing mice. The extracted DNA is amplified using PCR, and the product is further cleaned using a magnetic beads-based approach. This method can be used to determine the effect of environmental enrichment on colon microbiota and animal mortality.

Stool Microbial DNA Isolation: Studying the Effect of Environmental Enrichment on Microbiome Diversity in Murine Tumor Model

De cystic fibrosis luchtwegen als voorbeeld, het manuscript presenteert een uitgebreide workflow omvattende een combinatie van metagenomic en metatranscriptomic benaderingen van de microbiële en virale gemeenschappen in dieren door monsters te karakteriseren.

Zuiveren van de Onzuivere: Sequencing metagenomes en Metatranscriptomes van Complex-Animal geassocieerd Samples

Hier presenteren we een uitgebreid protocol om de beschikbaarheid van organische en anorganische voedingsstoffen en de abundantie en structuur van microbiële en virale gemeenschappen in afgelegen mariene omgevingen te beoordelen.

Het ontrafelen van de Unseen Spelers in de Oceaan - A Field Guide to Water chemie en Mariene Microbiologie

Hier presenteren we fenomisch aanpakken voor de functionele karakterisering van putatieve faaggenen. Technieken omvatten een ontwikkelde test die in staat is om het anabole metabolisme van de gastheer te monitoren, de Multi-fenotype Assay Plates (MAPs), naast de gevestigde methode van metabolomics, die in staat is om effecten op katabool metabolisme te meten.

Faag phenomics: Fysiologische Approaches te karakteriseren Novel virale eiwitten

We beschrijven een efficiente en rendabele methode voor het extraheren van nucleïnezuur uit uitstrijkjes ter karakterisering van bacteriële 16S rRNA gen gebruiken amplicon sequencing. De methode maakt het mogelijk voor een gemeenschappelijke aanpak voor de verwerking van meerdere soorten monster en herbergt een aantal downstream-analytische processen.

Efficiënte Nucleic Acid Extraction en 16S rRNA Gene Sequencing voor Bacteriële Gemeenschap karakterisering

Dit manuscript beschrijft een gedetailleerde gestandaardiseerde protocol voor high-throughput 16S rRNA-amplicon sequencing. Het protocol introduceert een protocol van het geïntegreerde, geüniformeerde haalbaar en goedkoop vanaf fecale sample collectie door middel van data-analyses. Dit protocol maakt analyse van grote aantallen monsters met strenge normen en diverse besturingselementen.

Begeleide Protocol voor fecale microbiële karakterisering door 16S rRNA-Amplicon Sequencing

Dit protocol isoleert totaal RNA van hoge kwaliteit uit fecale monsters van dierlijke en menselijke proefpersonen. Een commerciële miRNA-isolatiekit wordt gebruikt met aanzienlijke aanpassing om zuiver RNA te isoleren met geoptimaliseerde kwantiteit en kwaliteit. De RNA-isolaten zijn goed voor de meeste downstream RNA-assays zoals sequencing, micro-array en RT-PCR.

Fecale (micro) RNA-isolatie

Nauwkeurige kwantificering van kopieën van het vectorgenoom van adeno-geassocieerd virus (AAV) is van cruciaal belang, maar er moet nog een gestandaardiseerd protocol worden opgesteld. Dit protocol beschrijft een gevalideerde methode voor het bereiden van gezuiverde AAV-monsters en het uitvoeren van een digitale druppelpolymerasekettingreactie (dd_PCR) om de virale genoomtiter betrouwbaar te kwantificeren.

Kwantificering van adeno-geassocieerde virale genomen in gezuiverde vectormonsters door digitale druppelpolymerasekettingreactie

Leer een flexibel protocol voor DNA-extractie uit virale fracties in menselijke ontlastingsmonsters met filtratie en ultracentrifugatie. Deze methode genereert hoogwaardige viromische DNA voor metagenomische analyse.

DNA-virale fractie metagenomica voor menselijke ontlastingsmonsters

Meer video's verkennen