Gestructureerd oefenregime bij pulmonale hypertensie-rechter ventrikelfalen in een oofmodel

We bestuderen de effecten van lichaamsbeweging op de pathofysiologie van pulmonale hypertensie-rechter ventrikelfalen in een schaammodel. Inspanningseffecten bij pulmonale hypertensie: rechter ventrikelfalen worden slecht gekarakteriseerd door beperkte tolerantie en het risico op cardiopulmonale decompensatie. Dit protocol maakt echter gecontroleerde beoordeling mogelijk.

Om te beginnen verzamel je de benodigde reagentia en richt je de werkruimte voor het experiment in. Neem drie normale zoutoplossingsspoelingen. Haal één milliliter van elk af.

En voeg één milliliter heparineoplossing met 1.000 eenheden toe aan elke spuit. Maak twee spuiten van 10 milliliter klaar, één voor afval en één voor bloedafname, en vijf spuiten van één milliliter voor bloedgasafname. Met een spuit van vijf milliliter zuig je vijf milliliter heparineoplossing met 5.000 eenheden heparine om de rechter ventrikel of RV-lijn te vergrendelen.

Reconstrueren van twee milligram alteplase met 2,2 milliliter steriel water voor gebruik indien nodig. Neem één milliliter spuit en één vijf milliliter spuit en vul beide met hypertonische zoutoplossing met een 20 tot 22 gauge naald. Verkrijg een druktransducer en verbind het vrouwelijke lokaasuiteinde van de drukbuis met het mannelijke lokaasuiteinde van de transducer.

Controleer of het onderste aasuiteinde van de transducer is afgekapt. Verbind de buis met een driewegstopkraan en bevestig een 22 gauge Huber-naald. Spoel de lijn door met hypertonische zoutoplossing totdat het vocht de naald verlaat.

Stel dan de stopkraan zo in dat hij richting de naald en weg van de blauwe dop vergrendelt om de toegang tot de manchet te sluiten. Verwijder twee milliliter normale zoutoplossing uit een zakje van één liter en vervang deze door twee milliliter heparineoplossing met 2.000 eenheden heparine. Plaats de zoutoplossingszak in een drukzak en steek hem vervolgens in een toegangszak met een intraveneuze spike.

Hang de drukzak ongeveer twee meter boven de grond. En draai de driewegstopkraan van de drukzak zodat het handvat loodrecht op de buis staat. Blaas de zak op met de handpomp totdat de drukindicator groen wordt bij ongeveer 250 millimeter kwik.

Draai de driewegstopkraan naar de zak toe om de druk te behouden. Verbind het mannelijke uiteinde van de intraveneuze lijn met het vrouwelijke uiteinde van de transducer. Verbind vervolgens het vrouwelijke lokaas van de drukbuis met het mannelijke uiteinde van de transducer.

En vervolgens bevestig je het mannelijke uiteinde van de buis aan het vrouwelijke lokuiteinde van de stopkraan. Na het bevestigen van een 22 gauge Huber-naald aan het mannelijke uiteinde van de driewegstopkraan, open je de heparinezak en spoel je de intraveneuze lijn door totdat heparinized zoutoplossing de hoopernaald verlaat. Draai de driewegstopkraan naar de Huber-naald om hem te vergrendelen.

Gebruik een schapenmodel van pulmonale hypertensie RV-falen, voorzien van een PA-manchet en een RV-drukpoort. Na een week postoperatief herstel vervoer je de schapen die gewend zijn aan de loopband naar de oefenruimte voor testen. Leg een halter op het schaap en gebruik die om het dier naar de loopband te leiden, waarbij je het vooraan plaatst met zijn vier poten rustend op een kleine bench.

Palpeer de poorten en maak de huid schoon met alcoholdoekjes. Gebruik een Huber-naald om toegang te krijgen tot de PA-poort. Na het openen van de startpagina van het labdiagram selecteer je Nieuw, klik je op opstellen, selecteer je apparaten en kanalen.

Stel het aantal kanalen in op vier en hernoem kanaal één naar vier als PA-manchetdruk, RV-druk, RV-systolische druk en hartslag. Selecteer cyclische metingen. Ga naar bron en selecteer kanaal twee RV-druk, meet tot maximaal en klik OK. Herhaal het proces voor hartslag op kanaal vier, maar verander de meting naar de frequentie.

Voor kanaal één en twee, bevestig dat er geen berekening is geselecteerd. Zorg voor de juiste toegangsoriëntatie met de PA-poort dichter bij de kop en de RV-poort dichter bij de staart. Plaats transducers tussen het schaap en de computer op hartniveau en verbind beide druktransducers met de interfacekabel.

Zodra de transducers zijn gepositioneerd en gekalibreerd, klik je op start om de drukgolf van de RV- en PA-manchet te registreren bij 400 hertz. Draai de stopkraan omhoog om de drukgolf van de PA-manchet te transduceren. Draai dan de stopkraan uit richting het schaap om de golfvorm te sluiten.

Plaats één heparine-flush op de drieweg-stopkraan voor de RV-lijn en spoel de hele lijn door in de RV-poort. Trek voorzichtig terug aan de spuit totdat het donkere bloed terugkomt. Draai de stopkraan uit richting de transducer.

Gebruik eerst een lege 10 milliliter spuit om 10 milliliter RV-bloed af te nemen. Gebruik vervolgens een spuit van één milliliter om 0,2 tot 0,4 milliliter RV-bloed als monster af te nemen. Zet de stop omhoog in de omhoog positie.

Trek aan het blauwe lipje van de druktransducer van de camper om het ventiel te openen en ga door met spoelen totdat de leiding vrij is van bloed. Begin de eerste oefensnelheid door de draaiknop van de loopband op 30 te zetten, wat overeenkomt met 0,46 meter per seconde, en houd het 10 minuten vol. Open de PA-manchetlijn periodiek gedurende het interval van 10 minuten om de druk van de PA-manchet over te brengen.

Aan het einde van het 10-minuteninterval neem je bloedgas zoals eerder getoond. Herhaal het bloedafname, het spoelen van de lijn en de oefenstappen op de loopbandinstellingen 40, 50, 30 en nul. Gebruik één milliliter hypertonische zoutoplossing om de manchet op te blazen tot 150 tot 200 millimeter kwik.

Transduceer de RV-druk een paar minuten na het opblazen om tolerantie te waarborgen. De verzadiging van gemengde veneuze zuurstof bleef relatief stabiel bij maximale loopbandsnelheid van week één tot week acht. De RV-systolische druk steeg van week één tot week acht.

De afstand die tijdens het sporten werd afgelegd nam toe van week één naar week acht, ondanks dat de PA-manchetdruk in week acht steeg tot ongeveer 777 millimeter kwik. Bij de geselecteerde loopbandsnelheden nam de verzadiging van gemengde veneuze zuurstof af en nam de RV-systolische druk toe naarmate de oefensnelheid toenam. Dit protocol stelt ons in staat om hemodynamische waarden in realtime te meten tijdens het sporten.

Een belangrijke uitdaging in dit protocol is het behouden van poorttoegang of oefening. In het bijzonder het handhaven van de druk in de PA-manchet. Een parameter die we hopen in de toekomst gedetailleerder te meten, is het zuurstofverbruik tijdens inspanning en herstel.