35.6:

Kultura tkanek roślinnych

JoVE Core
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Core Biology
Plant Tissue Culture
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

35,981 Views

02:57 min
February 27, 2020

Hodowla tkanek roślinnych jest szeroko stosowana zarówno w naukach podstawowych, jak i stosowanych. Zastosowania obejmują zarówno badania nad rozwojem roślin, jak i funkcjonalne badania genów, ulepszanie upraw, komercyjne mikrorozmnażanie, eliminację wirusów i ochronę rzadkich gatunków.

Hodowla tkanek roślinnych zależy od zdolności tkanki roślinnej do powstania całej nowej rośliny, gdy zapewni się jej podłoże wzrostowe i odpowiednie środowisko. Ta zdolność komórek lub tkanek roślinnych jest określana jako “totipotencja”.

Podstawowe etapy hodowli tkanek roślinnych są cztery:

  1. Wybierz zdrową roślinę rodzicielską (eksplant).
  2. Wyeliminuj wszelkie zanieczyszczenia mikrobiologiczne z odsłoniętych powierzchni eksplantacji.
  3. Zaszczepienie eksplantatu w odpowiedniej pożywce hodowlanej.
  4. Inkubacja eksplantatu w kontrolowanym środowisku o odpowiedniej temperaturze, wilgotności, jakości powietrza i oświetleniu.

Istnieją również cztery różne rodzaje hodowli tkanek roślinnych, które można wybrać w zależności od celów kultury lub gatunku rośliny:

  1. hodowla komórkowa (taka jak komórki gametyczne, zawiesina komórkowa i hodowla protoplastów).
  2. hodowla tkankowa (kalus i tkanki zróżnicowane).
  3. hodowla narządów (dowolne narządy, takie jak korzenie, pędy i pylniki).

Jednym z popularnych zastosowań hodowli tkanek roślinnych jest rozmnażanie klonalne in vitro – znane również jako mikrorozmnażanie. Hodowla tkanek roślinnych w tym przypadku może pomóc w rozmnażaniu roślin, które mają problemy z kiełkowaniem nasion (rośliny oporne) lub mają krótką żywotność nasion. Chociaż mikrorozmnażanie można stosować do wszystkich gatunków, jest ono zalecane w przypadku roślin niezbędnych komercyjnie lub zagrożonych wyginięciem. Na przykład mikrorozmnażanie jest szeroko stosowane w uprawie storczyków, takich jak Paphiopedilum delenatii – gatunek pochodzący z Himalajów. Te storczyki są tradycyjnie rozmnażane przez nasiona. Jednak dojrzałe storczyki potrzebują około 2-3 lat, aby je wyprodukować. Dlatego hodowla tkanek roślinnych stała się idealną metodą ochrony tego gatunku przed wyginięciem i osiągnięcia żywotności komercyjnej.

Mikrorozmnażanie można przeprowadzić na trzy różne sposoby:

  1. za pomocą pąka wierzchołkowego lub pachowego.
  2. za pomocą pąka przybyszowego.
  3. poprzez tworzenie zarodka somatycznego, przy użyciu somatycznych macierzystych komórek roślinnych.

Sukces każdej z technik zależy od tła genetycznego, pożywek hodowlanych i warunków inkubacji.