Test żywieniowy: ocena preferencji żywieniowych u Drosophila melanogaster

Streszczenie

Źródło: Bovier, T. F., et al. Metody testowania zaburzeń endokrynologicznych u Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2019).

Ten film opisuje test karmienia muszek owocowych, w którym kolorowy pokarm jest używany do monitorowania karmienia oraz wpływ, jaki dodane związki mogą mieć na aktywność żywieniową. Przykładowy protokół testuje działanie kilku substancji chemicznych zaburzających funkcjonowanie układu hormonalnego (EDC).

Protokół

Ten protokół jest fragmentem z Bovier et al., Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019).

1. Test żywieniowy

UWAGA: Ten test jest zalecany do sprawdzenia, czy obecność wybranego EDC w pożywce może wpłynąć na karmienie much.

1. Umieść 15 młodych much w fiolkach zawierających pożywkę z mąki kukurydzianej (CM) uzupełnioną różnymi stężeniami wybranego EDC i pokarmem barwiącym. Pozwól muchom żerować na pożywce przez 1 dzień.
   UWAGA: Na przykład użyj czerwonego barwnika nr 40 (1 mg/ml).
2. Umieścić 15 młodych much w fiolkach zawierających CM uzupełnionych samym rozpuszczalnikiem i barwiącym pokarmem do kontroli. Pozwól muchom żywić się pożywką przez 1 dzień.
3. Znieczulenie każdej grupy much należy przeprowadzić indywidualnie za pomocą eteru.
   1. Przenieś muchy z każdej grupy do cylindrycznego szklanego pojemnika (eteryzatora) z lejkiem włożonym do otwartego końca, odwracając fiolkę nad lejkiem i delikatnie stukając dwoma pojemnikami o siebie, aby muchy wpadły do eterizera.
      UWAGA: Lejek zapobiegnie ich wydostaniu się z eteryzatora.
   2. Powal muchy, delikatnie stukając eteryzatorem w miękką powierzchnię, taką jak podkładka pod mysz, i szybko zastąp lejek nasączoną eterem zatyczką z bawełny i gazy.
   3. Odczekaj około 1 minuty, aż muchy opadną na dno i przestaną się poruszać.
      UWAGA: Nie przekraczaj tego czasu, bo muchy umrą.
4. Umieść unieruchomione muchy pod mikroskopem stereoskopowym i porównaj zabarwienie jamy brzusznej każdej grupy leczonej w odniesieniu do grupy kontrolnej.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
17α-etynyloestradiol	Sigma	E4876-1G
Agar dla pożywki Drosophila	BIOSIGMA (BIAŁOŚĆ)	789148
Bisfenol A	Sigma	239658-50G
Bisfenol AF	Sigma	90477-100MG
Kukurydziana	CA' BIANCA
Dietylowy	Sigma
Fiolki Drosophila	BIOSIGMA (BIAŁOŚĆ)	789008	25 mm x 95 mm
Fiolki Drosophila	BIOSIGMA (BIAŁOŚĆ)	789009	29 mm x 95 mm
Fiolki Drosophila	Kaltek	Rozdział 187	22 mm x 63 mm
etanol	FLUKA	2860
Eteryzator	Rzemiosła		cylindryczny szklany pojemnik z bawełnianą zatyczką
Blender ręczny Pimmy	Ariete		robot kuchenny
Drożdże Instant Success	ESKA		Drożdże w proszku
Barwnik czerwony nr 40	Sigma	Numer katalogowy 16035
Mikroskop stereoskopowy z oświetleniem LED	Księga Leica		S4E

TGL powiedział: