Test gradientu temperatury: metoda badania preferencji temperatury u larw Drosophila

Abstract

Źródło: Liu, J., et al. Test gradientu temperatury w celu określenia preferencji termicznych larw Drosophila. J. Vis. Exp. (2018).

Muszki owocowe Drosophila potrafią rozróżniać niewielkie zmiany temperatury i dlatego wybierają środowiska o sprzyjających warunkach termicznych. Ten film opisuje test behawioralny, który testuje preferencje temperaturowe larw Drosophila na liniowym gradiencie termicznym.

Protocol

Ten protokół jest fragmentem Liu et al. Test gradientu temperatury w celu określenia preferencji termicznych larw Drosophila, J. Vis. Exp. (2018).

1. Ustawienie gradientu temperatury

1. Przygotowanie gradientu jednokierunkowego
   1. Aby stworzyć wilgotne środowisko otoczenia podczas testów, umieść dwa aluminiowe bloki połączone z dwiema kąpielami wodnymi na mokrych ręcznikach papierowych, oddalonych od siebie o 10 cm (Rysunek 1A).
   2. Włącz dwie łaźnie wodne ~ 2 godziny przed rozpoczęciem testu, aby dać wystarczająco dużo czasu na wyrównanie temp....

Results

Rysunek 1: Konfiguracje do oznaczania gradientu jedno- i dwukierunkowego. (A) Jednokierunkowa konfiguracja gradientu z dwiema aluminiowymi płytkami testowymi na dwóch aluminiowych blokach. Temperatura bloków aluminiowych jest kontrolowana przez cyrkulację wody z dwóch kąpieli wodnych. (B) Układ trzech bloków aluminiowych, łaźni wodnych i płyty aluminiowej (250 x 220 mm) dla dwukierunkow.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Aparatura do oznaczania gradientu
PolyScience 9106, Chłodzona/podgrzewana kąpiel obiegowa 6L	Thomas Naukowy	Numer katalogowy 9106	Ten model został wycofany z produkcji. Zaktualizowane modele zamienne obejmują: 1186R00 i 1197U04 dla 120 V, 60 Hz lub 1184L08 i 1197U04 dla 240 V, 50 Hz.
Aluminiowa płytka testowa (dla gradientu jednokierunkowego)			Rozmiar zewnętrzny: 14 x 10,1 x 0,9 cm, rozmiar wewnętrzny: 12,9 x 8,7 x 0,8 cm, anodowany na czarno.
Płyta aluminiowa (do gradientu dwukierunkowego)			25 x 22 x 0,2 cm, anodowane na czarno.
Blok aluminiowy			Wymiary zewnętrzne: 25,5 x 5 x 1,4 cm, parametry kanałów wewnętrznych przedstawiono na rysunku 1D.
Łącznik do bloków aluminiowych i rurek	McMaster-Carr	Numer katalogowy: 91355K82
Rurki silikonowe sanitarne Tygon	Tygon	Numer katalogowy: 57296	1/4" ID x 3/8" OD x 1/16" ściana
nazwa	firma	Numer katalogowy	Komentarze
Przedmioty i odczynniki do oznaczania
tłuczek	USA Naukowe	Numer katalogowy: 17361	Tłuczek do probówek do mikrowirówek o pojemności 1,5 ml
termometr	szczęśliwy traf	51II
Termoelement	szczęśliwy traf	Typ K
Uniwersalna pokrywka do mikropłytek	Corning	6980A77
Czasza 35 mm	Corning	Zobacz materiał 9380D40
Taśma do etykietowania (dla gradientu dwukierunkowego)	Fisher Naukowy	Numer katalogowy: 15-951	Taśma etykietowa Fisherbrand 2 cale x 14 jardów
Agarozy	Invitrogen	16500500	Przygotować 1% roztwór
sacharoza	Sigma	S0389-5KG	Przygotuj 18% roztwór tuż przed rozpoczęciem oznaczania
Pędzlem	Fisher Naukowy	Numer katalogowy: 11860
Probówki wirówkowe 50 ml	Denville	C1062-P
Ściąga	Fisher Naukowy	14-357Q
500 ml okrągła butelka z szerokim otworem	Pyrex	Lata 1395-500
Sitko do komórek (por 300 mm)	PluriSelect (Wybór Pluri)	Numer telefonu 43-50300	Opcjonalny przedmiot do mycia larw
Pudełko tekturowe (tacka na fiolki)	Genesee Scientific	FS32-124