$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Lee i Kang, Pomiar wpływu substancji chemicznych na wzrost i reprodukcję Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2017).
1. Test składania jaj przez C. elegans
- Jaja zsynchronizowane z wiekiem wysiadywać na płytce NGM zawierającej DMSO lub etopozyd przez 64 godziny (przed pierwszym urodzeniem) aż do stadium młodego dorosłego osobnika w temperaturze 20 °C.
UWAGA: Użycie robaków z eksperymentów pomiaru wzrostu jest opcjonalne. Wygodnie jest wykonać jednocześnie pomiar wzrostu i test składania jaj.
- Przenieść 5 dorosłych robaków na nową płytkę NGM bez chemikaliów (warunek 1, obróbka chemiczna w określonym czasie, od stadium jaj do młodego dorosłego osobnika) lub nową płytkę NGM zawierającą tę samą chemiczną obróbkę wstępną (warunek 2, ciągłe narażenie na chemikalia przez cały okres doświadczalny), a następnie inkubować je przez 24 godziny
UWAGA: Zaleca się wykonywanie powtórzeń przy użyciu 3-5 płytek NGM do każdego zabiegu; Powtórzenia te można wykorzystać do analizy statystycznej.
- Przenieś na nową płytkę NGM zgodnie z powyższym opisem i policz liczbę jaj każdego dnia. Policz robaki, które wypełzły z domu, umarły i wykluły się wewnętrznie.
- Powtarzaj te kroki, aż robaki przestaną składać jaja, zwykle w ciągu 5 dni.
- Oblicz liczbę jaj złożonych na robaka z każdej płytki i sumuj te wartości codziennie przez 5 dni, aby określić całkowitą liczbę złożonych jaj.
UWAGA: Wyklucz z obliczeń liczbę robaków, które wypełzły i wykluły się wewnętrznie.