Poniższy protokół jest fragmentem Mersha et al. Długoterminowe behawioralne i reprodukcyjne konsekwencje narażenia embrionów na toksyczne dawki niskich dawek, J. Vis. Exp. (2018)
<ol>
	<li>Test habituacji przedniego dotyku
	<ol>
		<li>Przenieś około 10 zsynchronizowanych młodych dorosłych robaków na nowe, niewysiewane płytki NGM za pomocą sterylizowanego ogniowo plastikowego drucianego szpikulca o wadze 30 G. Pozostaw robaki w spokoju przez 5 minut, aby miały czas na aklimatyzację do nowej płytki.</li>
		<li>Aby uzyskać reakcję przyzwyczajenia, użyj włoska brwiowego przymocowanego do końca drewnianego szpikulca lub wykałaczki i sterylizuj, zanurzając w 70% etanolu. Wytrzyj czystą, niestrzępiącą się chusteczką i odczekaj 1 minutę, aż etanol odparuje. Delikatnie dotknij robaka na głowie (przed opuszką gardłową) za pomocą włosków brwiowych. Powtórz dotknięcia, pozostawiając 10 sekund między dotknięciami, aby robak mógł się zregenerować.</li>
		<li>Kontynuuj dotykanie (pozostawiając 10-sekundowe przerwy między bodźcami), aż robak przestanie się cofać. W tym momencie robak przyzwyczaił się do bodźca. Zapisz liczbę+ dotknięć wymaganych do przyzwyczajenia się robaka.</li>
		<li>Przeanalizuj różnicę między średnimi wskaźnikami habituacji osób z grupy kontrolnej leczonej i nieleczonej, używając jednoczynnikowej ANOVA, a następnie testu post hoc Tukeya.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:601px;" width="601">
	<tbody>
		<tr wysokość="19">
			<td height="19" style="wysokość:19px;szerokość:201px;">EtOH</td>
			<td style="szerokość:115px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="szerokość:103px;">64-17-5</td>
			<td style="szerokość:183px;"></td>
		</tr>
		<tr wysokość="19">
			<td height="19" style="height:19px;">N2 (dzikie robaki C. elegans)</td>
			<td>CGC (Międzynarodowa Organizacja T</td>
			<td></td>
			<td>Repozytorium na Uniwersytecie w Minnesocie</td>
		</tr>
		<tr wysokość="19">
			<td height="19" style="wysokość:19px;">Platynowy drucik</td>
			<td>Genesee Scientific</td>
			<td>59-AWP (Język angielski)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr wysokość="19">
			<td height="19" style="wysokość:19px;">Płytki Petriego</td>
			<td>rybak</td>
			<td>07-202-011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr wysokość="19">
			<td height="19" style="wysokość:19px;">Mikroskop preparacyjny</td>
			<td>AmScope</td>
			<td>SM-2TYY</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

test habituacji dotyku: metoda badania uczenia się bez skojarzeń u c. elegans

Touch Habituation Assay: A Method to Study Non-Associative Learning in C. elegans

Źródło: Mersha, M. D., et al. <a href="https://www.jove.com/video/56771/long-term-behavioral-reproductive-consequences-embryonic-exposure-to">Długoterminowe konsekwencje behawioralne i reprodukcyjne embrionalnej ekspozycji na niskie dawki toksycznych substancji.</a> J. Vis. Exp. (2018).
Ten film przedstawia test habituacji dotyku, behawioralną metodę C. elegans służącą do oceny mechanosensacji i ilościowego określania czasu do przyzwyczajenia.

Test habituacji dotyku: metoda badania uczenia się bez skojarzeń u C. elegans

Źródło: Mersha, MD i in. Długoterminowe behawioralne i reprodukcyjne konsekwencje narażenia embrionów na niskie dawki toksyn. J. Vis. Exp. (2018).
Ten...

- C. elegans porusza się na boku, generując fale sinusoidalne wzdłuż swojego ciała. Zwierzę porusza się do przodu, gdy fale rozchodzą się od głowy do ogona. I odwrotnie, gdy fale sinusoidalne rozchodzą się od ogona do głowy, robak porusza się do tyłu. Lokomocja do tyłu, znana jako odwrócenie, jest krótka i albo występuje spontanicznie, albo jest wywoływana przez bodziec sensoryczny, na przykład delikatny dotyk przedniej części robaka. Aby wykonać test habituacji przedniego dotyku, wyizoluj wcześniej zsynchronizowane robaki w pożądanym stadium rozwojowym na niewysiewanych płytkach NGM. Używając wysterylizowanych cienkich włosów, delikatnie dotknij przedniej części ciała. Spowoduje to reakcję ucieczki, w której robak wykona odwrócenie. Odczekaj 10-sekundową przerwę między bodźcami, aby robak się zregenerował i powtórz dotyk. Aby ocenić przyzwyczajenie, które jest formą uczenia się bez asocjacji, zapisuj liczbę dotknięć, aż do momentu, gdy nie zaobserwuje się już odwrócenia. W przykładowym protokole zobaczymy demonstrację testu habituacji przedniego dotyku. - Po pierwsze, użyj wysterylizowanego ogniowo platynowego kilofa o grubości 30 mm, aby przenieść około 10 zsynchronizowanych młodych dorosłych robaków na nowe, niezasiane płytki NGM. Pozostaw robaki w spokoju przez pięć minut, aby dać im czas na aklimatyzację do nowej płytki. Następnie wysterylizuj włoski brwi przymocowane do końca drewnianego szpikulca lub wykałaczki, zanurzając je w 70% etanolu. Przetrzyj czystą, niestrzępiącą się chusteczką i odczekaj minutę, aż etanol odparuje. Delikatnie dotknij robaka na głowie za pomocą włosków brwiowych. Powtórz dotknięcia, pozostawiając 10 sekund między dotykami, aby robak mógł się zregenerować. Kontynuuj dotykanie, pozostawiając 10-sekundowe przerwy między bodźcami, aż robak przestanie się cofać. Zapisz liczbę dotknięć wymaganych do wystąpienia tego przyzwyczajenia. - Zapewnienie 10-sekundowej przerwy między dotknięciami jest ważne, ponieważ pozwala to zwierzęciu na regenerację i pomaga w uzyskaniu spójnych testów zachowań habituacyjnych.

touch-habituation-assay-method-to-study-non-associative-learning-c

Research

JoVE Encyclopedia of Experiments

Biology

Biologia

Caenorhabditis elegans (worm)

Caenorhabditis elegans (nicień)

Behavior

Zachowanie

2.8K Views. - C. elegans porusza się na boku, generując fale sinusoidalne wzdłuż swojego ciała. Zwierzę porusza się do przodu, gdy fale rozchodzą się od głowy do ogona. I odwrotnie, gdy fale sinusoidalne rozchodzą się od ogona do głowy, robak porusza się do tyłu. Lokomocja do tyłu, znana jako odwrócenie, jest krótka i albo występuje spontanicznie, albo jest wywoływana przez bodziec sensoryczny, na przykład delikatny dotyk przedniej części robaka. Aby wykonać t...

Test habituacji dotyku: metoda badania uczenia się bez skojarzeń u C. elegans

W tym artykule

Streszczenie

Protokół

Materiały

Tagi

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
EtOH	Sigma-Aldrich	64-17-5
N2 (dzikie robaki C. elegans)	CGC (Międzynarodowa Organizacja T		Repozytorium na Uniwersytecie w Minnesocie
Platynowy drucik	Genesee Scientific	59-AWP (Język angielski)
Płytki Petriego	rybak	07-202-011
Mikroskop preparacyjny	AmScope	SM-2TYY