Artykuł metodologiczny

Test preferencji jasno-ciemnej: metoda badania zachowań związanych z lękiem u danio pręgowanego

30 kwietnia 2023

W tym artykule

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Źródło: Holcombe, A., et al. Nowatorska metoda podawania leków wielu danio pręgowanemu (Danio rerio) i kwantyfikacja odstawienia. J. Vis. Exp.(2014)

Film opisuje test preferencji jasnego i ciemnego w celu zbadania zachowania związanego z lękiem u danio pręgowanego po ekspozycji na etanol.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Testy behawioralne

  1. Uzyskaj jasną/ciemną arenę o szerokości 9,5 cm, długości 55 cm i głębokości 9,5 cm z białą wodoodporną podłogą (Rysunek 1B). Przymocuj biały i wodoodporny papier nieodblaskowy do wewnętrznych ścian areny za pomocą rzepów, tak aby połowa areny była pokryta na biało, a połowa na czarno. Napełnij arenę do głębokości 5 cm wodą z siedliska o temperaturze 25-28 °C. Utrzymuj tę temperaturę przez cały czas trwania testów.
  2. Zminimalizuj zewnętrzne bodźce wzrokowe, konstruując białą trójstronną obudowę, w której ma być usytuowana arena. Upewnij się, że obszar testowy ma rozproszone oświetlenie górne, które nie powoduje odbić na powierzchni wody, a jednocześnie jest wystarczająco jasne dla oprogramowania do śledzenia ruchu lub ręcznej kwantyfikacji post-hoc na podstawie obrazów wideo.
  3. Umieść arenę w obudowie i ustaw parametry nagrywania i analizy ruchu w oprogramowaniu do śledzenia zachowań. Ustaw czas trwania próby na 5-15 minut, w zależności od pytania badawczego.
    UWAGA: Tutaj wykorzystaliśmy 5 min.
  4. Przetransportuj grupę ryb, które mają być badane, na obszar badawczy w zbiorniku siedliskowym i umieść je poza ogrodzeniem areny. Aklimatyzować ryby przez 10 minut.
  5. Delikatnie złap rybę z odpowiedniej grupy i umieść ją na środku jasnej/ciemnej areny, pamiętając, aby wypuścić rybę, gdy jest ustawiona równolegle do długiej osi areny, aby uniknąć odchylenia ryby do jasnej lub ciemnej strefy.
  6. Rozpocznij nagrywanie zachowania natychmiast po wypuszczeniu zwierzęcia. Uważaj na wszelkie problemy z oprogramowaniem podczas śledzenia ryb lub skakanie lub zawieszanie się ryb. Obróć arenę o 180° po przetestowaniu połowy badanych, aby zapobiec wszelkim zakłóceniom wynikającym z uprzedzeń wynikających z tego, który koniec areny jest zorientowany w kierunku otwartego końca obudowy.
  7. Po zakończeniu próby delikatnie zasiać siatkę i przenieść rybę z areny do zbiornika retencyjnego lub zbiornika siedliskowego.

2. Analiza

  1. Zbadaj czas spędzony w jasnych i ciemnych strefach. Dla każdej grupy i każdej ryby uzyskaj względny czas spędzony w jasnych i ciemnych strefach i przeanalizuj za pomocą testu t dla jednej próbki (lub testu rang podpisanego Wilcoxona dla danych nieparametrycznych; różnica od (połowa całkowitego czasu próby) 150 sekund), aby określić, czy grupy znacząco preferują jeden obszar nad drugim.
  2. Aby porównać preferencje, oblicz indeks preferencji, odejmując czas spędzony w jasnej strefie od czasu spędzonego w ciemnej strefie i porównaj różnice między grupami. Testy t mogą być używane do porównywania dwóch grup. Porównaj wiele grup za pomocą jednokierunkowej analizy wariancji, wykorzystując test post hoc HSD Tukeya, jeśli to konieczne (lub test Kruskala-Wallisa z testem post hoc wielokrotnego porównania Dunna dla danych nieparametrycznych).
  3. Porównaj prędkość, liczbę przejść stref, meandrowanie i bezruch w grupach. W razie potrzeby należy użyć jednokierunkowej analizy wariancji z wykorzystaniem testu post hoc HSD Tukeya (lub testu Kruskala-Wallisa z testem post hoc Dunna z wielokrotnym porównaniem dla danych nieparametrycznych).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Rysunek 1: Procedura transferu i arena Światło/Ciemność. Zdjęcia te ilustrują procedurę transferu. (A) Po pierwsze, ryby znajdują się w zbiorniku transferowym (po lewej). Zbiornik dozujący zawierający etanol jest pokazany na zdjęciu (po prawej). (B-C) Przenoszenie ryb ze zbiornika transferowego do roztworu etanolu wymaga od badacza podniesienia wkładki tarłowej ze zbiornika transferoweg...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Jasna/Ciemna Arena zwyczajKonstrukcja zgodna z opisem procedury. 9,5 cm szerokości, 9,5 cm głębokości, 55 cm długości.
System obudów stołowych z trzema półkamiSiedliska wodneN/a
Zbiornik tarłowy 1,5 l z przegrodą 400 μmSiedliska wodneN/a
Oprogramowanie do śledzenia ruchu Ethovision XTTechnologia informacyjna Noldus
Czysty etanol zbożowyLuxco, INC N/a

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Light Dark Preference TestAnxiety Related BehaviorZebrafish AnxietyEthanol ExposureBehavioral TrackingLight Dark ArenaTime Spent AnalysisPreference Index CalculationT Test AnalysisOne Way ANOVA

Powiązane artykuły