Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Rozwarstwienie soczewki oka: technika obserwacji morfologii soczewki danio pręgowanego

3.4K wyświetleń

30 kwietnia 2023

W tym artykule

Streszczenie

Źródło: Vorontsova I. et al, Ocena lokalizacji jądra soczewki danio pręgowanego i integralności szwów. J. Vis. Exp. (2019).

Ten film opisuje protokół, który został opracowany do analizy soczewek dorosłych i larw danio pręgowanego w celu analizy morfologii soczewki korowej i integralności strukturalnej szwów soczewki.

Protokół

1. Sekcja soczewek larw i dorosłych ryb danio pręgowanego

  1. Znieczulaj ryby od 6 dpf larw do dorosłości tricainą, aż przestaną reagować na dotyk, ale nadal będą wykazywać silne bicie serca. Zmierz standardową długość ryby zgodnie z Schillingiem (2002) do inscenizacji.
  2. Natychmiast wyciąć oczy za pomocą nożyczek do mikropreparacji i umieścić w naczyniu separacyjnym w PBS (rysunek 1 pokazany dla oczu dorosłych).
    1. Zrób niestandardową miskę 35 mm wypełnioną silikonem do sekcji soczewek. Po związaniu silikonu należy wyciąć wgłębienie o średnicy około 2-3 mm i głębokości 0,5 mm w celu unierucho....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Obrazy mikroskopowe z mikroskopu preparacyjnego typu rybie oko; Widok przedni/tylny, usuwanie soczewek, podziałka 2 mm.
Rycina 1: Rozwarstwienie soczewki danio pręgowanego. (A) Oczy są wycinane ze znieczulonych ryb i umieszczane tylną stroną do góry (B). (C) Oczy są unieruchamiane za pomocą kleszczy przez tarczę nerwu wzrokowego (od) i wykonuje się dwa do trzech promieniowych.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Solanka fizjologiczna buforowana fosforanami (PBS)Fisher NaukowyZobacz materiał BP399
Talerz mikrodołkowy ze szklanym dnem (szalka Petriego 35 mm, mikrostudzienka 14 mm, szkło nakrywkowe #1.5)Korporacja MatTekP35G-1.5-14-C
Kleszcze Dumont #5Dumont & FilsUtrzymuj kleszcze zaostrzone
Nożyczki do mikropreparacji VannasTed Pella Inc1346Ostre/ostre proste końcówki
Mikroskop konfokalnyNikonZaćmienie Ti-E
Kulki wodorotlenku soduFisher NaukowyZobacz materiał S612-3UWAGA - działa żrąco/drażniąco na oczy i skórę, narząd docelowy - Journal of Visualized Experiments www.jove.com Copyright © 2019 Journal of Visualized Experiments Strona 2 z 2 układ oddechowy, na metale
Jednorazowe pipety szklane PasteuraMarka rybacka13-678-20A
szt.

Tagi

Disekcja soczewki rybki zebrafishmorfologia soczewki okaanaliza szwów soczewkitechnika mikrodysekcjianatomia oka rybki zebrafishsoczewka larwy rybki zebrafishsoczewka dorosłej rybki zebrafishmedium do dysekcji PBSprzygotowanie naczynia silikonowegomanipulacja pęsetą