Współkultura komórek BC: hodowla komórek raka piersi z fragmentami kości w celu zbadania proliferacji komórek rakowych

Streszczenie

Źródło: Templeton, Z. S., et al. Methods for Kultur Human Femur Tissue Explants to Study Breast Cancer Cell Colonization of the Metastatic Niche. J. Vis. Exp (2015).

Ten film opisuje hodowlę komórek raka piersi przylegających do eksplantatów kości udowej w celu zmierzenia proliferacji i kolonizacji komórek rakowych w systemie modelowym ludzkiej tkanki kostnej.

Protokół

1. Hodowla komórek raka piersi sąsiadujących z fragmentami kości w celu pomiaru proliferacji komórek piersi za pomocą BLI

1. Przed eksperymentem należy przygotować zawiesinę zawierającą 2 x 10⁵ komórek raka piersi/50 μl oraz przygotować czopy wosku kostnego do unieruchomienia fragmentów kości w hodowli. Pokrój końcówkę mikropipety P200 na 3 części i użyj wąskiego końca największego kawałka w formie "foremki do ciastek", aby pokroić małe (~35 mg) kawałki wosku kostnego. Użyj szerokiego końca najmniejszego kawałka, aby wysunąć korki wosku kostnego do szalki Petriego w celu przechowywania.
2. Umieść kawałek wosku kostnego w pozycji godziny 12 k....

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
DMEM (1X) + GlutaMAX-l	Technologie życiowe	Numer katalogowy: 10569-010	Uzupełnij wszystkie DMEM 10% płodowej surowicy bydlęcej i 1% Pen/Strep
Surowica bydlęca płodu	Technologie życiowe	Numer katalogowy: 16000-044
Penicylen Streptomycyna	Technologie życiowe	Rozdział 15140-122
D-lucyferyna świetlik, sól potasowa 5 g (30 mg/ml)	Technologie życiowe	L-8220
6 Dobrze traktowany klaster kultur komórkowych z TC	Corning Incorporated	Numer katalogowy: 3516
Friedmana-Pearsona Rongeura	Narzędzia naukowe	Numer katalogowy 16021-14
Wosk kostny	Korporacja Specjalizacji Chirurgicznych	Okręg wyborczy 903
Platforma obrazowania IVIS 50	Suwmiarka Nauki Przyrodnicze/PerkinElmer
Komórki raka piersi MCF-7	Kontroler ATCC (Kontroler T	Zobacz materiał HTB-22
MDA-MB-231 komórki raka piersi	Kontroler ATCC (Kontroler T	Zobacz materiał HTB-26

TGL