Method Article

Mikromacierz przeciwciał: technika badania ekspresji białek w komórkach raka płuc leczonych miRNA

April 30th, 2023

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Źródło: Hossian, A. et al. Analiza kombinatorycznych zabiegów miRNA w celu regulacji cyklu komórkowego i angiogenezy. J. Vis. Exp. (2019).

Ten film opisuje technikę badania ekspresji białek w transfekowanych komórkach raka płuc transfekowanych miRNA za pomocą mikromacierzy przeciwciał do pomiaru ekspresji określonych genów. W przedstawionym protokole wykonujemy mikromacierz przeciwciał w celu identyfikacji aktywności kombinatorycznego leczenia miRNA w zatrzymywaniu cyklu komórkowego i angiogenezie.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. transfekcja miR-143 i miR-506

UWAGA: Używaj rękawiczek lateksowych, okularów ochronnych i fartucha laboratoryjnego podczas wykonywania opisanych eksperymentów. W razie potrzeby należy używać komory bezpieczeństwa biologicznego z włączonym wentylatorem szafy, nie blokując dróg oddechowych ani nie zakłócając laminarnego przepływu powietrza. Zawsze ustawiaj szybę ochronną na odpowiedniej wysokości, zgodnie z opisem producenta.

  1. Nasiona komórek NSCLC A549 w kolbie T25 cm2/płytce 6/96 dołków w pożywce DMEM/F12K uzupełnionej 10% FBS i 1% penicyliny-streptomycyny (pożywka hodowlana) w kapturze do hodowli t....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Nie stwierdzono konfliktu interesów.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
A549 Komórki niedrobnokomórkowego raka płuc Kontroler ATCC (Kontroler TATCC CCL-185
Penicylina-streptomycyna 10/10 Antlanta BiologicalsZobacz materiał B21210
Płodowa surowica bydlęca (FBS) Fisher Naukowy10438026
Zestaw do oznaczania matrycy przeciwciał, 2 reakcje Biografia Księżyca w pełni KAS02
Matryca przeciwciał cyklu komórkowego, 2 szkiełka Biografia Księżyca w pełniZobacz materiał ACC058
Skaner ScanArray Express PerkinElmer powiedział:Krok 2.33: Oprogramowanie do analizy mikromacierzy
Sól fizjologiczna buforowana fosforanem hyklonu (PBS) Fisher NaukowySH30256FS
Test białka Thermo Scientific Pierce BCA Thermo ScientificPI23226
powiedział:

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Antibody MicroarrayProtein ExpressionmiRNA TreatedLung Cancer CellsCell CycleAngiogenesisBiotin LabelingFluorescent DetectionMicroarray ScannerWashing Buffer

Related Articles