Artykuł metodologiczny

Wewnątrzkomorowe wstrzykiwanie i elektroporacja in utero embrionów szczura w 16. dniu rozwoju (E16)

15.6K wyświetleń

DOI:

10.3791/236

19 lipca 2007

W tym artykule

Streszczenie

In-utero in-vivo iniekcja i elektroporacja embrionalnego neocortex szczura stanowią potężne narzędzie do manipulacji pojedynczymi progenitorami wyścielającymi ściany komór bocznych. Technika ta jest obecnie szeroko stosowana do badania procesów zaangażowanych w kortykogenezę poprzez nadekspresję lub wyciszanie genów oraz obserwację efektów w zakresie proliferacji, migracji i różnicowania komórkowego. W porównaniu do tradycyjnych strategii knockoutu, elektroporacja in-utero zapewnia szybki sposób manipulacji populacją komórek w określonym oknie czasowym. W niniejszym protokole wideo przedstawiamy metodologię eksperymentalną przygotowania szczurów do zabiegu, odsłaniania rogów macicy poprzez laparotomię, wstrzykiwania DNA do komór bocznych rozwijającego się zarodka, elektroporacji DNA do progenitorów wyścielających ścianę boczną oraz opieki nad zwierzętami po operacji. Nasze laboratorium stosuje ten protokół w zabiegach na szczurach w dniach E15–E21, jednak najczęściej jest on wykonywany w dniu E16, jak pokazano w tym filmie.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Iniekcja in uteroelektroporacja domi niowamikrowstrzykiwanie DNAsystem elektroporacjiciinanie ko c wki pipetyods oni cie rogu macicycelowanie w komory m zgu zarodkapooperacyjna opieka nad zwierz tamitechnika manipulacji genetycznej

Powiązane artykuły