Laminotomia do celowanego wstrzykiwania do ganglionu korzenia grzbietowego odcinka lędźwiowego w modelu świni

Streszczenie

Źródło: Unger, MD i in., Laminotomia w celu uzyskania dostępu do ganglionu korzenia grzbietowego lędźwiowego i wstrzyknięcia u świń. J. Vis. Exp. (2017)

Ten film przedstawia procedurę laminotomii u znieczulonej świni w celu uzyskania dostępu do ganglionu korzenia grzbietowego odcinka lędźwiowego w celu ukierunkowanego dostarczania neuroterapeutycznego przy użyciu dostarczania wzmocnionego konwekcją.

Protokół

Wszystkie procedury z udziałem modeli zwierzęcych zostały zweryfikowane przez lokalną instytucjonalną komisję ds. opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

Laminotomia jednopoziomowa

1. Zidentyfikuj cel laminotomii jako najbardziej środkową blaszkę znajdującą się między dwoma stawami zygapophyseal i przyśrodkową.
2. Prześledź blaszkę do jej dolnej krawędzi, do punktu tuż przyśrodkowego do przyległego dolnego wyrostka stawowego ogonowego stawu zygapophyseal
.
3. Użyj 5-milimetrowego podnośnika Freer lub łyżeczki, aby dotknąć przejścia między prawie krawędzią blaszki ogonowej a kanałem centralnym.
   UWAGA: Należy uważać, aby nie naciskać na instrument palpacyjny do przodu, ponieważ spowoduje to kontakt z workiem oponowym i rdzeniem kręgowym. Należy zauważyć, że rdzeń kręgowy u świń rozciąga się poza odcinek lędźwiowy kręgosłupa. Krążek międzykręgowy może być użyty do usunięcia dodatkowej tkanki miękkiej pokrywającej ten obszar, aby ułatwić badanie palpacyjne.
4. Użyj 2-milimetrowego, kątowego kąta gryzienia Kerrison pod kątem 45 stopni, aby wydobyć kość w kawałkach. Usuń kość wzdłuż podstawy wyrostka kolczystego wyżej do poziomu tuż doogonowego do ogonowej powierzchni szypułki i na boki do pełnego zakresu.
5. Użyj kątowych rongeurów kostnych, aby pomóc w usuwaniu kości. Pozostaw dolny wyrostek stawowy, który był połączony z blaszką, na miejscu, aż laminotomia zostanie w dużej mierze zakończona.
6. Upewnij się, że dolny wyrostek stawowy jest swobodnie ruchomy i przyczepiony tylko przez torebkę stawową zygapophyseal. Naciąć kapsułkę za pomocą ostrza #15 lub #11.
7. Usuń dolny wyrostek stawowy w sposób kawałkowy, ale pozostaw przylegający górny wyrostek stawowy nienaruszony.
   UWAGA: Po zakończeniu laminotomii wykonuje się hemostazę za pomocą elektrochirurgii bipolarnej. Elektrochirurgia monopolarna nie jest stosowana ze względu na bliskość struktur nerwowych. Wosk kostny można umieścić wzdłuż miejsc krwawienia z odsłoniętej kości, a wchłanialne gąbki żelatynowe można użyć do uzyskania hemostazy w pobliżu tkanek miękkich. Bawełna jest pomocnym narzędziem do odprowadzania płynu surowiczego i krwi z sekcji.

Rozwarstwienie zwoju korzenia grzbietowego (DRG)

1. Ewakuować tłuszcz zewnątrzoponowy w sposób kawałkowy od powierzchownego do głębokiego, zaczynając przyśrodkowo i postępując bocznie. Usuń tłuszcz przez delikatną sekcję za pomocą bipolarnych kleszczy i odsysanie za pomocą 6 - 10 francuskich końcówek ssących Fraziera.
   UWAGA: Lupa powiększenie lub użycie mikroskopu preparacyjnego jest pomocne w zapewnieniu poziomu szczegółowości potrzebnego do bezpiecznego usunięcia tłuszczu zewnątrzoponowego i uzyskania skrupulatnej hemostazy zewnątrzoponowego splotu żylnego za pomocą elektrochirurgii bipolarnej.
2. Zidentyfikuj worek oponowy wzdłuż linii środkowej biegnącej w kierunku naddolnym, równoległym do osi nacięcia skóry. Usuń tłuszcz zewnątrzoponowy wzdłuż worka oponowego, aż worek oponowy będzie widoczny, aby spowodować powstanie rękawa korzenia nerwu opony twardej.
3. Prześledź rękaw opony twardej bocznie i dolnie przez zewnątrzoponową ewakuację tłuszczu, drg, aż zobaczysz, że powiększa się wokół DRG (zwoju korzenia grzbietowego).
   UWAGA: Zidentyfikuj DRG ze względu na jego owalny kształt i kolor od żółtego do pomarańczowego. W środkowej części odcinka lędźwiowego kręgosłupa DRG ma zwykle rozmiar 4 - 6 mm, jest najdłuższy w kierunku przyśrodkowym do bocznego i znajduje się bezpośrednio poniżej lub 2 - 3 mm przyśrodkowo do odpowiedniej szypułki. , prostokątny haczyk nerwowy może być użyty do delikatnego badania palpacyjnego szypułki.
4. Ewakuuj tłuszcz zewnątrzoponowy z boku, za DRG, aż do wyświetlenia sąsiedniego nerwu rdzeniowego.
   UWAGA: Jeśli dojdzie do durotomii, napraw ją przez wodoszczelne zamknięcie za pomocą nylonowego szwu 6-0 i gładkiego mikrowkrętaka igłowego w prostym ściegu do biegania.

Wstrzyknięcie zwoju korzenia grzbietowego

1. Użyj igły rdzeniowej o rozmiarze 22, aby poprowadzić trajektorię igły do dostarczania z konwekcją (CED) o rozmiarze 32. Nakłuć igłę prowadzącą o rozmiarze 22 przez skórę i mięśnie przykręgosłupowe.
   UWAGA: Igła CED jest przeznaczona do osiągania konwekcji płynu w tkance, znanej również jako przepływ masowy, ze względu na gradienty ciśnienia.
2. Skieruj igłę prowadzącą wzdłuż trajektorii, która jest zbliżona do osi podłużnej DRG i powoduje, że końcówka igły wyłania się z bocznej ściany przykręgosłupowej pola rozwarstwienia.
3. Dostosuj ścieżkę igły, aż prześwit igły zrówna się ze środkiem DRG.
   UWAGA: Igła prowadząca nigdy nie powinna stykać się z DRG.
4. Pobrać jałowy wstrzykiwacz do jałowej strzykawki i podłączyć strzykawkę do jałowego przewodu infuzyjnego.
5. Przymocować rurkę do igły CED i wyjąć strzykawkę z pola sterylnego. Podłączyć strzykawkę do programowalnej pompy strzykawkowej.
   UWAGA: Rurka jest przygotowana na długość 5 stóp, aby zapewnić utrzymanie sterylności i mobilności. Niezwykle ważne jest również, aby do roztworu nie wprowadzano pęcherzyków powietrza.
6. Wstrzykiwać tak długo, aż wyraz twarzy będzie widoczny na końcówce igły do pomiaru głębokości występowania.
7. Umieść igłę CED w świetle igły prowadzącej i powoli przesuwaj igłę CED, aż wysunie się z końcówki igły prowadzącej. Upewnij się, że DRG nie jest przebity podczas ustawiania igły.
8. Dostosuj położenie igły prowadzącej wzdłuż długiej osi jej trajektorii, aby określić ostateczne położenie końcówki CED.
9. Zabezpiecz igłę prowadzącą i igłę CED razem za pomocą blokujących się piast igieł po osiągnięciu głębokości i wyrównania prowadnicy i igieł CED.
10. Upewnij się, że wszystkie połączenia aparatu iniekcyjnego są w pełni zabezpieczone, w tym igła prowadząca, igła CED i podłączony przewód obciążony wstrzykiwaczem.
11. Przesuń igłę prowadzącą wzdłuż jej długiej osi, aby zbliżyć się do końcówki igły CED i DRG.
12. Nakłuć DRG końcówką igły do pomiaru siły roboczej.
13. Zanurz końcówkę igły CED w trójwymiarowym środku DRG.
    UWAGA: Ponieważ DRG jest trójwymiarową strukturą o zmiennym rozmiarze i kształcie, ekspozycja DRG musi być kompletna, aby dokładnie umieścić końcówkę igły CED w prawdziwym środku DRG. Prawdziwe centrum DRG znajduje się na przecięciu jego trzech osi anatomicznych, a mianowicie osi przedniej do tylnej, bocznej do środkowej i górnej do dolnej.
14. Dostarczyć 100 μl iniekcji metodą CED z podziałką i objętością w 3 krokach.
15. W pierwszym etapie dostarczyć 4 μl przy 2 μl/min. Dostarczyć 8 μl przy 4 μl/min w drugim etapie. Dostarczyć 88 μl przy 8 μl/min dla trzeciego i ostatniego kroku.
    UWAGA: Pozostaw 3-minutową przerwę między krokami i po ostatnim kroku, aby umożliwić zrównoważenie ciśnienia.
16. Wyjmij aparat do wstrzykiwań po ostatnim etapie wstrzykiwania i zrób 3-minutową przerwę wzdłuż jego długiej osi płynnym, delikatnym ruchem.
    UWAGA: W przypadku wstrzykiwanych roztworów, które są bezbarwne, w roztworze znajduje się kolorowy barwnik o stężeniu 0,1% wagowo-objętościowym, aby pomóc w wizualnej ocenie rozkładu wstrzykiwanego roztworu. Również niezbędny barwnik 4',6-diamidino-2-fenyloindol (DAPI) jest zawarty w roztworze w stężeniu 0,25 μg/μL, gdy projekt badania wymaga oceny histologicznej dystrybucji iniekcji.

Zamknięcie

1. Przed zamknięciem nałóż 3 rundy ciepłego irygacji solą fizjologiczną na miejsce operacji, aby zmobilizować i wypłukać miejsce z gruzu, tj. fragmentów kości. Użyj ssania, aby odzyskać sól fizjologiczną i zanieczyszczenia.
   UWAGA: Skrupulatna hemostaza jest zapewniona, gdy nawadnianie pozostaje czyste. W tym czasie usuwa się środki hemostatyczne (gąbka żelatynowa) i bawełniany. Upewnij się, że wszystkie materiały i narzędzia zostały usunięte z miejsca nacięcia przed zamknięciem.
2. Do zamknięcia użyj techniki 3-warstwowej.
3. Zszyj powięź piersiowo-lędźwiową za pomocą szwu 0 w prosty, przerywany, nieodwrócony sposób. Umieszczaj ścieg co 5 - 8 mm, aby uzyskać wodoszczelne zamknięcie.
4. Zszyj tkankę podskórną za pomocą szwu 2-0 w prosty, przerywany, odwrócony sposób za pomocą szwu umieszczonego co 5 do 8 mm, aby uzyskać odpowiednią wytrzymałość.
5. Zamknij skórę za pomocą szwu 0 w prosty, ciągły lub przerywany sposób.
6. Użyj licznika igieł, aby upewnić się, że żadne ostre narzędzia nie zostały pominięte.
7. Przepłukać skórę solą fizjologiczną, osuszyć skórę i umieścić samoprzylepne paski bandaża prostopadle do nacięcia.
8. Umieść gazę na paskach bandaża i przymocuj ostatnią samoprzylepną zasłonę do nacinania antybakteryjnego.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Jednorazowy kanister ssący i rurka	Medline		DYND44703H-przyciskowy
przełącznik elektrochirurgiczny ołówek monopolarny	Medtronic	E2450H-15
ostrze	Miltex	4-315	-
11 ostrzy	Miltex	4-311-4x4
gaza chirurgiczna	Dynarex	3262-Freer
winda, 5 mm	Medline		MDS4641518F-Wosk
kostny	Ethicon	W31G-Spurling
krążek międzykręgowy rongeur, 3 mm	Sklar	42-2852-Spurling
45-stopni, up-gryzący Kerrison rongeur, 2 mm	Medline
MDS4052802-Leksell kątowy rongeur, 2 mm	Sklar	40-4097-Końcówka
ssąca Frazier, 6 Fr	Sklar	50-2006-Końcówka
ssąca Frazier, 10 Fr	Sklar	50-2010-Dandy
hak nerwowy kątowy	Medline		MDS4005220-Nylon
6-0	Miernik Ethicon	697G-22
Igła rdzeniowa z punktem Quinke	Halyard Health	18397-Rurka
polietylenowa, 5 stóp	Scientific Commodities	BB31695-PE/05-DAPI
	Szew Sigma-Aldrich	D9542-Vicryl
, 0	Ethicon	J603H-Szew
Vicryl, 2-0	Ethicon	J317H-Licznik
igieł	Medline
NC20FBRGS-Steri-strip zamknięcie typu skin, 1/2x4 cal	3M	R1547	-

,