Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Izolacja i hodowla bakterii Clostridioides difficile z jelita larwalnego danio pręgowanego

542 wyświetleń

⸱

26 września 2025

W tym artykule

Streszczenie

Źródło: Li, J., et al., Opracowanie modelu infekcji larwalnego danio pręgowanego dla Clostridioides difficile. J. Vis. Exp. (2020)

Ten film pokazuje izolację i hodowlę bakterii Clostridioides difficile z jelita larw danio pręgowanego. Zakażone jelito jest preparowane, homogenizowane i inkubowane w selektywnych pożywkach beztlenowych zawierających antybiotyki. Warunki te hamują konkurencyjne drobnoustroje i sprzyjają wzrostowi żywotnych komórek.

Protokół

Sekcja jelita larwalnego danio pręgowanego w celu odzyskania żywotnych Clostridioides difficile

  1. Odizoluj przewód pokarmowy od larw, aby przeanalizować obciążenie bakteryjne. Zacznij od eutanazji larw danio pręgowanego za pomocą 0,4% tricainy.
  2. Zepręgowany krótko opłucz sterylnym 1x PBS (sól fizjologiczna buforowana fosforanami) i przenieś je na świeżą płytkę agarozową.
  3. Sekcja danio pręgowanego
    1. Wbij igłę w grzbietowy pień larw danio pręgowanego w pobliżu głowy, aby unieruchomić danio pręgowanego. Usuń głowę za skrzelami za pomocą lancetu.
    2. Włóż drugą igłę w środek tułowia grzbi....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
AgarozySigma-AldrichNr kat. A2576Agaroza o bardzo niskiej zawartości żelowania
Agaroza niskotopliwa (LM)Pronadisa (Szczep Górski)8050Jest stosowany w płytkach agarozowych
Clostridioides difficile  R20291, szczep rybotypu 027, produkcja TcdA+/TcdB+/CDT+
Poziomy ściągacz igiełSutter instrument IncP-87 (samolot P-87) 
Mikro wtryskiwaczEppendorf powiedział:5253000017 
TaurocholatCarl Roth GmbH8149 
TrikainaSigma-AldrichE10521 powiedział: 

Przeglądaj więcej artykułów

Inkubacja beztlenowapodłoża selektywnehomogenizacja tkaneksekcja jelitsuplementacja antybiotykamiizolacja drobnoustrojówhodowla bakteryjnakomora beztlenowa