Ten film przedstawia półstały test agarowy na bazie barwnika redoks do oceny ruchliwości bakterii poprzez wizualne rozróżnienie szczepów ruchliwych i nieruchliwych.
NUTA: Osiemdziesiąt szczepów wyizolowano ze środowiska wodnego i zidentyfikowano za pomocą automatycznego przyrządu do identyfikacji bakterii (patrz tabela materiałów), w tym Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella spp., Vibrio spp., Klebsiella pneumoniae i Aeromonas hydrophila (tabela 1). Staphylococcus aureus (patrz tabela materiałów) zastosowano jako ujemną kontrolę nieruchomą; Jako szczepy kontroli pozytywnej wykorzystano Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa i Salmonella typhimurium (patrz tabela materiałów).
Zidentyfikuj testowe szczepy bakterii, które zostaną wykorzystane do analizy ruchliwości.
Obejmują ujemne nieruchome kontrole i ruchliwe dodatnie szczepy kontrolne.
Obserwacja ruchliwości bakterii wzmocniona TTC
Pobrać pojedyncze kolonie badanych bakterii z płytek agarowych i zaszczepić je w pożywce półstałej za pomocą TTC (chlorek 2,3,5-trifenylotetrazolu), nakłuwając je igłami do zaszczepiania.
Hodować probówki w temperaturze 37 °C w inkubatorze przez 24-48 godzin w celu obserwacji wyników.
Obserwuj stan wzrostu: scharakteryzuj bakterie jako nieruchome (-), jeśli tylko linia nakłucia jest czerwona. Scharakteryzuj bakterie jako ruchliwe (+), jeśli czerwony kolor rozprzestrzenia się lekko na zewnątrz wzdłuż linii nakłucia.
Tabela 1: Porównanie ruchliwości bakterii.
Naprężać
Pożywka półstała z agarem 0,4%
Pożywka półstała z 0,4% agarem i 0,005% TTC
24 h
48 h
24 h
48 h
P. aeruginosa (P. aeruginosa) ATCC27853
+
+
+
+
Bakteria E. coli ATCC25922
+
+
+
+
S. typhimurium ATCC14028
+
+
+
+
S. aureus (złocist) ATCC25923
-
-
-
-
E. coli (15)
12
14
13
14
Salmonella spp. (8)
7
8
8
8
A. hydrophila (20)
18
20
20
20
Vibrio spp. (8)
7
8
8
8
P. aeruginosa (24)
18
20
22
23
K. pneumoniae (5)
-5
-5
-5
-5
Liczby wskazują liczbę szczepów dodatnich (+) i ujemnych barwień (-).
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Materials
List of materials used in this article
Name
Company
Catalog Number
Comments
Bacto Agar
Firma Difco
Escherichia coli (Escherichia coli)
Kontroler ATCC (Kontroler T
ATCC25922
Kontrola pozytywna
Pseudomonas aeruginosa
Kontroler ATCC (Kontroler T
ATCC27853
Kontrola pozytywna
Staphylococcus aureus (gronkowiec złocisty)
Kontroler ATCC (Kontroler T
ATCC25923
Ujemna kontrola nieruchoma
Tryptoza
OXOID (OXOID)
TTC (chlorek 2,3,5-trifenylotetrazolu)
Sigma
298-96-4
System automatycznej identyfikacji mikrobiologicznej VITEK 2
Bio Mérieux
Reprints and Permissions
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article