Test biosensora bakteryjnego do wykrywania biodostępnej rtęci w warunkach beztlenowych

Streszczenie

Źródło: Stenzler, B. R. i wsp., Beztlenowy test biosensoryczny do wykrywania rtęci i kadmu. J. Vis. Exp. (2018)

Ten film pokazuje wykorzystanie genetycznie zmodyfikowanych bioczujników bakteryjnych do dokładnego pomiaru biodostępnej frakcji jonów rtęci w warunkach beztlenowych. Zmieniając stężenie siarczanu magnezu, test zapewnia, że bioczujnik selektywnie reaguje na wolne jony rtęci, na co wskazują zmiany intensywności fluorescencji.

Protokół

1. Test narażenia

1. Projektowanie układu płyt.
   NUTA: Należy upewnić się, że wszystkie wartości pipetowania zostały obliczone, a zapasy przygotowane przed rozpoczęciem badania narażenia. Szczegółowe informacje na temat tego, jak prawidłowo zaprojektować eksperyment i jakie elementy sterujące należy uwzględnić, opisano w tekście. Ponadto eksperymentu nie należy rozpoczynać, jeśli w komorze beztlenowej wskazanej na monitorze beztlenowym znajduje się tlen.
2. Zaprojektuj układ płytki zgodnie z szablonem 96-dołkowym. Pozwoli to na przeprowadzenie eksperymentów przy użyciu 32 różnych metod lec....

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Fiolka standardowa o pojemności 7 ml, zaokrąglone wnętrze	Delta Scientific	200-007-20	34 zalecane
Tacka na fiolki, otwory 21 mm	Delta Scientific	730-2001	4 dla (siatka 4 x 8)
Zapięcie 24 mm	Delta Scientific	600-024-01	Zalecane: 32
Corning 96-dołkowa przezroczysta, niewiążąca mikropłytka powierzchniowa z przezroczystym dnem	Corning	Corning 3651 powiedział:
Komora beztlenowa (komora rękawicowa)			Powietrze w komorze beztlenowej powinno składać się z azotu (97 % ± 2 % i 3 % wodoru ± 2 %)
Czytnik mikropłytek
Filtr 450 (±10) nM do czytnika mikropłytek
Filtr 500 (±10) nM do czytnika mikropłytek