Ten film pokazuje dotchawicze podawanie patogennego dla płuc inokulum bakteryjnego do znieczulonej myszy w celu modelowania infekcji dolnych dróg oddechowych.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Przeprowadzanie dotchawiczego podawania bakterii w modelu mysim
854 wyświetleń
⸱
30 października 2025
W tym artykule
Streszczenie
Protokół
Wszystkie procedury z udziałem modeli zwierzęcych zostały zweryfikowane przez lokalną instytucjonalną komisję ds. opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.
1. Wkraplanie dotchawicze (i.t.)
- Wstrzyknąć myszowi dootrzewnowo (i.p.) 0,1 ml/10 g masy ciała myszy z roztworem 150 mg/ml ketaminy + 20 mg/ml ksylazyny. Zabieg należy wykonać w kapturze ze źródłem światła, aby utrzymać zwierzę w cieple.
- Ściśnij przestrzeń międzypalcową myszy, aby sprawdzić, czy mysz jest odpowiednio znieczulona.
- Umieść mysz na plecach. Ogol brzuszną część szyi i zdezynfekuj chlorheksydyną i 70% alkoholem etylowym.
- Podnieś skórę górnej brzusznej części szyi za pomocą kleszczy do zębów szczurów. Wykonaj małe nacięcie (0,5-1,0 cm) nad grasicą za pomocą skalpela i ostrożnie wypreparuj mięsień, aby odsłonić tchawicę.
- Za pomocą strzykawki o pojemności 1 ml z igłą o sile 27 g powoli wstrzyknąć 0,05 ml powietrza, następnie 0,05 ml nieprzeznaczonego do pisania Haemophilus influenzae (NTHi) lub soli fizjologicznej jako kontrolę, a następnie kolejne 0,05 ml powietrza. Trzymaj zwierzę w pozycji pionowej przez około 1 minutę.
- Zamknij nacięcie klejem chirurgicznym. Trzymaj mysz w pozycji bocznej leżącej i ciepłej przez około 10 minut.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Zręczne szybkie rozwiązanie | Sigma | GS500-500ML | |
| Igła strzykawkowa 20/26 G | BD | REF305115/175 | |
| Strzykawka 1 ml | BD | NR KAT. 309602 | |
| Nożyczki preparacyjne, proste, o długości 10 cm | Kentscientific (Naukowy) | INS600393 | |
| Kleszczyki do tęczówki, ząbkowane, o długości 10 cm | Kentscientific (Naukowy) | INS650915 | |
| Pęseta 5 ze stali nierdzewnej, 11 cm długości | Kentscientific (Naukowy) | INS600095 |
