Hodowla szybko rozwijającej się bakterii Vibrio natriegens

Streszczenie

Źródło: Wiegand, D. J., Lee i in., Ekspresja białek bez komórek przy użyciu szybko rosnącej bakterii Vibrio natriegens. J. Vis. Exp. (2019)

Ten film pokazuje uprawę i zbiór Vibrio natriegens, szybko rosnącej bakterii, w napowietrzanych warunkach w celu przygotowania granulek bakteryjnych do wytwarzania surowego ekstraktu.

Protokół

Przygotowanie ekstraktu z komórek surowych Vibrio natriegens – kultura bakteryjna

1. Przygotować pożywkę do wzrostu bakterii V. natriegens LB-V2 (bulion lizogeniczny z solami V2) zgodnie z tabelą 1. Wysterylizuj pożywkę wzrostową przez autoklawowanie. Poczekaj, aż nośnik osiągnie temperaturę pokojową (RT). Przechowuj nadmiar nośników w RT.
   OSTROŻNOŚĆ: Nosić odpowiednie środki ochrony osobistej (PPE) i zapoznać się z instrukcjami obowiązującymi w laboratorium podczas obsługi autoklawu.
2. Użyj glicerolu z V. natriegens typu dzikiego, aby zaszczepić 3 ml pożywki LB-V2....

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Probówki 2 ml	Eppendorf powiedział:	22363352
HEPES (kwas 4-(2-hydroksyetylo)-1-piperazynoetanosulfonowy)	Sigma	H3375 powiedział:
LB (Luria-Bertani) Rosół (młynarz)	Sigma	L3522
Chlorek magnezu (MgCl₂)	Sigma	Zobacz materiał M8266
Chlorek potasu (KCl)	Sigma	Zobacz materiał P9333 powiedział:
Chlorek sodu (NaCl)	Sigma	Zobacz materiał S7653
Roztwór Tris (pH 8,0) - 1 m	Invitrogen	Zobacz materiał AM9856
Vibrio natriegens (typ dziki) Liofilizowany materiał	Kontroler ATCC (Kontroler T	14048