Opracowywanie mysiego modelu przewlekłej infekcji skóry Pseudomonas aeruginosa

Streszczenie

Źródło: de Vries, C. R., et.al. Model opóźnionej inokulacji przewlekłej infekcji rany Pseudomonas aeruginosa . J. Vis. Exp. (2020)

Ten film pokazuje opóźnione szczepienie luminescencyjnego Pseudomonas aeruginosa u myszy noszącej dwie pełnogrube rany grzbietowe pokryte przezroczystym opatrunkiem foliowym. Ułatwia to powstawanie biofilmu i powstawanie przewlekłych infekcji. Regularne monitorowanie bioluminescencji umożliwia ilościowe określenie obciążenia bakteriami oraz śledzenie postępu infekcji w czasie.

Protokół

Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały przeanalizowane przez lokalny instytucjonalny komitet ds. opieki nad zwierzętami oraz komisję weterynaryjną JoVE.

1. Szczepienie Pseudomonas aeruginosa

1. Rozcieńcz nocną hodowlę PAO1:lux do OD₆₀₀ = 0,05 w 75 mL podłoża Lysogeny (LB) zawierającego 100 μg/mL karbenicyliny i hoduj bakterie aż do wczesnej fazy wykładniczej (OD₆₀₀≈0,3). Powinno to zająć około 2–3 godziny.
2. Rozcieńcz PAO1:lux w fosforanowej soli buforowanej fizjologicznej (PBS) do stężenia (7,5 ± 2,5) x 10² CFU/mL. Upewnij się, że przygotujesz nadmiar inokulum, aby zapewnić odp....

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Zastrzyk chlorku sodu 0,9%	Hospira	2484457
Męce myszy C57BL/6J	Laboratorium Jacksona	664
Fosforanowa sól fizjologiczna (PBS) 1x	Corning	21-040-CV
Folia spożywcza do prasowania i uszczelniania	Cieszę się.	Nie ma
Strzykawka insulinowa Safetyglide, 1/2 mL, 30 G x 5/16 TW	BD	305934
Skala	Ohaus Scout Pro	SP202
Suplement suplementacji	Henry Schein Zdrowie Zwierząt	29908