Wizualizacja infekcji dróg moczowych w modelu myszy z wykorzystaniem bioluminescencji

Abstract

Źródło: Luyts, N. i inni. Podłużna kontrola infekcji dróg moczowych i ich leczenia u myszy za pomocą obrazowania bioluminescencji. J. Vis. Exp. (2021).

Ten film pokazuje indukcję i śledzenie infekcji dróg moczowych w modelu mysim z wykorzystaniem bioluminescencyjnego E. coli wstrzykniętego do pęcherza, gdzie zachodzi adhezja, inwazja i replikacja wewnątrzkomórkowa bakterii. Światło emitowane z bioluminescencyjnego operonu służy jako wskaźnik w czasie rzeczywistym obciążenia bakteryjnego podczas postępu infekcji.

Protocol

Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały przeanalizowane przez lokalny instytucjonalny komitet ds. opieki nad zwierzętami oraz komisję weterynaryjną JoVE.

1. Szczepienie zwierząt

1. Przygotowanie zwierząt
   1. Wybierz pożądany szczep myszy w zależności od pytania badawczego oraz dostępności linii nokautujących, szczegółów eksperymentalnych oraz różnic w podatności na zakażenia dróg moczowych. Pamiętaj, że cewnikowanie przezuretralne jest łatwiejsze u samic myszy. Nie używaj zwierząt poniżej 8 tygodnia, ponieważ są immunologicznie niedojrzałe. Tutaj użyto 12-tygodniowych samic myszy C57Bl/6J.
   2. Zamawiaj....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Paporyzator znieczulony	Harvard Apparatus Limited	Nie ma	https://www.harvardapparatus.com/harvard-apparatus-anesthetic-vaporizers.html
Baytril 100 mg/mL	Bayer	Nie ma	Enrofloksacyna
BD Insyte Autoguard 24 GA	BD	382912	Żółty angiocewnik, użyj sterylnej plastikowej końcówki do instylacji
Myszy C57Bl/6J	Janvier	Nie ma
Wirówka 5804R	Eppendorf	EP022628146
Dropsense 16	Nieokiełznane Laboratoria	Trinejskie	aby zmierzyć OD 600 nm
Fosforanowa sól fizjologiczna Dulbecco, Gibco	ThermoFisher Scientific	REF 14040-083
Etanol 70% denaturowany 5L	VWR International	85825360
Falcon 14ml z okrągłym dnem z polistyrenu, zatrzaskową kapsułką	Corning	352057
Falcon 50ml cellstart	Greiner	227285
Strzykawka Hamilton GASTIGHT, zamek luer lock PTFE, 100 μL	Sigma-Aldrich	26203	aby zapewnić powolną instytucję bakterii 50 μL
Pętla inokulacji	Roth	6174.1	holder: Art. Nr 6189.1
Iso-Vet 1000mg/g	Produkty weterynarii Dechra	Nie ma	Izofluran
System obrazowania IVIS Spectrum in vivo	PerkinElmer	REF 124262	Urządzenie obrazujące