Ocena przepuszczalności jelit u C. elegans po ekspozycji na bakterie

W tym artykule

Streszczenie

Źródło: Le, T. A. N., i in., Measuring the Effects of Bacteria and Chemicals on the Jelit of Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2019)

Ten film demonstruje test oparty na fluorescencji mającycy na celu ilościową przepuszczalność jelit u osób C. elegans, które były narażone na Pseudomonas aeruginosa. W porównaniu z kontrolami karmionymi Escherichia coli, robaki poddane patogenom wykazują zwiększoną przeciekliwość fluoroforu do jamy ciała, co wskazuje na uszkodzenie bariery nabłonkowej.

Protokół

1. Przygotowanie płytek pożywki wzrostu nicieni (NGM) do badania wpływu różnych bakterii na przepuszczalność jelit Caenorhabditis elegans (C. elegans)

W szklanej butelce o pojemności 500 ml umieść 1,25 g peptonu, 1,5 g NaCl, 8,5 g agaru, mieszadło magnetyczne oraz 487,5 mL wody destylowanej.
Dobrze wymieszaj mieszankę, autoklawuj przez 15 minut w temperaturze 121 °C, a następnie schłodzić do 55 °C w kąpieli wodnej przez 30 minut.
Wyjmij podłoże z kąpieli wodnej, dodaj składniki (0,5 mL 1 M CaCl₂, 0,5 mL cholesterolu, 0,5 mL MgSO₄, 12,5 mL KPO₄) do N....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Rysunek 1: Wpływ różnych bakterii na przepuszczalność jelitową C. elegans. Mikroskopowe obrazy robaków, w tym obrazy jasnego pola, fluorescencji FITC (zielony kanał) oraz połączone obrazy. Mikroskopowe obrazy robaków .......