Przygotowanie Gardnerella wagalis inoculum do modelowania nawracających infekcji dróg moczowych u myszy

Streszczenie

Źródło: O'Brien, wiceprezes i inni. Nawracająca infekcja dróg moczowych Escherichia coli wywołana przez narażenie pęcherza pochwy Gardnerella u myszy. J. Vis. Exp. (2020)

Ten film prezentuje przygotowanie szczepionki Gardnerella wagalis w celu ustanowienia mysiego modelu nawracającej infekcji dróg moczowych.

Protokół

1. Przygotuj Gardnerella wagalis inoculum
   UWAGA: Wszystkie etapy wykonuje się w komorze beztlenowej. Idealne czasy inkubacji hodowli różnią się w zależności od rodzaju szczepu G. vaginalis, przy czym niektóre wchodzą w fazę stacjonarną, a nawet zaczynają szybciej obumierać niż inne. Dlatego czasy inkubacji powinny być empirycznie określane dla danego szczepu przed przeprowadzeniem eksperymentów na myszach. Nie wiadomo, czy pozostałe/wszystkie szczepy G. vaginalis wywołają takie same efekty w tym modelu.
2. Szczep Streak G. wagalis z wywaru zamrażanego o temperaturze -80 °C na płytkę....

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Glukoza	Sigma	G7528	Dla NYCIII G. vaginalis media wzrostu
4-(2-hydroksyetylo)-1-piperazineethansulfonowy kwas (HEPES)	Cellgro	25-060-Cl	Dla NYCIII G. vaginalis media wzrostu
Chlorek sodu	Sigma	S3014	Dla NYCIII G. vaginalis media wzrostu
Proteose peptone #3	Fisher	DF-122-17-4	Dla NYCIII G. vaginalis media wzrostu
Ekstrakt drożdżowy	Fisher	DF0127-17-9	Dla NYCIII G. vaginalis media wzrostu
Spektrofotometr	BioChrom	80-3000-45	Pomiar bakteryjnego OD600
Streptomycyna	Gibco	11860038	Dodaj do G. vaginalis NYCIII selektywne płytki (1 mg/mL)