$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały przeanalizowane przez lokalny instytucjonalny komitet ds. opieki nad zwierzętami oraz komisję weterynaryjną JoVE.
1. Pobranie wymazu z lumenu pochwy w celu ilościowego obciążenia GBS
- Przygotuj jedną mikrowirówkę o pojemności 1,5 ml na mysz, dodając 100 μl soli fizjologicznej z buforem fosforanowym (PBS). Tuż przed wymazem zwilż wymaz w PBS.
- Unieruchom mysz i włóż wymazek 10 mm do światła pochwy. Delikatnie obróć wymaz 4 razy zgodnie z ruchem wskazówek zegara i 4 razy przeciwnie, wywierając lekki nacisk na ścianę pochwy.
- Przełóż wymaz do rurki mikrowirówki o pojemności 1,5 ml z 100 μl PBS. Przed powlekaniem zaworuj rurkę mikrowirówki na ~15 sekund, aby uwolnić bakterie z wymazu. Każdą próbkę rozcieńczaj seryjnie w PBS i nakładaj 20 μl rozcieńczeń 1:10 do 1:10 000 na różnych płytkach agarowych przygotowanych zgodnie z instrukcjami producenta. Inkubuj płytki w temperaturze 37 °C przez 24 godziny. Kolonie paciorkowców grupy B (GBS) będą miały jaskraworóżowy lub fioletowy kolor. Inne endogenne flory są hamowane lub pojawiają się jako kolonie niebieskie, białe lub szare.