Bioluminescencja ran oparzonych Acinetobacter baumanniii u myszy

Streszczenie

Źródło: Wang, Y. i in. In Vivo Badanie terapii przeciwdrobnoustrojowym niebieskim światłem w leczeniu wieloopornych infekcji oparzeń Acinetobacter baumannii z wykorzystaniem obrazowania bioluminescencji. J. Vis. Exp. (2017)

Ten film pokazuje procedurę obrazowania zakażeń ran oparzeniowych u myszy zaszczepionych Acinetobacter baumannii z bioluminescencyjnym operonem. Pokazuje, jak utlenianie podłoża katalizowane lucyferazą wytwarza światło proporcjonalne do obciążenia bakterii, umożliwiając monitorowanie postępu infekcji w czasie rzeczywistym za pomocą systemu obrazowania bioluminescencyjnego.

Protokół

Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały przeanalizowane przez lokalny instytucjonalny komitet ds. opieki nad zwierzętami oraz komisję weterynaryjną JoVE.

1. Bioluminescencyjne obrazowanie infekcji u myszy

1. Zrób zdjęcia myszy za pomocą systemu obrazowania w słabym świetle, który obejmuje kamerę z wzmocnionym sprzężeniem ładunku, kontroler kamery, komorę próbek oraz procesor obrazu.
2. Znieczulaj myszy za pomocą intraotrzewnowego zastrzyku koktajlu ketaminy i ksylazyny (100 mg/kg - 20 mg/kg). Delikatnie dotknij palca myszy patyczkiem watowym; brak odruchu palpebralnego sugeruje odpowiednią głębokość znieczulenia.
3. Uruchom oprogra....

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
IVIS	PerkinElmer Inc, Waltham, MA	IVIS Lumina Seria III	Przedkliniczne obrazowanie in vivo
Dioda LED dioda LED z diodą ludolującą	VieLight Inc, Toronto, Kanada	415 nm	Źródło światła do oświetlenia
Mysz	Charles River Laboratories, Wilmington, MA	BALB/c	7-8 tygodni wieku, 17-19 g wagi
Acinetobacter baumannii	Brooke Army Medical Center, Fort Sam Houston, TX	Izolat kliniczny	Inżynieryjne odkształcenie luminescencyjne
Potrawy Greinera	Sigma-Aldrich Co. LLC	P5112-740EA	35 mm ×10 mm