$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Rola mikrośrodowiska komórkowego jest uznawana za kluczową w określaniu losu i funkcji komórek w praktycznie wszystkich tkankach ssaków, od rozwoju do złośliwej transformacji. W szczególności, interakcja z sąsiednim zrębem była związana z mnóstwem zjawisk biologicznych; jednak konwencjonalne techniki ograniczają zdolność do badania przestrzennych i dynamicznych elementów takich interakcji.
W mikromechanicznej rekonfigurowalnej hodowli (RC) używamy mikroobrabianego podłoża krzemowego z ruchomymi częściami do dynamicznej kontroli interakcji komórka-komórka poprzez mechaniczne repozycjonowanie. Wcześniej metoda ta była stosowana do badania komunikacji międzykomórkowej w kokulturach hepatocytów i komórek niemiąższowych, wykazując interakcje zależne od czasu i ograniczony zakres rozpuszczalnej sygnalizacji 1.
Tutaj szczegółowo opisujemy przygotowanie i użycie systemu RC. Zaczynamy od zademonstrowania obchodzenia się z częściami urządzenia za pomocą pęsety, w tym uruchamiania między konfiguracją szczeliny a kontaktem (populacje komórek oddzielone wąską szczeliną 80 μm lub w bezpośrednim bliskim kontakcie). Następnie szczegółowo opiszemy proces przygotowania substratów do hodowli oraz wieloetapowy proces wysiewu komórek wymagany do uzyskania zlewających się monowarstw komórek. Korzystając z mikroskopii na żywo, ilustrujemy manipulację komórkami w czasie rzeczywistym między różnymi możliwymi konfiguracjami eksperymentalnymi. Na koniec pokazujemy, jakie kroki należy wykonać, aby zregenerować powierzchnię urządzenia do ponownego użycia: czyszczenie toluenem i piranią, powlekanie styropianem oraz obróbka plazmą tlenową.