1. Pozycjonowanie i przygotowanie zwierzęcia
Eksperymenty zostały zatwierdzone przez właściwą lokalną komisję etyczną i przeprowadzone zgodnie z wytycznymi Felasa.
- Wprowadź znieczulenie ogólne samicy królika rasy New Zealand White (2,5-3,5 kg) poprzez domięśniowy zastrzyk z Ketaminy (30mg/kg) i Ksylazyny (6mg/kg), a następnie kontynuuj znieczulenie gazowe (izofluran) po intubacji mechanicznej (średnica rurki 4mm, długość 18mm) w trakcie monitorowania EKG. Co 15 minut przeprowadzaj kontrolę odczuwania bólu poprzez uciśnięcie palca u nogi i dostosuj głębokość znieczulenia w przypadku wystąpienia reakcji dodatniej.
- Ustabilizuj królika w pozycji grzbietnej na płycie grzewczej.
- Przygotuj pole operacyjne poprzez usunięcie sierści od kąta żuchwy w dół do środka klatki piersiowej. Wszystkie procedury wykonuj w warunkach sterylnych.
2. Przygotowanie zewnętrznej żyły szyjnej
- Wykonaj cięcie w linii pośrodkowej od kąta żuchwy w dół do manubrium sterni.
- Używając mikroskopu operacyjnego, wybierz odcinek lewej żyły szyjnej zewnętrznej o długości 1 cm, pozbawiony odgałęzień żylnych, i wyizoluj go mikrochirurgicznie (Rysunek 1a). Przez cały czas trwania operacji często aplikuj miejscowo na naczynia i anastomozy 4% roztwór HCl papaweryny oraz roztwór antybiotyku (siarczan neomycyny 5mg/ml), aby zapobiec skurczowi naczyń i miejscowym infekcjom.
- Podwiąż żyłę proksymalnie i dystalnie szwami wielonitkowymi 4-0 (Vicryl, Ethicon Inc, New Jersey, USA), a następnie wyresekuj ją i przechowuj w soli fizjologicznej z heparyną (1000 IU heparyny w 20 ml 0,9% soli fizjologicznej i 1 ml 4% HCl papaweryny).
3. Przygotowanie obu tętnic szyjnych wspólnych (CCA)
- Przygotować odcinek lewej tętnicy szyjnej wspólnej (CCA), rozciągający się od rozwidlenia tętnicy szyjnej w dół aż do łuku aorty. W miarę możliwości zachować odgałęzienia tętnicze biegnące przyśrodkowo i zaopatrujące struktury krtani oraz tchawicy, a także wszystkie struktury nerwowe.
- Przygotować prawą tętnicę szyjną wspólną (CCA). Mobilizować ją w górę do rozwidlenia tętnicy szyjnej oraz w dół do pnia ramienno-głowowego.
- Podać dożylnie 1000 IU heparyny.
- Zaciśnąć tymczasowo prawą tętnicę szyjną wspólną (CCA) tuż poniżej rozwidlenia tętnicy szyjnej.
- Podwiązać proksymalnie prawą tętnicę szyjną wspólną (CCA) bezpośrednio nad pniem ramienno-głowowym. Przeciąć prawą tętnicę szyjną wspólną (CCA) powyżej podwiązania i przemyć kikut solą fizjologiczną z heparyną.
- Ostrożnie naciąć i wyciąć osłonkę zewnętrzną (adwentycję) na wolnym końcu prawej tętnicy szyjnej wspólnej (CCA). Starannie oczyścić z osłonki zewnętrznej odcinek lewej tętnicy szyjnej wspólnej (CCA) planowany do anastomozy, a następnie zaciśnąć go dystalnie i proksymalnie.
4. Anastomoza obu tętnic szyjnych wspólnych (CCA)
- Wykonać eliptyczną arteriotomię lewej CCA pomiędzy klamrami, dostosowując jej wielkość do planowanej anastomozy z prawą CCA i workiem żylnym. Przepłukać lewą CCA solą fizjologiczną z heparyną. (Figure 1b)
- Przyszyć tylny obwód kikuta prawej CCA do miejsca arteriotomii lewej CCA, używając od czterech do pięciu nierozpuszczalnych szwów monofilamentowych 10-0 (Ethilon 10-0, Ethicon Inc, New Jersey, USA).
- Wykonać cięcie podłużne w kikucie prawej CCA, aby dopasować go do połowy obwodu worka żylnego. W pierwszej kolejności anastomozować tylną ścianę worka żylnego z miejscem arteriotomii w lewej CCA, ponownie używając 4 do 5 szwów 10-0. Następnie anastomozować tylną stronę worka żylnego z tylną stroną prawej CCA za pomocą 3 do 4 szwów. (Figure 1c)
- Wykonać anastomozę w tej samej kolejności po stronie przedniej. (Figure 1d)
- Usunąć dystalną klamrę z prawej CCA. Tętniak zazwyczaj nie jest całkowicie szczelny, dlatego należy wypłukać uwięzione powietrze i zanieczyszczenia.
- Uszczelnić linie szwów wokół anastomozy i szyjki tętniaka za pomocą płata tłuszczowego i kleju fibrynowego (Evicel, Ethicon Biosurgery Inc., New Jersey, USA). Usunąć pozostałe klamry.
- Użyć rozpuszczalnych szwów 4-0 (Monocryl,Ethicon Inc, New Jersey, USA) do przerwanych szwów podskórnych, a następnie do ciągłego szwu skórnego.
5. Opieka pooperacyjna
- Podaj dożylnie kwas acetylosalicylowy w dawce 10 mg/kg oraz podskórnie 60 ml 5% glukozy.
- W celu zapewnienia skutecznej analgezji przez 72 godziny, naklej w ogolonym obszarze szyi zwierząt transdermalne plastry z macierzą fentanylu o szybkości uwalniania 12,5 μg/godzinę.
- Podawaj codziennie podskórnie heparynę drobnocząsteczkową w dawce 250 IU/kg przez 2 tygodnie.
6. Reprezentatywne wyniki:
Jeśli procedura zostanie przeprowadzona prawidłowo, tętniak pozostanie drożny, a zwierzęta wyzdrowieją w ciągu około 3 dni. W naszym doświadczeniu procedury obrazowe powinny zostać wykonane minimum tydzień później. W przeciwnym razie zwierzęta mogą nie tolerować zabiegu, co może prowadzić do ich utraty. W przypadku embolizacji zalecamy odczekanie około 4 tygodni, aby zagwarantować całkowitą endotelializację szyjki tętniaka. Stosując przedstawione techniki i zasady opieki, autorzy osiągnęli drożność tętniaka na poziomie 85,7% oraz brak śmiertelności w swojej niedawno opublikowanej serii.14 Aby zminimalizować wysoką zgłaszaną częstość powikłań jelitowych, sięgającą 20%,12 zapewniliśmy przedłużone pooperacyjne leczenie przeciwbólowe trwające 72 godziny, w przeciwieństwie do rutynowej analgezji trwającej 24 godziny. Tak intensywna opieka doprowadziła do braku powikłań żołądkowych. Agresywne prowadzenie przeciwkrzepliwości jest istotne dla osiągnięcia wystarczającego poziomu drożności tętniaka. Jest to zgodne z wynikami Grunwalda et al., wykazującymi pozytywne efekty połączonego leczenia przeciwkrzepliwego.17 Ze względu na agresywną przeciwkrzepliwość kluczowe jest skuteczne uszczelnienie anastomozy. Mamy bardzo dobre doświadczenia w stosowaniu nowego kleju fibrynowego (Evicel, Ethicon Biosurgery Inc., New Jersey, USA). Ponadto zalecamy stosowanie małych królików (maksymalnie 3,5 kg), ponieważ w naszym doświadczeniu powikłania często wiążą się z nadwagą osobników.