Izolacja neutrofili o niskiej gęstości otrzewnej: technika uzyskiwania neutrofili o niskiej gęstości z płynu do płukania otrzewnej przy użyciu magnetycznego sortowania komórek aktywowanych

Method Article

Izolacja neutrofili o niskiej gęstości otrzewnej: technika uzyskiwania neutrofili o niskiej gęstości z płynu do płukania otrzewnej przy użyciu magnetycznego sortowania komórek aktywowanych

April 30th, 2023

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Źródło: Kanamaru, R. et al. Pułapki zewnątrzkomórkowe neutrofili generowane przez neutrofile o niskiej gęstości uzyskane z płynu do płukania otrzewnowej pośredniczą we wzroście i przyczepianiu komórek nowotworowych. J. Vis. Exp. (2018)

W tym filmie opisujemy procedurę izolowania neutrofili o niskiej gęstości (LDN) z płynu z płukania otrzewnowej u pooperacyjnego pacjenta. Uzyskane w ten sposób LDN mogą być wykorzystane w dalszych eksperymentach w celu zrozumienia ich roli we wzroście i progresji guza.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszystkie procedury z udziałem ludzi zostały przeprowadzone zgodnie z instytucjonalnymi, krajowymi i międzynarodowymi wytycznymi dotyczącymi dobrobytu ludzi i zostały sprawdzone przez lokalną komisję rewizyjną instytucji.

1. Izolacja LDN z płukania jamy brzusznej

Pobieranie próbek
1. Wlać 1,000 ml normalnej sterylnej soli fizjologicznej bezpośrednio do jamy brzusznej przed zamknięciem rany u pacjentów, którzy przeszli operację jamy brzusznej z powodu nowotworu złośliwego przewodu pokarmowego.
  nuta: Próbki uzyskano od pacjentów, którzy przeszli resekcję żołądka, kolektom....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Rycina 1: Tworzenie się NET po posiewie LDN otrzewnej. orazPo odwirowaniu w gradicynie gęstości pooperacyjnego płynu z płukania, pokazano komórki odzyskane z warstwy pośredniej. (B) Następnie CD66b(+) LDN oddzielono od komórek jednojądrzastych CD66b(-) i hodowano na 6-dołkowych płytkach pokrytych poli-L-lizyną, a następnie dodano barwnik barwiący jądrowo i natychmias.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Nie stwierdzono konfliktu interesów.

Materials

List of materials used in this article
Name	Company	Catalog Number
Ficoll-Paque PLUS	GE Healthcare, SZWECJA	17-1440-02
Mikrokulki CD66b prosto z™ krwi pełnej	Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Niemcy	Numer katalogowy: 130-104-913
Blok Fc	Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Niemcy	Numer katalogowy: 130-059-901
Roztwór płuczący MACS	Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Niemcy	130-091-222
Roztwór 0,5mol/l-EDTA (pH 8,0)	Nacalai tesque, Japonia	Numer katalogowy: 06894-14
Roztwór podstawowy MACS BSA	Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Niemcy	Numer katalogowy: 130-091-376
Kolumny LS	Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Niemcy	Numer katalogowy: 130-041-306
Separator magnetyczny MACS	Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Niemcy	Numer katalogowy: 130-042-501

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Izolacja neutrofili o niskiej gęstości otrzewnej: technika uzyskiwania neutrofili o niskiej gęstości z płynu do płukania otrzewnej przy użyciu magnetycznego sortowania komórek aktywowanych

In This Article

Abstract

Protocol

Results

Disclosures

Materials

Reprints and Permissions

Tags

Related Articles