Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
2.9K wyświetleń
⸱
30 kwietnia 2023
Źródło: Teal, E. et al. Pierwotna jednowarstwowa hodowla nabłonka żołądka pochodząca od myszy i ludzi do badań nad regeneracją. J. Vis. Exp. (2018)
Ten film opisuje metodę izolowania komórek nabłonka żołądka od ludzkiej tkanki dna żołądka. Wyizolowane komórki nabłonkowe można wykorzystać jako model in vitro do badania ich roli regulacyjnej w fizjologii i patofizjologii żołądka.
Wszystkie procedury z udziałem ludzi zostały przeprowadzone zgodnie z instytucjonalnymi, krajowymi i międzynarodowymi wytycznymi dotyczącymi dobrobytu ludzi i zostały sprawdzone przez lokalną komisję rewizyjną instytucji.
1. Ustanawianie organoidów 3D dna żołądka pochodzenia ludzkiego
UWAGA: Aby uniknąć skażenia, wykonaj protokół w całości w sterylnym kapturze do hodowli tkankowej. Ludzką tkankę dna wątroby pobrano od pacjentów poddawanych rękawowej resekcji żołądka.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| DPBS wolny od Ca2+/Mg2+ | rybak | 21-031CV | |
| Sterylna gaza | |||
| Zakrzywione kleszcze hemostatyczne | |||
| Sterylna szalka Petriego | |||
| Sterylne żyletki | |||
| Zaawansowane podłoże Dulbecco's Modified Eagle/F12 (podłoże podstawowe) | Technologie życiowe | Numer katalogowy: 12634-010 | |
| Penicylina/Streptomycyna | Thermo Scientific | SV30010 | |
| Amfoterycyna B/gentamycyna | Thermo Scientific | Czynnik R01510 | |
| GlutaMAX (L-glutamina) | Technologie życiowe | 25030-081 | |
| Kanamycyna | Rybak termiczny | RO1510 | |
| Kolagenaza typu 1 | Worthington | LS004214 | |
| Albumina surowicy bydlęcej | Sigma Aldrich | Nr kat. A9418 | |
| Bufor HEPES | Sigma Aldrich | H0887 | |
| 125 ml Kolba okrągłodenna | |||
| 1 cal (25 mm) Mieszadło | |||
| Gumowa przegroda | |||
| Igły do kręgosłupa 20G o długości 3,5 cala | Rybak termiczny | 405182 | |
| Kimwipes (bibułka) | Fischer Naukowy | 06-666C | |
| Zbiornik tlenu z gumowym wężem | |||
| Pierścieniowe zaciski stojaka | |||
| 37 °C Łaźnia wodna | |||
| 5 ml probówek do hodowli komórkowych | rybak | 14-956-3C |
