Zbiór błony chorioallantoicznej piskląt: metoda izolowania błony chorioomocznowej zawierającej przeszczep guza z jaja kurzego

W tym artykule

Streszczenie

Źródło: Schmidt, L. B. et al. Model in vivo błony kosmówkowo-omoczniowej piskląt do oceny inwazji okołonerwowej w raku głowy i szyi. J. Vis. Exp. (2019 rok)

Ten film pokazuje izolację błony kosmówkowo-omoczniowej zawierającej guz od zarodka kurczaka. Pozyskany CAM może być wykorzystany do dalszych zastosowań.

Protokół

Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. Zbieranie CAM

Przygotować płytki 6-dołkowe o 4% PFA (paraformaldehydzie) pH 7,0; jedna studzienka na jajko, 2 ml na studzienkę.
Przynieś jaja na stół laboratoryjny. Za pomocą igły dołączonej do strzykawki w celu perforacji opatrunku foliowego, upuść około 300 μl PFA na CAM, aby lekko usztywnić CAM, ułatwiając w ten sposób proces zbioru. Powtórz to dla wszystkich jaj.
Za pomocą nożyczek usuń górną połowę skorupki jajka (w miejscu, w którym znajduje się okno operacyjne) z przymocowanym do niej modułem CAM (Rysunek 1I). Zmniejsz rozmiar tej połowy do około 3 cm średnicy. Chwyć CAM cienkimi kleszkami i odłącz go od skorupki jajka, umieszczając go w PFA.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

figure-results-1
Rycina 1: Szczepienie DRG, komórek i pobieranie CAM: W dniu 8: A. CAM łatwo zaobserwować po usunięciu membrany parafinowa. B-C. Za pomocą drobnych kleszczyków DRG umieszcza się na CAM. Jajo przykrywa się dressingiem foliowym i umieszcza w inkubatorze; Strzałki wskazują otwory, które są zakryte. W dniu 10: E-F. Opatrunek foliowy jest usuw...